去细胞周围神经移植物的制备及生物相容性评测

目的：制备去细胞周围神经移植物并评测其生物相容性。 方法：实验于2005-05／12在解放军第四军医大学口腔医学院组织病理教研室和组织工程实验中心完成。①将猪肋间神经经低渗、-80℃反复冻融和NaOH裂解等方法制备去细胞神经异体移植物；光、电镜观察其结构特征。②材料细胞毒性试验按照GB／T16886．5-2003《医疗器械生物学评价》体外细胞毒性试验的试验方法进行，毒性程度的评估标准参见美国药典。③大鼠皮下植入试验，取成年SD大鼠9只，于脊柱中线两侧约2cm处平行各取2点作为皮下植入点，植入1cm去细胞异体神经移植物。于手术后第1，2，4周时各取1只大鼠麻醉状态下处死，作组织切片检查。 结果：去细胞神经异体移植物的制备：①应用正常猪的周围神经，清除许旺细胞、神经外膜和束膜细胞以及神经纤维的髓鞘和轴突，保存由许旺细胞基底膜管以及神经外膜和束膜的细胞外基质构成的三维支架结构。②生物相容性测试结果：显示去细胞神经异体移植物细胞毒性试验为1级。③SD大鼠皮下植入试验结果：去细胞神经异体移植物无明显的免疫排斥反应。 结论：该方法所制备的去细胞神经移植物神经膜管结构保存完好，有良好的组织相容性，可能成为自体神经移植的替代材料。     

缓释骨形态发生蛋白-2的壳聚糖温敏凝胶促进牙周组织再生的实验研究

目的观察自制的加载重组人骨形态发生蛋白- 2（rhBMP- 2）的壳聚糖温敏凝胶修复牙周组织缺损的效果。方法选取3只健康雄性杂种犬制备前磨牙区人工Ⅱ度根分叉区组织缺损模型,随机分为空白对照组、空白凝胶组及载药凝胶组,术中先严密缝合组织瓣,然后对空白凝胶组及载药凝胶组区域分别注射先期配制并消毒好的空白凝胶和载药凝胶,术后8周取材行大体及组织学观察。结果载药凝胶组出现明显的牙周组织再生,而空白对照组和空白凝胶组仅有少量的牙周组织再生。载药凝胶组与空白对照组及空白凝胶组均有统计学差异（P<0.05）,空白对照组和空白凝胶组相比,没有统计学差异。结论载rhBMP- 2的壳聚糖温敏凝胶可有效促进牙周组织再生,同时简化手术操作,是一项有潜力的牙周组织再生手段。     

猪脱细胞角膜基质的制备及组织学特征观察

目的:制备低抗原性、保留天然角膜结构的组织工程角膜支架材料.方法:对猪角膜进行反复冻融联合酶消化,最后冷冻干燥,观察其组织学特征.结果:制备的脱细胞猪角膜基质的细胞成分能被有效去除,材料保留了利于角膜上皮生长的基底膜和有序排列的网状的基质胶原结构,有一定的强度和韧性.结论:采用反复冻融联合酶消化、冷冻干燥法能获得一种无细胞的组织工程角膜支架材料.     

关节镜下应用等离子刀治疗严重膝关节粘连

目的探讨关节镜下应用等离子刀治疗严重膝关节纤维性僵直的术后疗效。方法作者自2001年11月至2004年4月,采用关节镜下等离子刀治疗严重膝关节粘连18例,与前期切开治疗的28例相比较。结果关节镜组关节活动度从术前58.4°,平均达到110.6°,增加了51.2°(P<0.01),同切开组相比,术后住院时间、手术时间、出血量及术后康复时间均明显减少(P<0.01),并发症少(P<0.05)。结论关节镜下等离子刀粘连松解术具有手术操作简单易行、创伤小和术后膝关节功能恢复快、恢复良好的优点。     

盆底神经解剖定位及实时电生理监测技术在机器人辅助腹腔镜根治性前列腺切除术中的应用探索(附11例报告)

目的:观察神经电生理监测系统在机器人辅助腹腔镜根治性前列腺切除术中进行盆底神经解剖性定位、全程功能监测和功能保护的应用情况,探讨术中保护盆腔神经及神经监测的应用前景.方法:选取2021年1月-2021年4月在中国人民解放军总医院第一医学中心确诊为前列腺癌,并接受根治性前列腺切除术的患者11例,患者术前勃起、尿控及排便功...     

Gluma脱敏剂在活髓牙保存治疗中的应用

为预防牙体充填后出现牙髓刺激症状,我们自 1996年起,应用Gluma脱敏剂对窝洞制备后的牙齿进行预处理,取得了较为满意的效果,现报道如下。1　材料和方法1. 1　病例选择门诊患者 56例,共 82个患牙,其中中龋 74个,深龋 8个,均表现为不同程度的冷热刺激症状,无自发痛。随机分为两组,每组 41个患牙,同一患者的不同患牙尽量分在不同组,以便对照。1. 2　材料Gluma脱敏剂(贺利氏古莎 -上海齿科有限公司 ),磷酸锌水门汀、氧化锌丁香油水门汀 (上海齿科材料厂 ),银汞合金(北京四泰新技术开发公司)。1. 3　方法对照组:去腐,制洞,以 750mL/L的乙醇清洗…     

外胚间充质细胞向神经胶质/雪旺细胞的诱导分化及在BAM生物材料的存活研究

目的 探讨体外诱导外胚间充质细胞向神经胶质/雪旺细胞分化的潜能,观察细胞在不同材料上的生长状况,利用分化细胞观察在BAM生物材料的复合情况,为进一步构建组织工程神经提供理论依据.方法 取妊娠10.5d胎鼠颌突外胚间充质细胞,纯化后分别用8.5mg/L牛脑垂体提取物BPE、50μmol/L弗司扣林(forskolin)及联合应用诱导细胞分化.相差显微镜下观察细胞的形态变化,免疫组化鉴定细胞性质,将诱导后的细胞种植于胶原膜及胶原凝胶,并于培养3、6d后分别进行光镜、HE染色及扫描电镜观察细胞的生长情况.结果 培养3d后外胚间充质细胞形态发生变化,细胞形态为梭形,突起变长.而对照组细胞形态未见明显改变;免疫组化显示外胚间充质细胞表达S-100蛋白,但无GFAP的表达.而诱导分化后出现GFAP的表达,其中BPE及Forskolin联合应用后分化效果最好,约为79.2%.而在BAM凝胶和膜上细胞都可伸展并增殖.结论 BPE和Forskolin可不同程度诱导外胚间充质细胞向神经胶质细胞分化.在BAM膜上分化细胞生长状态良好,为该细胞与BAM生物材料构建组织工程神经导管提供了理论依据.     

dNCPs、TGF-β1及联合应用对人牙髓成纤维细胞增殖、ALP及矿化的影响

目的 :观察牙本质非胶原蛋白 (dentinnon collageproteins ;dNCPs)、转化生长因子 (transforminggrowthfactor ;TGF β1)及联合应用对人牙髓成纤维细胞生物学特性的影响。 方法 :利用混合酶消化法成功培养了人牙髓成纤维细胞 ,角蛋白及波形丝蛋白鉴定其来源。在细胞中分别加入牙本质粉、dNCPs、TGF β1及其复合物 ,通过MTT、ALPase和Von Kossa染色检测其作用。 结果 :dNCPs和TGF β1可显著增加细胞的增殖及ALPase分泌 ,细胞可聚集成团形成矿化结节。 结论 :dNCPs和TGF β1可改变人牙髓成纤维细胞的生物学活性 ,但两者间无相互促进作用。     

大张皮片法与小皮条法培养表皮细胞的比较研究

目的　比较研究用大张皮片和小皮条培养表皮细胞的方法。　方法　将皮肤组织切成大张皮片 ,用锐刀网状切割真皮面 ,Dispase酶消化充分后用镊子分离真、表皮 ,然后消化表皮进行表皮细胞培养 (大张皮片法 )。将同样大小的皮肤组织切割成小皮条 ,消化充分后用镊子分离真、表皮 ,然后进行表皮细胞培养 (小皮条法 )。记录两种方法切割皮肤和分离真、表皮所需时间 ,比较培养出表皮细胞的数量和纯度。　结果　将 5 cm2 大小的皮肤切割成小皮条需要 8～10分钟 ,而将同样大小皮肤切割成大张皮片仅需 1～ 2分钟 ;从小皮条上分离真、表皮耗时 10～ 15分钟 ,大张皮片法仅需2分钟。通过对比培养发现 ,大张皮片法获得的表皮细胞较多 ,活力较强 ,发生成纤维细胞污染的机会少。　结论　大张皮片法较小皮条法操作更简便、快捷 ,培养获得的表皮细胞活性高 ,成纤维细胞污染机会明显减少     

化学萃取异种组织工程化神经支架的方法和组织学研究

目的：研究新的化学萃取方法，清除成年兔坐骨神经中的细胞和髓鞘，建立成年兔坐骨神经的化学萃取方法，获得去细胞异种神经体移植物，方法：切取健康成年兔双侧坐骨伸经，以triton X-100和脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行化学处理。萃取神经和新鲜神经行HE染色及电镜检查，以观察细胞、髓鞘及神经基底膜；免疫组织化学染色以显示雪旺细胞基底板层，并进行组织相容性的试验结果：去细胞神经的延展性和神经外膜的韧性和弹性良好，细胞和髓鞘被彻底清除，神经基底膜被保留，雪旺细胞基底板层保留完好，去细胞神经为一种没有细胞髓鞘及其碎片的空的神经基质管，其植入的临近部位无急性炎症反应，有较好的生物相容性，无脓肿形成和组织坏死发生。结论：Triton X-100及脱氧肌酸钠化学处理方法，可有效清除周围神经中的细胞及髓鞘，萃取长段的去细胞神经，该神经移植物保持了网管柱状组织结构，保留了雪旺细胞板层素，可能是制备具有仿生结构的组织工程化神经支架较为理想的方法。