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人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控高效表达 ,采用RT PCR技术从人肝脏组织总RNA中扩增谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列 ,将其插入到原核温控表达载体pBV2 2 0多克隆位点中 ,构建重组表达质粒 ,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定 ,并进行了温控表达 ,表达量约达到 2 8 3 %。人谷胱甘肽硫转移酶M1基因克隆到原核表达载体pBV2 2 0中 ,测序结果同Genbank中的人谷胱甘肽硫转移酶M基因序列比较 ,在 619位点C→A ,氨基酸由Pro→Thr,在 5 2 8位点C→T ,编码氨基酸仍为Asp。通过温控诱导 ,在 2 8kDa的表达量约达到 2 8 3 %。人谷胱甘肽硫转移酶M1原核温控表达载体pBV2 2 0的构建 ,为毒理学、遗传药理学的研究提供了应用基础 相似文献
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临床所见咽部不适并非单纯见于喉痹,可出现在很多内科疾病中,如某些变态反应性疾病、全身性疾病或特异性感染等均可见咽部不适,患者多以"咽部不适"首诊于耳鼻喉科. 相似文献
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目的 探讨AKT信号转导通路中有关蛋白肿瘤抑制基因(PTEN)、磷酸化AKT(p-AKT)及细胞周期素D1(Cyclin D1)在原发性肺鳞癌和腺癌中不同的表达意义及与临床病理因素的相关性.方法 应用免疫组化的方法,检测原发性肺鳞癌44例、腺癌36例及35例非肿瘤性肺组织标本中PTEN、p-AKT、Cyclin D1的表达,并与临床病理因素进行相关性分析.结果 p-AKT、Cyclin D1在肺鳞癌和腺癌中总的阳性率分别为78.8%、76.3%,均显著高于非肿瘤性肺组织中阳性表达0%(均P<0.05).PTEN在肺鳞癌和腺癌中总阳性率为47.5%,显著低于非肿瘤性肺组织中阳性表达94.3%(P<0.05).PTEN、p-AKT、Cyclin D1在肺鳞癌和腺癌中的表达差异均无统计学意义(均P>0.05).PTEN表达与有无淋巴结转移和组织的高分化有关.p-AKT在高中分化腺癌中阳性表达显著高于低分化腺癌的表达.Cyclin D1表达与淋巴结转移、鳞癌的低分化有关.在肺鳞癌和腺癌中,p-AKT蛋白的表达均与Cyclin D1呈正相关.肺鳞癌中,PTEN表达与p-AKT、Cyclin D1呈负相关;肺腺癌中,PTEN表达与p-AKT、Cyclin D1均无相关关系.结论 在肺鳞癌和腺癌中均存在AKT及其通路的激活.PTEN的失活参与了肺鳞癌和腺癌的发生和发展.在肺鳞癌中,AKT的激活与PTEN的失活有关;在肺腺癌中,PTEN的失活可能不是AKT活化的主要原因.在肺鳞癌和腺癌中可能存在不同的AKT活化机制. 相似文献
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目的建立定量测定硫酸软骨素(CS)的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并对其应用价值进行初步评价。方法以CS为抗原分别免疫Balb/c小鼠和日本大耳白兔,制备2种动物的多克隆抗体。用鼠抗体包被微孔板,兔抗体为第2抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔抗体为标记抗体,建立双抗体夹心ELISA,并对线性范围、精密度、回收率和方法学比较进行了评价。结果本研究建立的ELISA线性范围为2~500 mg/L,批内和批间精密度分别为4.48%和5.97%,回收率在99.52%~101.77%之间,与间苯三酚分光光度法测定结果具有良好的相关性(r=0.999 0,P〈0.05)。结论建立的定量测定CS的双抗体夹心ELISA具有敏感性高、重现性好等优点,适合检测应用。 相似文献
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目的 为了开发一种新型的多功能药物递送载体平台,引入了具有较强细胞摄取能力和较高载药效率的碳纳米管,通过功能化修饰可能降低碳纳米管细胞毒性的同时提高肿瘤细胞对其的摄取能力。方法 选取单壁碳纳米管(single-walled carbon nanotubes, SWCNTs),通过混酸处理、活性基团以及靶向基团的修饰降低载体材料的毒性,提升其生物相容性,并且为载体材料增加了对肿瘤细胞的靶向性,以X-射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy, XPS),X射线衍射(X-ray diffraction, XRD)等分析手段验证了修饰基团的成功连接。借助MTT实验以及荧光图像检测了载体的细胞毒性,摄取能力和活性氧水平。结果 经聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG),聚乙烯亚胺(polyetherimide, PEI),叶酸(folicacid, FA)等活性基团修饰后的SWCNTs细胞毒性明显下降,且增加了MCF-7细胞对阿霉素(doxorubicin, DOX)的有效摄取和ROS水平,提高了机体抗肿瘤免疫能力。结论 表明修饰后的S... 相似文献
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目的观察小儿不同退热方法的退热效果.方法将感染性高热以上(体温>39.1℃)281例患儿使用不同退热方法按分类分组后,根据疗效评判标准统计.结果物理降温、药物降温和物理药物联合降温方法的临床总有效率分别为68.49%、77.91%、89.80%(x2=9.43、p=0.009<0.05).物理药物联合降温退热效果优于单纯物理降温及单纯药物降温.结论物理降温见效快但维持时间相对较短,药物退热维持时间较长但见效时间较慢,使用物理药物联合降温方法效果较好. 相似文献
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目的 构建人谷肽甘肽硫转移酶A1真核表达系统,为毒理学、遗传药理学的研究等提供材料。方法 用RT—PCR技术从人肝脏组织总RNA中分离扩增人谷胸甘肽硫转移酶A1基因的cDNA序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3多克隆位点中,构建重组表达质粒,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果 人谷胱甘肽硫转移酶A1被正确地克隆到真核表达载体pcDNA3中,测序结果同Genbank序列比较,在152位点T→C,氨基酸由Met→Thr。结论 经酶切鉴定和PCR扩增,证实人谷胱甘肽硫转移酶A1真核表达系统构建成功。 相似文献