创造酶切位点PCR-RFLP检测PON2(rs12026)基因多态性

目的:建立简便易用的PON2基因单核苷酸多态(rs12026)的检测方法。方法:应用创造酶切位点原理设计引物,通过PCR-RFLP技术判断PON2基因SNP位点多态性。结果:设计一对特异引物并PCR扩增含PON2多态位点的DNA片段,根据限制性内切酶BsmAI酶切结果判断PON2位点多态性,PCR和酶切效果均较好。结论:应用创造酶切位点PCR-RFLP原理建立的PON2多态位点的检测方法具备简便、经济、快速的特点。     

煤焦沥青提取物对BEAS-2B细胞Keap1-Nrf2/ARE通路的作用机制

目的研究煤焦沥青烟提取物对BEAS-2B细胞Nrf2、Keap1、NQO1的基因及其蛋白表达的影响,以探讨煤焦沥青烟提取物在造成细胞氧化损伤过程中Nrf2-Keap1/ARE通路的作用机制。方法设立未处理对照组、0.1%DMSO溶剂对照组、5μg/ml B(a)P阳性对照组、6μmol/L全反式维甲酸组、6μmol/L全反式维甲酸预处理0.5 h后5μg/ml CTP染毒组和CTP染毒组(1、5、10和20μg/ml),染毒3、6、12和24 h后提取总RNA;RT-PCR检测Nrf2、Keap1、NQO1 mRNA的相对表达量;Western blot测定Nrf2、Keap1、NQO1蛋白的相对表达量。结果不同CTP染毒剂量作用后各个基因mRNA相对表达量差异无统计学意义(P0.05),而不同时间点相对表达量差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,随着CTP烟提取物染毒浓度的增加,Keap1蛋白无明显变化,NQO1蛋白表达量逐渐上升;Nrf2蛋白在5μg/ml染毒浓度时表达最高,在5μg/ml CTP染毒浓度作用下,BEAS-2B细胞Nrf2蛋白表达量随时间逐渐升高,在染毒6 h后达到最高,之后表达量又呈下降趋势。结论煤焦沥青烟提取物作用于BEAS-2B细胞后,代谢酶NQO1表达上调,推测Keap1-Nrf2/ARE通路可能通过上调细胞保护性基因NQO1的表达而对抗煤焦沥青毒性作用,降低细胞氧化损伤。     

CYP1A1和XRCC1基因多态性与肺癌易感性

目的:探讨细胞色素P450(CYP)1A1和X射线损伤修复的交叉互补基因(XRCC1)基因多态性与肺癌易感性的关系。方法:采用PCR-RFLP方法检测100例肺癌患者和100例正常对照者CYP1A1、XRCC1多态基因型。结果:CYP1A1突变纯合基因型在肺癌组和对照组中的频率分别为11.0%和17.0%,差异无统计学意义(χ2=3.163,P>0.05)。XRCC1突变纯合基因型在肺癌组和对照组中的频率分别为44.0%和22.0%,差异有统计学意义(χ2=13.472,P<0.001),XRCC1突变纯合基因型携带者患肺癌的危险度增加[OR=3.316(95%CI1.729～6.359)]。两基因联合分析,XRCC1与CYP1A1突变基因型联合携带者较单一基因型携带者患肺癌危险度增加[OR=6.243(95%CI2.286～17.046)]。结论:XRCC1突变纯合基因型是肺癌的易感因素,CYP1A1与XRCC1突变基因型在肺癌发生中具有联合作用,可增加肺癌发生的危险性。     

化学发光法测定盐酸雷诺嗪含量

目的:建立快速检测盐酸雷诺嗪的化学发光法.方法:在硫酸介质中,盐酸雷诺嗪对Ce(Ⅳ)-Na2SO3化学发光体系有较强的抑制作用,且抑制的程度与盐酸雷诺嗪的质量浓度在一定范围内成良好的线性关系,据此建立了一种测定盐酸雷诺嗪的化学发光分析方法.结果:该法的线性范围为1.0×10-6～1.0×10-4kg/L,检出限为7.7×10-7kg/L.对4.0×10-6kg/L盐酸雷诺嗪测定的相对标准偏差为1.45%(n=11).结论:本方法快捷、简便且具有较高的灵敏度,适用于盐酸雷诺嗪缓释片中盐酸雷诺嗪的测定.     

基于两种判别模式的肿瘤标志物联合检测对肝癌辅助诊断的价值

目的探讨基于人工神经网络(ANN)判别模式的肿瘤标志物联合检测对肝癌辅助诊断的价值。方法 2009年3月-2010年3月解放军159中心医院和郑州大学第一附属医院门诊、住院患者及体检者140例,分别纳入肝癌组(n=50)、肝良性病变组(n=40)和正常人组(n=50)。采用化学发光免疫检测试剂盒测定血清中甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)的含量,采用可见光分光光度法测定血清唾液酸(SA)水平,采用偶氮砷Ⅲ终点法测定血清中的钙(Ca)含量,以此5种肿瘤标志物作为判别变量,运用Fisher判别分析法及反向误差传播ANN技术,建立肝癌智能化辅助诊断模型。结果本研究建立的Fisher判别分析模型对3组样本判别的灵敏度为46.1%,特异度为98.9%,准确度为79.3%,总的阳性预测值为95.8%,总的阴性预测值为76.7%;而ANN模型对3组样本判别的灵敏度为96.0%,特异度为98.9%,准确度为94.3%,阳性预测值为98.0%,阴性预测值为97.8%。结论多个肿瘤标志物联合ANN技术建立的肝癌诊断模型对肝癌的预测效果优于传统的Fisher判别分析方法,更适用于临床数据的判别分析。     

郑州市学龄前儿童全血中几种微量元素的含量

目的　了解郑州市学龄前儿童全血中铜、锌、铁、钙含量。方法　采集郑州市区及郊区 0～ 7岁健康儿童 660名的指血 ,采用原子吸收光谱分析法测定全血中铜、锌、铁、钙含量。结果　全血中铜、锌、铁、钙含量依次为 (1 9.2 2± 5 .2 1 )、(67.31± 7.55)、(8.69± 0 .60 )和 (1 .0 3± 0 .1 0 ) μmol L。大年龄组儿童 4种元素含量高于小年龄组 ,女性儿童血钙含量高于男性 ,市区儿童血锌、钙含量高于郊区儿童。 结论　不同年龄、不同性别、不同生活地区儿童全血中铜、锌、铁、钙含量不同     

肾棘球蚴破裂所致过敏性休克抢救的讨论

目的总结抢救9例肾棘球蚴破裂所致过敏性休克患者的体会.方法调查收集1990-2007年新疆北疆地区收治的肾棘球蚴破裂致过敏性休克的患者,对其临床症状、抢救方法等进行总结讨论.结果 9例肾棘球蚴破裂所致过敏性休克患者中,4例为术前肾棘球蚴破裂,5例为术中破裂.对6例进行快速人体棘球蚴病免疫诊断试剂盒试验,均呈阳性.经积极采取包括手术在内的综合措施抢救,结果7例治愈,2例死亡.结论应迅速抽尽漏出的棘球蚴囊液防止其吸收而引起或加重休克,手术是去除病因的重要方法.     

HPLC测定冬凌草药材及片剂中的冬凌草甲素

目的 采用HPLC法测定冬凌草药材及片剂中的冬凌草甲素.方法 用Hypersil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水(50:50)为流动相,流速0.8 mL·min~(-1);检测波长238 nm;柱温25 ℃;进样量20μL.结果 冬凌草甲素20～200 mg·mL~(-1)与峰面积有良好的线性关系(r=0.9999),最低检出限50 ng.按<中国药典>方法对样品预处理后进样测量,在药材中可检出冬凌草甲素,但片剂中无法检出.对供试品脱脂后,片剂中仍未检出冬凌草甲素.结论 所建方法简便、重复性好、准确度高,可用于冬凌草片剂的质量控制.文中所选的冬凌草片剂中未检测出冬凌草甲素,说明其质量有待提高.     

增强化学发光法测定盐酸恩诺沙星的含量

目的 采用增强化学发光法快速测定痕量盐酸恩诺沙星.方法 利用加入Tb3+和盐酸恩诺沙星后可以使Ce4+-Na2SO3体系的化学发光显著增强的原理,测定盐酸恩诺沙星的含量.结果 增强的化学发光强度与盐酸恩诺沙星0.1～10μg·mL-1和10～100μg·mL-1呈良好的线性关系(r分别为0.9984、0.9980),检测限为0.033 μg·mL-1,RSD=1.29%(n=11).结论 所建方法快捷、简便、灵敏度高,测定了自制牛奶样品中盐酸恩诺沙星的含量,结果满意.     

干祖望从脾论治慢性咽炎经验总结

南京中医药大学附属医院（江苏省中医院）干祖望主任医师为全国首批500名老中医、南京中医药大学终身教授,从事中医耳鼻咽喉科临床工作80余年,著作等身,具备极高的学术威望。笔者有幸跟随干老侍诊,获益匪浅。兹就干老从脾辨治慢性咽炎经验介绍如下。