中医阴阳学说指导下的DNA甲基化研究思路

中医理论认为,阴阳失调是疾病发生与发展的关键,通过调和阴阳使"阴阳自和"是中医治疗疾病的目标。认为阴阳失调的部分现代生物学基础在于DNA甲基化的失控(包括异常的高甲基化与低甲基化)。从中医阴阳的"自和"角度出发,调节疾病异常的高甲基化基因与异常的低甲基化基因,使其恢复正常,对于上述疾病的治疗具有重大意义。提出在进行中药干预疾病异常基因甲基化水平的相关研究时,不仅要关注其去甲基化效应,同时还应关注其促甲基化作用,即中药的双向甲基化调控作用。     

中草药生物转化工程与中医药创新

在中医药理论和现代人体生命科学理论的基础上,从中药成分代谢研究中探析,结合系统生物学等现代学科理念,运用先进的分析检测技术和生物转化技术,尤其是体外生物转化技术,可改善中药制剂的疗效与个体差异,提出新的中医药产业工程——中草药生物转化工程,以及相应的创新中药——生物中药。重点探讨了微生物转化与酶法转化技术在创新中药研发体系中的应用前景。     

喉癌组织微血管密度的定量测定及其临床意义的研究

目的:定量研究喉癌患者不同组织处血管的形态结构和分布,探讨喉癌血管密度(bloodvesseldensity,BVD)的临床意义。方法:应用5′核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色方法定量检测46例喉癌患者癌内组织、癌旁组织及正常组织的BVD。结果:喉癌组织内血管分布呈明显的多态性;每200倍视野BVD在癌内组织为(16·20±4·67)个,在癌旁组织为(23·76±6·24)个,两组间比较差异有统计学意义,t=17·445,P=0·000;无论在癌内还是癌旁组织,BVD都与颈淋巴结转移状态密切相关,t值分别为-9·971和-11·306,P值均为0·000。此外,在声门上型和声门型喉癌组间(t值分别为3·398和4·106)、临床分期T1~2期与T3~4期间(t值分别为-7·329和-10·751)以及不同的肿瘤分化程度间(F值分别为12·253和12·635)差异亦均有统计学意义,P值均为0·000。结论:喉癌组织血管生成与肿瘤生长及淋巴结转移有关。癌内组织和癌旁组织BVD的高低可以作为预测喉癌颈淋巴结转移的重要指标之一。     

静脉留置针连接镇痛泵的做法与体会

剖宫产术后伤口疼痛和宫缩疼痛在术后48h内最剧烈。如今镇痛泵的应用也越来越普遍。如何既能减轻产妇疼痛,又能减少术后静脉穿刺,我科采用Y型静脉留置针的方法对32例病人运用浅静脉穿刺置管后连接镇痛泵,效果满意。现介绍如下。     

汪龙德主任医师畅三焦化水湿法在胃痞治疗中的运用

胃痞病因复杂,病机多变,病程缠绵,严重影响人们的生活质量。汪龙德主任医师在临证中经常强调三焦生理病理与胃痞的关系,认为三焦气机不畅、气化不利是胃痞的主要病机,并提出畅三焦化水湿法,广泛应用于临床,疗效显著,故总结如下。     

多指标成分含量测定与指纹图谱分析在中药制备工艺与质量控制中的应用

现有的以单一化学指标的变化情况来控制中药制备工艺的方法,难以体现制备过程中化学成分的整体变化情况,也很难保证中药药效物质基础的有效传递。采用多指标成分含量测定+色谱指纹图谱的控制模式,可以实现对制备工艺的全程把关,以及对产品质量的精确控制,有效保证中药的有效性和稳定性,并将成为中药质控的重要手段,具有较好的应用前景。     

基于动物热活性检测系统分析动物热活性影响因素

目的基于动物热活性监测系统进行动物热活性影响因素分析,以期对中药寒热药性评价进行方法学探索。方法采用动物热活性监测系统,考察品种、性别及适应时间对ICR、BALB/c及KM种小鼠在不同温区停留时间比例(RTR)的影响。结果 ICR、BALB/c种小鼠可耐受最低温度为15℃,最高为40℃;与适应前比较,15℃温区内ICR、BALB/c、KM种小鼠分别在6、8、4h,30℃温区内分别在6、6、4h,40℃温区内分别在4、6、8h,RTR值均开始减少(P<0.05);雌、雄性KM小鼠在15~40℃温区的RTR值差异无统计学意义(P>0.05)。结论在动物热活性监测系统中,3个品种小鼠的可耐受温度范围大致为15~40℃,累计适应4~8h后对温区间温差能形成相对稳定的记忆,且雌、雄性KM小鼠对同一温度的感知基本一致。     

毛细管区带电泳法测定三白草中芦丁和槲皮素的含量

目的:建立毛细管区带电泳法测定三白草中芦丁和槲皮素的含量.方法:采用石英毛细管(50 cm×50μm i.d.,有效长度为41 cm),以15 mmol/L硼砂(pH 8.5)为背景电解质,运行电压28 kV,重力进样10cm,12 s,紫外检测波长254nm.结果:芦丁在0.5-100 mg/L浓度范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均回收率为97.2%.槲皮素在2.0-200mg/L浓度范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为96.0%.结论:该法简便、快速、污染小,适用于三白草药材中芦丁和槲皮素含量的测定.     

三七3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶基因的克隆和生物信息学分析

目的克隆三七总皂苷甲羟戊酸合成途径中的1个关键酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme-A reductase,HMGR)基因,为进一步研究HMGR蛋白的功能及开展三七皂苷的合成生物学研究奠定基础。方法根据NCBI上已公布的同属人参的HMGR基因全长序列(登录号GU565097.1)设计特异性引物。利用RT-PCR技术,以三七愈伤组织总RNA反转录的cDNA为模板扩增基因片段;并对其编码的蛋白进行生物信息学预测和基因表达分析。结果序列分析表明,获得的三七HMGR(命名为PnHMGR)基因的cDNA序列大小为1 893 bp,该序列与人参、刺五加和杜仲中HMGR基因的一致性分别达到98%、93%、80%,且含有大小为1 725 bp的开放阅读框,经Genbank查询为一新的cDNA。生物信息学预测PnHMGR基因编码蛋白包含2个跨膜区,不含信号肽,具有HMGR催化作用的活性中心结构域。实时荧光定量PCR检测到PnHMGR基因在三七细胞生长30 d表达量最高。结论首次从药用植物三七中克隆得到HMGR基因的编码区序列,为进一步鉴定PnHMGR的功能和开展三七皂苷的合成生物学研究奠定了基础。     

基于多元统计和社会网络分析的中国儿童保健学科知识发展可视化研究

目的 通过多元统计和社会网络分析法中主题词共现的方式,研究中国儿童保健学科知识发展和分布,研究学科知识聚类,预测未来发展趋势。方法 检索《中华儿科杂志》、《临床儿科杂志》、《中国实用儿科杂志》和《中国儿童保健杂志》,双人手工筛选儿童保健相关文献,按照文献数量和中国人均GDP水平分为1978至1994年、~2003年和~2011年3个阶段,使用Endnote X4软件提取主题词,建立共词矩阵;使用SPSS 17.0软件对共现矩阵进行转换、降维和聚类分析,并根据聚类分析结果绘制战略坐标图;使用Ucinet 6.0软件绘制可视化网络图形。结果 共提取文献5 771篇,成功建立并直观展示了中国儿童保健学科知识可视化图谱及发展趋势。1978至1994年17年儿童保健发文总量162篇（年均9.5篇）,1995年后17年发文总量5 618篇（年均330篇）,后者是前者发文总量的34 .8倍;1978年至累积发文近百篇历经了14年（1991年）,累积发文超千篇又经过了7年（1998年）,以后每3年约增加1 000篇。1978至1994年阶段中国儿童保健学科发展缓慢,方向零散,聚类归纳欠佳,佝偻病研究突出。~2003年阶段以儿童营养性疾病为研究核心,聚类归纳较好,构建了中国儿童保健学科基本框架,新兴研究领域发展稍显不足。~2011年阶段儿童社会心理行为研究成为核心,研究方法更加科学,各个聚类发展较之前平衡,知识更新迅速。结论 中国儿童保健学科研究起步于20世纪90年代初,新千年后有了长足的进步,知识网络是一个逐渐完善的过程,并与国家的重视和经济发展相吻合。儿童保健研究方法学和儿童心理和社会行为发育规律等8个聚类形成了目前中国儿童保健学科架构,其中儿童发育和流行病学为最核心主题词。