附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖和miR-155表达的影响

目的 观察附子汤对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖的影响,研究附子汤对miR-155表达的影响并进一步探讨其抗类风湿性关节炎的作用机制。方法 体外培养MH7A细胞,设空白组、附子汤高剂量组（25 g·L^-1）、低剂量组（12.5 g·L^-1）和硫酸羟氯喹阳性药组（0.006 25 g·L^-1）,采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）试剂盒法检测细胞增殖,流式细胞术检测MH7A细胞周期的改变;应用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法检测药物处理后miR-155及其下游基因含SH2结构域的肌醇5-磷酸酶-1（SHIP-1）、蛋白激酶B3（Akt3）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR） mRNA表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、Akt3和mTOR的蛋白表达。结果 附子汤体外在质量浓度6.25 g·L^-1以上时,能明显抑制MH7A增殖,且呈明显的量-效关系和时-效关系。与空白组比较,附子汤高、低剂量组G₂/M期细胞比例均明显增加（P<0.05）,高剂量组G₀/G₁期细胞比例明显降低（P<0.05）,其细胞周期的阻滞作用呈明显的量效关系。与空白组比较,附子汤高、低剂量组miR-155的表达均明显下调（P<0.05）;附子汤高剂量组SHIP1 mRNA表达明显上调、Akt3 mRNA表达明显下调（P<0.05）,附子汤高、低剂量组mTOR mRNA表达均明显下调（P<0.05）。与空白组比较,附子汤高、低剂量组的PI3K、Akt3和mTOR的蛋白表达均明显下调（P<0.05）。结论 附子汤对MH7A细胞增殖具有显著的抑制作用,作用机制与下调miR-155的表达,从而促进SHIP-1的表达,抑制其下游PI3K/Akt3/mTOR信号通路的基因表达有关。     

贝伐单抗联合SN-38抑制结肠癌细胞增殖的机制

目的 探讨贝伐单抗联合伊立替康(CPT-11)的活性代谢产物SN-38对结肠癌细胞增殖的抑制作用及其机制.方法 在缺氧条件下,将贝伐单抗和SN-38作用于人结肠腺癌细胞LoVo,应用四甲基偶氮唑监(MTT)法,检测药物对细胞增殖的抑制作用.分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot和酶联免疫吸附试验(ELISA),分析药物作用后缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)在基因和蛋白表达水平的变化;通过药物对丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰三磷酸肌醇-丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K-AKT)通路的影响,分析贝伐单抗和SN-38的联合作用机制.结果 贝伐单抗联合SN-38序贯给药方案较同时给药对细胞增殖的抑制更强,且以先SN-38后贝伐单抗的给药顺序作用最强,IC50值为(0.057±0.009)μmol/L,较相反给药顺序强3.8倍,较同时给药强8.9倍.HIF-1α的表达水平随着缺氧时间的延长而升高,贝伐单抗和SN-38同时作用可显著抑制其表达;VEGF的表达也随着缺氧时间的增加逐渐增加,SN-38作用12 h以上可使VEGF表达下降59.4%,200μg/ml的贝伐单抗作用8 h几乎可完全抑制VEGF表达,此时加入SN-38仍可使VEGF表达进一步降低.MAPK通路的p-ERK表达随缺氧时问的增加而升高,SN-38和贝伐单抗同时作用可使p-ERK的表达完全阻断,这与两药对HIF-1α的抑制是一致的.ERK的选择性抑制剂PD98059能够增强贝伐单抗对p-ERK的抑制,同时也增加了贝伐单抗对HIF-1α的抑制.p-AKT的表达虽然随着缺氧时间的延长有所升高,但贝伐单抗和SN-38对其影响并不显著.结论 VEGF靶向药物联合化疗药物对细胞增殖的抑制是方案依赖性的,贝伐单抗和SN-38通过对HIF-1α和MAPK通的调控发挥协同作用.     

暴盲的辨证施护

暴盲是指眼外观端好,猝然一眼或两眼视力急剧下降,甚至失明的严重内障眼病。此病与现代医学中的视网膜中央动脉阻塞、急性视神经炎、视网膜脱离等病相似,是眼科急、重症之一。笔者根据其发病机制,应用辨证施护的方法配合治疗,效果颇优,现将粗浅体会报告于下。     

HPLC法测定白花前胡中白花前胡丙素和紫花前胡中紫花前胡苷的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定白花前胡根中白花前胡丙素 (dl-praeruptorinA ,Pd -Ia)和紫花前胡根中紫花前胡苷 (nodakenin ,NDK)含量的方法。方法 :色谱柱Shim -PackCLC -ODS ,Pd -Ia的流动相为甲醇 -水 (79∶2 1)和NDK的流动相为乙腈 -甲醇 -水 (2 0∶5∶75 ) ,流速为 1 0mL·min- 1 ,紫外检测波长分别为 32 3和 334nm。结果 :Pd -Ia及NDK的线性范围分别为 0 0 8～ 0 8μg和 0 0 1～ 0 10 μg ,相关系数均为 0 9999,平均回收率分别为 98 5 3%～ 99 2 7%和 97 6 0 %～99 87% ,RSD小于 2 %。结论 :方法准确 ,简便 ,快速 ,灵敏度高 ,对常用中药前胡的质量控制有较重要意义。     

芒果苷大鼠在体肠道吸收机制研究

目的:研究芒果苷大鼠在体肠道吸收机制。方法:采用大鼠在体肠段灌流模型,建立高效液相色谱/紫外分光光度法测定肠循环液中芒果苷的浓度,研究不同芒果苷浓度、胆汁及吸收部位对芒果苷吸收参数的影响。结果:芒果苷在5.0~25.0μg.mL-1浓度范围内对小肠吸收速率常数(Ka)无影响;在12.5μg.mL-1浓度下对结扎胆管大鼠的小肠Ka有影响;各肠段的Ka回肠>空肠>结肠>十二指肠,分别为0.164、0.132、0.125、0.107h-1。结论:芒果苷的吸收符合一级动力学特征,吸收机制为被动扩散;芒果苷在各肠段均有较好的吸收,胆汁使芒果苷在小肠的透过系数增大。     

HIV-1 Tat通过抑制启动子活性调控MCAK基因表达

目的验证HIV-1Tat对有丝分裂着丝点关联驱动蛋白MCAK基因表达的调节作用并探讨其分子机制。方法利用表达Tat的人横纹肌肉瘤细胞(TE671)模型及原核表达纯化的Tat蛋白,通过Northern印迹法和蛋白印迹技术验证HIV-1 Tat对MCAK基因表达的抑制作用。PCR扩增MCAK基因各启动区片段,与荧光素酶报告质粒相连接,并转染到TE671细胞,通过荧光素活性分析法检测DNA片段启动活性,确定MCAK基因的活性启动区域。进一步通过HIV-1Tat与MCAK启动区作用,分析Tat对启动子活性的调控作用。结果Northern印迹和蛋白印迹结果证实Tat蛋白对MCAK转录、翻译水平的表达都有强烈的抑制作用;荧光报告质粒检测系统分析表明MCAK的核心启动区存在于-399～+1bp区域,且其启动子活性在Tat存在的情况下受到明显的抑制。结论HIV-1 Tat能作用于MCAK基因启动区-399～+1bp区域,导致MCAK启动子活性降低,从而抑制MCAK基因的表达。     

扬州市2002-2003食源性致病菌监测研究

〔目的〕了解本市食品中沙门菌、EHECO157∶H7、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌的污染状况 ,初步确定易受污染的食品 ,为食源性疾病监测提供科学依据。〔方法〕采集 6大类食品 ,按国标及相关方法进行上述 6种致病菌进行分离、生化及血清学鉴定 ,并对部分检出沙门的样品进行了沙门菌的定量计数。〔结果〕45 0件样品中共检出致病菌 3 8株 ,总检出率为 8.4% ,其中沙门菌 10株 ,检出率为 2 .2 % ;沙门菌定量计数 ,含菌量最高达15 0cfu/g ,最低为 <5 0cfu/g。单增李斯特菌 2 1株 ,检出率为 4.7% ;金黄色葡萄球菌 6株 ,检出率为 1.3 % ;副溶血性弧菌 1株 ,检出率为 0 .2 2 %。 40件检测空肠弯曲菌生肉样品中检出空肠弯曲菌 3株。末检出EHECO157∶H7。〔结论〕沙门菌主要污染生肉制品 ,单增李斯特氏菌主要污染散装熟食制品 ,而金黄色葡萄球菌则主要污染生奶样品。空肠弯曲菌在生肉制品中存在一定程度的污染。EHECO157∶H7尚末检出。进一步加强生肉制品、散装熟食的食品卫生管理 ,对减少本市食源性疾病有一定意义     

2008-2011年北京某大学教职工糖尿病患病前瞻性调查及影响因素分析

目的对同一人群5 609名教职工连续三年的糖尿病患病和相关因素的变化情况进行前瞻性调查。方法 2008年对某高校教职工参加体格检查的队列人群追踪随访3年,调查分析糖尿病和相关影响因素三年间的变化趋势。结果三年间糖尿病的患病率从7.67%上升到9.13%,差异有统计学意义(χ2=7.79,P<0.01),但是男性和女性在各年龄段的分组中,均没有显著的升高,只有在合计的60~69岁年龄段糖尿病患病率有明显的升高(χ2=5.04,P<0.05)。随着年龄的增长糖尿病患病率逐渐升高,70~79岁年龄组除外。全人群血脂异常的患病率三年间从30.61%降至27.53%,差异有统计学意义(χ2=12.94,P<0.001)。但年龄分组后,只有60~79岁年龄组全人群(χ2=13.72,P<0.001)和60岁以上的女性人群(χ2=14.25,P<0.001)血脂异常的患病率显著下降。Logistic回归分析显示,年龄、空腹血糖是糖尿病患病的危险因素。结论加强对教职工人群的糖尿病健康教育和防治行为干预,特别是要注意重点人群的防治干预和血糖的监测。     

某高校教工血尿酸水平与糖尿病发病关系的研究

目的探讨北京某高校教工血尿酸水平与糖尿病发病的关系。方法 2006-2016年期间,对参加过2006年教工健康体检的人中空腹血糖7.0mmol/L、无糖尿病病史且未使用降糖药物的教工进行随访观察,到2016年底,共计纳入1 595名教工作为研究对象。根据研究对象的性别、高血压患病情况、血尿酸水平进行分组,分析不同血尿酸水平对新发糖尿病的影响。结果非高血压女性教工中,不同尿酸组教工的血压,体质指数(BMI),血糖,血脂水平比较,除了高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),其他指标的差异均有统计学意义(P0.05);高血压女性教工中,不同尿酸组教工的甘油三酯(TG),HDL-C水平比较,差异均有统计学意义(P0.05)。非高血压男性教工中,不同尿酸组教工的BMI,血清胆固醇(TC),TG及HDL-C水平比较,差异均有统计学意义(P0.05);高血压男性教工中,不同尿酸组教工的BMI,TG水平比较,差异均有统计学意义(P0.05)。截至2016年底,研究对象中有78例新发糖尿病,发病率为5.00/1 000人年。女性非高血压组和男性非高血压组人群从尿酸第2组(女性:尿酸186～218μmol/L;男性:尿酸233～274μmol/L)开始,随着尿酸水平的逐渐升高,糖尿病的发病率也随之升高,但差异均无统计学意义(P0.05)。此外,女性高血压组和男性高血压组人群中,不同尿酸水平研究对象糖尿病发病率的差异也无统计学意义(P0.05),但在高血压患者中,不论男性或者女性,当其血尿酸水平在第3组(女性:218～249μmol/L;男性:274～313μmol/L)时,糖尿病的发病率最高,男女发病率分别为18.81/1 000人年,17.00/1 000人年。结论当女性高血压患者血尿酸水平为218～249μmol/L,男性高血压患者血尿酸水平为274～313μmol/L时,其糖尿病的患病风险可能会增加。     

经导管射频消融治疗阵发性室上性心动过速的初步体会

经导管射频消融治疗9例预激综合征和3例房室结双径路所致室上性心动过速患者。9例预激综合征共9条旁道,左前壁2条,左侧壁3条,左后间隔、右前壁、右后间隔、右前间隔各1 条.除1例右前壁旁道外,其余8条旁道均消融成功.3例房室结双径路患者2例阻断慢径路,1例阻断快径路.