Toll-like receptors: function and roles in asthma

Asthmaisachronicairwayinflammatorydiseaseinvolvedwithmultiplesusceptiblegenesforatopy Toll likereceptors (TLRs) ,anancientthoughnewlycharacterizedandevolutionarilyconservedimmunereceptorfamily ,activatethemononuclear phagocytesystemviabothmyeloiddifferentiationmarker 88(MyD88) dependentand independentsignalingpathways TLRsmightplayakeyroleinasthmabyrecognitionofpathogenicmicroorganisms,activationofinnateimmunity ,regulationofadaptiveimmunity ,andinductionofimmunetolerance Forfutureimmunot…     

膏方在支气管哮喘中的防治优势

膏方是中医学的传统特色疗法.其主要作用一方面为扶正补虚,以调阴阳、补五脏、益气血、助正气为主;另一方面为祛邪治病.在支气管哮喘防治方面有以下优势：治未病,防病于未然;注重脾胃,辨证论治,治病求本;三因制宜,整体调治,防止复发.     

经可弯曲气管镜治疗阻塞型气道侵袭性曲霉病并呼吸衰竭二例

阻塞型气道侵袭性曲霉病是气道侵袭性曲霉病的一种亚型,主要以气管、支气管感染为主,故又称曲霉性气管、支气管炎[1].曲霉菌在气道管腔内呈团块状生长,导致管腔狭窄、阻塞,临床上主要表现为进行性呼吸困难,随时有窒息的危险,死亡率高.近期对收治的2例阻塞型气道侵袭性曲霉病并呼吸衰竭患者紧急进行了呼吸介入治疗、局部应用抗真菌药冲洗滴注并全身应用抗真菌药,取得了良好效果,挽救了患者生命,现报道如下.     

基因1b型不同准种株HCV核心蛋白原核表达质粒pTrc—CKS构建及诱导表达

目的 为研究与不同准种HCV 核心蛋白(Core)相互作用的细胞蛋白质组,构建并表达基因1b型的不同准种Core的原核表达质粒pTrc-CKS.方法 用聚合酶链反应(PCR)扩增并获得等长度片段的基因1b型的不同准种株丙型肝炎病毒(HCV)Core基因,氨基酸(aa)长度分别为癌中心株(T):1～172 aa、癌旁株(NT):1～172 aa及C191(HCV-J6):1～172 aa.扩增产物用Bam HⅠ及Eco RⅠ双酶切后插入到原核表达质粒pTrc-CKS中.阳性克隆转化到大肠埃希菌Top 10F'中,异丙基-β-D-S-代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得融合蛋白CKS-Core-His,经Ni2+10F'柱纯化并经Western blot验证.结果 PCR及双酶切验证表明3个基因为1b型的不同准种Core基因成功构建到原核质粒pTrc-CKS中,体外诱导并获得了相应的融合蛋白.结论 构建不同准种Core基因的原核表达质粒获得成功,体外诱导表达并纯化获得了CKS-Core-His融合蛋白,为后续研究与Core相互作用的细胞蛋白质组奠定了基础.     

支气管哮喘患者血清对内皮穿越模型中单核细胞分化为树突状细胞的作用

目的 探讨支气管哮喘(简称哮喘)患者血清和正常血清对内皮穿越模型中单核细胞向树突状细胞(DC)分化和功能的作用及其机制.方法 在江苏省哮喘联盟数据库中选择2008年5月至2009年5月轻～中度哮喘患者12例,募集匹配的健康志愿者12名,常规分离血清和外周血单个核细胞,免疫磁珠法获得单核细胞.选择健康产妇5名,胰酶消化法获得人脐静脉内皮细胞(第2代),培养融合至内皮细胞单层.在内皮细胞上方加入单核细胞及哮喘血清(哮喘组)或正常血清(对照组),构建内皮穿越模型.硝酸银染色法观察单核细胞来源的树突状细胞(MDDC)迁移行为.于48 h收集MDDC,扫描电镜观察形态学特征,电泳迁移率实验检测核因子κB(NF-κB)活性,流式细胞术、ELISA和混合淋巴细胞反应分别检测其表型和功能.结果 (1)在内皮穿越模型中,单核细胞2 h后发生正向穿越,48 h后发生逆向穿越并分化为DC.(2)与穿越前单核细胞[CD14(81±6)%、人白细胞抗原DR(HLA-DR)(24±5)%、CD80(2.8±2.0)%、CD86(14±4)%、CD83(0.9±0.8)%]比较,对照组MDDC的CDi4[(20±5)%]显著下降(F=49.01,P＜0.05)、HLA-DR、CD80、CD86和CD83[(43±4)%、(17.9±3.5)%、(43±11)%和(6.7±1.8)%]均显著增高(均P＜0.05),但CD83仍较低,为未成熟DC.(3)与对照组比较,哮喘组MDDC的HLA-DR和CD86[(55±6)%和(59±12)%]相仿(F值分别为15.29和35.97,均P＞0.05)、CD80和CD83[(49.7±10.2)%和(30.2±6.8)%]显著增高(F值分别为34.01和20.68,均P＜0.05),为成熟DC.并且,哮喘组MDDC呈典型的树枝样突起,其NF-κB活性、白细胞介素-12 P70水平和T细胞增殖作用[(100±11)%、(568±43)ng/L和(2033±198)cpm]较对照组[(12±3)%、(220±35)ng/L和(952±64)cpm]显著增高(均P＜0.05).结论 哮喘血清可诱导内皮穿越模型中单核细胞向DC异常分化成熟,并与NF-κB过度激活有关.该模型为剖析哮喘免疫学发病机制和筛选新型抗哮喘药物建立了新的体外实验平台.

Abstract：

Objective To explore the effect of asthmatic and healthy serum on differentiation and function of monocyte-derived dendritic cells (MDDC) in a transendothelial trafficking model. Methods The sera and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were separated from 12 asthmatic patients and 12 healthy volunteers, and monocytes were selected from PBMC using magnetic beads. The trypsin-digested human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) at passage 2 from 5 healthy lying-in women were used to construct the transendothelial trafficking model under asthmatic or healthy serum, wherein MDDC were identified by silver nitrate staining and scanning electron microscopy. Nuclear factor κB (NF-κB) activity was determined by electrophoretic mobility shift assay. Flow cytometry, ELISA and mixed leukocyte reaction were relevantly utilized to detect the phenotype, cytokine and T cell proliferation. Results ( 1 ) Monocytes traversed through HUVEC monolayer after 2 h, and reverse-transmigrated to develop into DC 48 h later. ( 2 ) The healthy serum stimulated monocytes into immature MDDC with lower CD14 [ ( 20 ±5)%] (F=49.01, P＜0.05), and higher HLA-DR, CD80, CD86 and CD83 [(43 ±4)%, (17.9 ±3.5)%, (43 ± 11)% and (6.7 ± 1.8)%, respectively] (F= 10.35 -40.17, all P＜0.05) than monocytes did before transmigration at 0 h [ CD14(81 ±6)%, HLA-DR (24 ±5)%, CD80(2. 8 ±2. 0)%,CD86( 14 ±4)% and CD83(0. 9 ±0. 8)%, respectively]. (3) The asthmatic serum stimulated monocytes into mature MDDC, characteristic of dendrites, with similar HLA-DR and CD86 [ ( 55 ± 6 ) % and ( 59 ±12)%] (F=15.29 and 35.97, all P ＞0.05), higher CD80 and CD83 [(49.7 ± 10.2)% and (30.2 ±6. 8) % ] ( F = 4. 01 and 20. 68, all P ＜ 0. 05), accompanied by increased levels of NF-κB activity, IL-12 p70 and T cell proliferation [ ( 100 ± 11 )%, (568 ±43) ng/L and (2033 ± 198) cpm, respectively] (F=49. 23 - 350. 84, all P ＜ 0. 05 ) relative to the healthy serum-stimulated immature MDDC [ ( 12 ± 3 ) %,(220 ± 35) ng/L and (952 ± 64) cpm, respectively ]. Conclusion The asthmatic serum induces mature MDDC in association with NF-κB overactivation in the transendothelial trafficking model, which provides a promising experimental platform for both investigation of immunological mechanisms in asthma and screening of novel anti-asthma drugs in vitro.     

布地奈德上调支气管哮喘小鼠肺组织IDO、抑制气道炎症和气道高反应性的研究

目的 研究布地奈德对急性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用.方法 18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组.卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型.末次激发24 h后,测定气道对乙酰胆碱的反应性,HE染色观察气道炎症细胞浸润,ELISA法检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(BALF) Th2细胞因子(IL-4和IL-13).Western blot检测肺组织IDO蛋白表达.结果 正常组小鼠气道阻力随乙酰胆碱浓度增加仅轻度增加,哮喘组气道阻力较正常组显著增高,布地奈德组气道阻力较哮喘组显著下降(P＜0.05);哮喘组血清总IgE和OVA-sIgE、BALF炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、Th2细胞因子水平较正常组显著增高,布地奈德组炎症指标较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组肺组织IDO)较正常组显著下降,布地奈德组肺组织IDO较哮喘组显著增高(P＜0.05).结论 布地奈德抑制急性哮喘模型气道炎症和气道高反应性,可能与上调肺组织IDO有关.     

喉罩通气全身麻醉下经可弯曲气管镜介入治疗窒息性气管狭窄三例

近年来,随着介入技术的发展,很多以往需要手术治疗或无法治疗的气道腔内病变可采用介入治疗获得治愈[1].不同原因导致的气管重度阻塞伴有极度缺氧的患者可出现缺氧性心脏骤停并死亡,这种严重的气管狭窄临床上称为窒息性气管狭窄,需要紧急通畅气道,快速纠正缺氧,防止猝死.由于此类患者病情危急,选择合适的介入治疗工具及方法十分重要,周内外多采用硬质气管镜(简称硬镜)直视下治疗[2-7],现报道3例采用喉罩通气在全身麻醉下经可弯曲气管镜介入治疗窒息性气管狭窄的患者,总结临床经验.     

幽门螺杆菌疫苗的研究概况

幽门螺杆菌 (Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ ,Ｈｐ)在五大洲均有发现 ,发达国家人群带菌率 50 %左右 ,而发展中国家的儿童带菌率高达 80 % [1] 。Ｈｐ的持续感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因的观点已成定论 ,志愿者口服Ｈｐ菌液可出现相应症状。患者若经过适当治疗 ,将Ｈｐ清除 ,症状就消失 ;症状若是复发 ,又可检出Ｈｐ。动物实验感染Ｈｐ也可出现胃炎症状[2 ] 。Ｈｐ感染也增加了胃癌的发生机会[3,4 ] 。 1994年 ,世界卫生组织癌症中心宣布Ｈｐ为第一类致癌因子。许多抗菌剂能杀灭Ｈｐ但不易根除。因为一方面胃酸可能会分解…     

基于悬浮芯片技术的56种病原微生物的高通量检测

目的:建立高通量、快速、可靠、经济的病原微生物诊断技术平台。方法:设计和合成针对56种常见病原微生物的探针和阳性对照,采用悬浮芯片技术,对56种病原微生物的阳性标准品进行检测。结果:56种标准品的检测值显著高于阴性对照,各病原微生物的阳性标准品和各探针之间无交叉反应。结论:建立了高通量、快速、可靠、经济的病原微生物诊断技术平台,为突发传染病的病原体诊断提供技术储备。