人CyPA基因重组质粒pET30α(+)-CyPA的构建及鉴定

目的:构建人CyPA基因重组质粒pET30α(+)-CyPA.方法:根据CyPA基因设计引物,从人肺痛组织eDNA中扩增目的基因.pET30α(+)质粒、目的基因DNA经Nde I酶、Xho I酶双酶切,用DNA快速连接试剂盒连接得重组子pET30α(+)-CyPA.将重组子转化DH5α,经卡那霉素琼脂糖平板筛选,挑选阳性克隆进行PCR扩增并测序.结果与结论:快速PCR能从阳性克隆中扩增出目的DNA.将重组质粒测序,由起始密码ATG到终止密码TAG止,扩增得到的目的基因片段具有完整的阅读框;与人CyPA基因cDNA序列进行比较,同源性达到99.8%.重组质粒pET30α(+)-CyPA构建成功.     

原子吸收光谱法测定芝麻叶中矿物元素含量

[目的]原子吸收光谱法测定芝麻叶中K,Na,Ca,Mg,Cu,Zn,Fe,Mn,Cr和Se的含量.[方法]用混酸消解样品,利用火焰原子吸收光谱法,采用偏振塞曼效应扣除背景吸收,检测积分吸收,测定芝麻叶中K,Na,Ca,Mg,Cu,Zn,Fe,Mn元素的含量.利用石墨炉原子吸收光谱法,采用偏振塞曼效应扣除背景吸收,石墨炉程序升温方式进行铬,硒的原子化,一检测峰值吸收,测定芝麻叶中Cr,Se含量.[结果]在选定的实验条件下,K,Na,Ca,Mg,Cu,Zn,Fe,Mn标准曲线的线性范围分别为:0～5.0,0～4.0 0～20.0,0～4.0,0～4.0,0～0.8,0～4.0,0～10.0 mg·L-1;Cr和Se标准曲线的线性范围分别为:0～6.0,0～40.0 μ·L-1;方法的精密度RSD%:3.29%～9.26%;加标回收率为92.5%～109.3%.各元素的测定限分别为:0.332(K),0.091(Na),0.367(Ca),0.132(Mg),0.034(Cu),0.0028(Zn),0.031(Fe),0.110(Mn)mg·L-1;1.22(Cr)和1.86(Se) μ·L-1 (P=95%,α=0.5).芝麻叶中元素的含量为:24.754±1.010(K),0.869±0.021(Na),24.142±1.255(Ca),6.533±0.448(Mg)mg·g-1;10.90 9±0.801(Cu),14.617±1.354(Zn),312.563±19.256(Fe),135.360±4.453(Mn),0.623±0.028(Cr)μg·g-1,195.701±4.453 ng·g-1(Se).[结论]建立的原子吸收光谱法简便、快速、灵敏、准确.适用于芝麻叶中矿物元素含量测定.     

肺癌组织中Nrf2、Keap1和NQO1蛋白的表达

目的:研究肺癌组织中Nrf2、Keap1和NQO1蛋白表达的情况。方法:采用免疫组化法检测67例肺癌患者的肺癌组织及癌旁正常组织中Nrf2、Keap1和NQO1蛋白的表达,并分析Keap1、Nrf2和NQO1蛋白的表达与肺癌临床病理特征的关系。结果:Keap1蛋白在肺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期鳞癌和Ⅲ期、Ⅳ期腺癌中的表达高于癌旁正常组织(P<0.05);Nrf2蛋白在肺Ⅰ期鳞癌和Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期腺癌中的表达低于癌旁正常组织(P<0.05);NQO1蛋白在肺Ⅰ期鳞癌中的表达低于癌旁正常组织(P<0.05),在Ⅱ期腺癌中的表达高于癌旁正常组织(P<0.05)。3种蛋白的表达与肺癌患者的临床分期和是否侵及胸膜有关(P<0.05)。结论:肺癌组织中Keap1、Nrf2、NQO1蛋白表达异常,提示Keap1-Nrf2/ARE通路在肺癌的发生发展中可能发挥重要的作用。     

载阿霉素的单壁碳纳米管的制备及体外抗肿瘤初步评价

目的 为了开发一种新型的多功能药物递送载体平台，引入了具有较强细胞摄取能力和较高载药效率的碳纳米管，通过功能化修饰可能降低碳纳米管细胞毒性的同时提高肿瘤细胞对其的摄取能力。方法 选取单壁碳纳米管(single-walled carbon nanotubes, SWCNTs),通过混酸处理、活性基团以及靶向基团的修饰降低载体材料的毒性，提升其生物相容性，并且为载体材料增加了对肿瘤细胞的靶向性，以X-射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy, XPS),X射线衍射(X-ray diffraction, XRD)等分析手段验证了修饰基团的成功连接。借助MTT实验以及荧光图像检测了载体的细胞毒性，摄取能力和活性氧水平。结果 经聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG),聚乙烯亚胺(polyetherimide, PEI),叶酸(folicacid, FA)等活性基团修饰后的SWCNTs细胞毒性明显下降，且增加了MCF-7细胞对阿霉素(doxorubicin, DOX)的有效摄取和ROS水平，提高了机体抗肿瘤免疫能力。结论 表明修饰后的S...     

经方治疗耳鸣耳聋验案4则

<正>耳鸣耳聋是指以耳内鸣响、听力障碍为临床表现的耳病,临床上耳鸣耳聋常同时或先后出现,是耳鼻咽喉科的常见疾病,也是疑难疾病之一。张仲景所著《伤寒论》《金匮要略》的方剂称为经方,其理论丰富,辨证精当,用药精炼,被广泛运用于内、外、妇、儿及杂病的诊疗中。我们运用中医辨证思维,结合经方理论与临床实际,对耳聋耳鸣进行详细的辨证,选取符合经方证型的案例进行治疗,效果良好,现介绍4则如下。