孕妇早产与病原生物感染的相关性

目的分析梅毒螺旋体（TP）、解脲支原体（UU）、沙眼衣原体（CT）及弓形体（Tox）、风疹病毒（RuV）、巨细胞病毒（CMV）、单纯疱疹病毒（HSV）（合称TORCH）系列病原生物感染与早产的相关性. 方法对315例早产妇女和100例正常育龄而无自然流产史妇女,采用酶联免疫法 （ELISA）进行梅毒螺旋体和TORCH系列病原体血清IgM抗体检测,同时采用胶体金快速检测法和培养法进行宫颈分泌物CT抗原检测和UU分离. 结果早产组血清TP、Tox、CMV、RuV、HSV IgM阳性率分别是8.57%、16.19%、23.65%、 20.00%、39.05%、对照组阳性率分别是0、2.00%、7.00%、4.00%、9.00%;宫颈分泌物UU、CT抗原检出率早产组分别为37.78%、13.65%,对照组分别为18%、5%,对照组与早产组差异显著（P＜0.05）. 结论 TP、 UU、CT及TORCH系列病原微生物感染是引起孕妇流产的一个不可忽视的重要原因,孕前及孕期进行相关病原微生物检测,对保证胎儿健康出生具有重要的临床意义.     

多重RT—PCR技术检测儿童呼吸道标本中的常见病毒

目的 建立多重RT-PCR技术检测儿科呼吸道标本中常见病毒的方法.方法 参照病毒核酸序列设计多重RT-PCR引物,并检索NCBI数据库初步验证其特异性,以实验室阳性株验证引物特异性,优化多重RT-PCR反应条件.并对2008年61份儿童呼吸道标本进行检测,阳性片段测序验证扩增片段特异性.结果 采用多重RT-PCR引物对流感病毒A型(IVA)、流感病毒B型(IVB)、副流感病毒1型(PIV1)、副流感病毒3型(PIV3)、呼吸道合胞病毒(RSV)和鼻病毒(RHV)等6种病毒进行扩增,均无非特异性扩增条带,分别获得171,489,307,585,155,501 bp片段,与设计相符;对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果,61份儿童呼吸道标本多重RT-PCR扩增,阳性率为50.82%(31/61),核酸序列与经NCBI数据库Blast比对同源性高.结论 实验证明,所建立的多重RT-PCR技术检测儿童呼吸道标本中常见病毒的方法,敏感度、特异度和可重复性均较好,为常见呼吸道病毒检测提供了一种方便易行的方法.     

小儿腹泻感染轮状病毒血象中异型淋巴细胞的变化

自1973年Bishop等首次发现轮状病毒(Rotavirus,RV)以来,关于RV感染的研究越来越深入,迄今为止,RV仍是世界范围内两岁以下婴幼儿严重腹泻最主要病原,特别是在发展中国家,每年至少有60万病儿死于RV腹泻,通常是婴幼儿致命性腹泻的首要病因[1],因此,深入研究RV感染后血象的异型淋巴细胞(Heterotypli Lgmph,HL)变化有重要意义.……     

深圳市儿童秋冬季腹泻诺如病毒检测及基因型分析

目的 了解深圳市儿童秋冬季腹泻中诺如病毒（Nov）的感染状况,并对阳性株进行基因型分析.方法 收集深圳地区多家医院2009年9月至2010年1月腹泻患儿粪便标本307份,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法进行诺如病毒核酸扩增,部分阳性标本的PCR产物经纯化、测序,结合GenBank参考株相应核酸序列构建系统进化树并进行基因型分析,采用SimPlot3.5.1对重组株进行分析和鉴定.结果 307份粪便标本中诺如病毒核酸阳性38例,阳性率为12.4％,以6～24个月龄婴幼儿感染为主,占全部病例数的81.6％（31 /38）,感染的发病高峰为10、11月份,占全部病例数的73.7％ （28/38）;26份测序标本中25株属于GⅡ.4型2006b变异体,1株为GⅡ.12/GⅡ.3型重组株.结论 诺如病毒是深圳市儿童秋冬季腹泻的重要病原体,优势流行株为GⅡ.4型2006b变异体,深圳首次检出的诺如病毒重组株为GⅡ.12/GⅡ.3型.     

早卵泡期长方案降调节时间对IVF-ET助孕结局的影响

目的 探究早卵泡期长方案降调节时间对体外受精胚胎移植(IVF-ET)助孕结局的影响.方法 回顾性分析2018年1月至2019年9月本院收治的202例IVF-ET患者的临床资料,依据注射促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)至启动外源性促性腺激素(Gn)时间不同分为A组(≤30 d,n=80)、B组(31～35 d,n=70)与C组(≥36 d,n=52).比较3组Gn启动时卵泡大小、Gn应用时间、Gn用量及临床结局.结果 3组Gn启动时卵泡大小比较差异无统计学意义;B组Gn应用时间短于A组、C组,Gn用量少于A组、C组,差异均有统计学意义(P<0.05).B组获卵数均多于A组、C组,差异有统计学意义(P<0.05);3组可利用胚胎率、移植胚胎数、早期流产率、早发LH峰率比较差异无统计学意义;B组2PN率、临床妊娠率、着床率均高于A组、C组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 在早卵泡期长方案中,适当延长垂体降调节时间,能增加IVF-ET的2PN率、临床妊娠率与着床率,减少Gn时间和用量,但垂体降调节时间较长,可能降低获卵数、2PN率、临床妊娠率与着床率.     

引物标记技术的应用与葡萄球菌多重耐药基因检测法的建立

目的 基于多重基因遗传信息表达分析系统(GeXP)技术平台,应用CY5(荧光染料)标记的特异引物代替通用引物,建立一种高通量的葡萄球菌多重耐药基因检测法。方法 设计细菌16S rDNA、耐甲氧西林相关基因(mecA、MecA LGA251)与耐大环内酯类相关基因(ermA、ermB、ermC、sat4、msrA、ereA、ereB、mefA/E)的引物,经“PCR+琼脂糖电泳”筛查2014年1月—2016年12月中山大学附属第八医院129株耐甲氧西林或者耐红霉素葡萄球菌基因,同时优化PCR。用CY5标记上游引物5'端,制作GeXP多重PCR引物。应用多重PCR扩增多重耐药基因核酸,产物经琼脂糖电泳与GeXP毛细管电泳,分析电泳图优化PCR。应用优化后的GeXP多重PCR扩增43株葡萄球菌,验证应用效果。结果 129株葡萄球菌筛出7种基因(16S rDNA、mecA、ermA、ermB、ermC、sat4和msrA)。16S rDNA、mecA、ermA、ermB、ermC和msrA引物特异性好,但不同核酸的sat4基因能扩增出两种不同大小片段。建立的GeXP多重PCR能同时检出所有靶基因。43株葡萄球菌的检测结果与表型检测(VITEKⅡ Compact System)相符;与“PCR+琼脂糖电泳”相比：sat4符合率为97.67%(42/43),无统计学差异(P＞0.05);msrA符合率为95.35%(41/43),无统计学差异(P＞0.05);ermA、mecA、16S rDNA、ermB和ermC符合率均为100%(43/43)。结论 采用CY5标记特异引物应用于GeXP系统检测葡萄球菌多重耐药基因的方法可行,其特异性与敏感性高,若采用更多引物,其检测通量可进一步提高。     

多药耐药鲍氏不动杆菌氨基糖苷类药物耐药遗传学背景研究

目的了解临床分离的多药耐药鲍氏不动杆菌(MDR-ABA)氨基糖苷类药物耐药遗传学背景。方法从2009年4-8月中山大学附属第三医院住院患者中分离20株MDR-ABA,用K-B法测定鲍氏不动杆菌对10种抗菌药物的敏感性,采用PCR及序列分析的方法分析氨基糖苷类修饰酶基因。结果 20株MDR-ABA检出aac(3)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3′)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅰ4种基因阳性,6种16S rRNA甲基化酶基因未检出。结论临床分离的MDR-ABA中氨基糖苷类修饰酶基因阳性率较高,MDR-ABA氨基糖苷类抗菌药物耐药主要与氨基糖苷类修饰酶基因有关;通过可移动遗传元件介导是细菌获得氨基糖苷类修饰酶基因的主要因素。     

多种病原体交叉感染所致阴道炎病因分析及临床意义

目的 探讨阴道炎多种病原体交叉感染的原因，了解各病之间交叉感染的程度及临床意义。方法 以盐水涂片法直接镜检念珠菌和阴道滴虫，以唾液酸酶法检测细菌性阴道病（BV）。结果 在被检人群中BV、念珠菌、滴虫阳性率分别为29．33％（220／750）、9．73％（73／750）、2．0％（15／750）。BV交叉感染念珠菌厦滴虫阳性率分别为7．27％（16／220）、5．91％（13／220）。在念珠菌性和滴虫性阴道炎中，BV阳性率分别为21．92％（16／73）、86．67％（13／15）。结论 在妇科感染性疾病中，BV阳性率最高，并且和念珠菌、滴虫相互交叉感染现象非常严重。所以对白带检查时，最好同时进行多种病原体测定。对临床诊断治疗具有重大意义。     

多重PCR技术检测病毒性肝炎相关病毒的研究

目的建立一种快速、特异的可同时检测血中多种病毒性肝炎相关病毒的多重PCR方法。方法参照各病毒特异性核酸序列,按多重PCR引物设计的特殊要求设计引物,以核酸测序确证扩增产物,用标准病毒株及临床阳性血清样本DNA、RNA为模板优化PCR反应体系和反应条件,建立病毒性肝炎相关病毒多重PCR检测方法。应用建立的多重检测方法对120例ALT升高的血清标本进行多重检测,并将检测结果与单一PCR检测结果进行比较。结果采用多重PCR技术可同时对EBV、TTV、HBV、HSV 4种DNA病毒进行扩增;采用多重RT-PCR技术可同时对Cox-V、HEV、HCV 3种RNA病毒进行扩增。各病原体单一及多重扩增条带均清晰、均一,无非特异性扩增条带,片段长度与理论值一致;核酸测序证实各扩增产物属各病原体特异性基因片段。临床标本检测多重感染率为19.2%,与单一检测结果一致。结论建立的多重PCR检测方法稳定可靠,敏感度、特异度好,适用于病毒性肝炎相关病毒的实验室诊断与临床筛查。     

用CEQ 8800遗传分析系统快速鉴定血流感染中病原菌

目的评价CEQ 8800遗传分析系统(简称CEQ系统)在快速鉴定血流感染病原菌中的应用价值。方法选取临床常见的13种菌及阴性质控品进行CEQ系统检测,评价鉴定的准确性及特异性;用系列稀释的大肠埃希菌ATCC 25922菌液评价系统灵敏度;对临床41例血培养阳性标本分别做CEQ系统检测及常规培养鉴定,评价结果的一致性。结果 13株质控菌以CEQ系统分析均能正确鉴定到种。白念珠菌、单纯疱疹病毒Ⅰ型、Ⅱ型、乙型肝炎病毒(HBV)DNA及空白对照均为阴性。该系统灵敏度可达700 CFU/mL。41例血培养阳性标本CEQ系统检测及常规培养鉴定到属的结果一致性为100%(38/38),鉴定到种的一致性为87.8%(36/38)。结论 CEQ系统不需分离培养能直接检测血培养阳性标本,是一种快速、准确鉴定血流感染中病原菌的方法。