分析肺炎克雷伯菌的耐药性

为了控制肺炎克雷伯菌在医院内的感染和耐药性,以及临床合理用药、减少耐药茸的产生,我们对肺炎克雷伯曹进行了耐药性分析.     

2005年深圳市人民医院革兰阴性杆菌耐药性监测

目的监测我院2005年临床分离革兰阴性杆菌对各类抗菌药物耐药状况,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用琼脂稀释法检测16种抗菌药物对224株革兰阴性杆菌MIC,数据分析采用WHONET5.3软件和卡方检验。结果大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs株分别占56.3%(49/87)和34.9%(15/43)。大肠埃希菌敏感率在80%以上的药物有亚胺培南、美罗培南(100%)、阿米卡星(94.3%)和哌拉西林-他唑巴坦(90.8%);肺炎克雷伯菌敏感率较高的抗菌药物除碳青霉烯类外(100%)、还有头孢吡肟(97.7%)、哌拉西林-他唑巴坦(93%)、头孢哌酮-舒巴坦(90.7%);阴沟肠杆菌敏感率≥80%的抗菌药物有碳青霉烯类(100%)、头孢吡肟(86.7%)、阿米卡星(86.7%)和哌拉西林-他唑巴坦(80%)等。铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌对多数抗菌药的耐药率较高。结论我院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍最敏感,不发酵糖菌对多种抗菌药物高度耐药。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶菌株的药敏试验结果分析

目的 :了解产 CTX- M型超广谱β-内酰胺酶 (ESBL s)分离株的药物敏感性 ,指导临床用药。方法 :用表型确证试验确定临床标本中产 ESBL s的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,分别用 TEM、SHV和 CTX- M通用引物进行聚合酶链反应 (PCR) ,筛选出 CTX- M基因阳性并且 TEM和 SHV基因阴性的 76株细菌 ,用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)。结果 :亚胺培南的抗菌活性最强 ,MIC90 为 0 .2 5 μg/ m L,敏感率为 10 0 % ;其次为阿米卡星和哌拉西林 /他唑巴坦 ,MIC90 分别为 8μg/ m L和 16 μg/ m L,敏感率为 92 .1% ;其对头孢噻肟的耐药与中介率高达 88.2 %。结论 :亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林 /他唑巴坦对产 CTX- M型 ESBL s菌有强大的抗菌活性。     

深圳地区非发酵革兰阴性杆菌医院感染及耐药性分析

目的 了解非发酵革兰阴性杆菌引起医院感染的特点以及对抗生素耐药性的变化趋势。方法 对2001-2004年分离出的1426株非发酵革兰阴性杆菌选用19种抗生素进行药敏实验，按NCCLS标准判断。结果 铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌在总体分离菌中分别占13％、7％和4％。1426株非发酵革兰阴性杆菌主要来源于痰标本。铜绿假单胞菌2001-2003年对哌拉西林、哌拉西林／他唑巴坦、庆大霉素、阿米卡星、头孢吡肟、氨曲南、头孢他啶耐药率呈下降趋势，但2003-2004年除对氨曲南、头孢他啶的耐药率保持稳定外，对上述其他几种抗生素的耐药率均上升，对亚胺培南、美罗增南耐药率呈逐年下降趋势；鲍曼不动杆菌对氨苄西林／舒巴坦、亚胺培南以及美罗增南的耐药率较低；嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、环丙沙星和氯霉素的耐药率较低。结论 了解非发酵革兰阴性杆菌的耐药现状，有利于为临床合理用药提供依据。     

一种新型β内酰胺酶CTX—M-38的发现

目的 了解CTX-M型ESBLs在深圳市人民医院临床分离肺炎克雷伯菌的分布.方法 采用3组PCR引物分别扩增产ESBLs菌株的CTX-M基因,应用ABI 自动荧光测序仪对PCR扩增产物进行测序.结果 64株产ESBL肺炎克雷伯菌中,PCR阳性41株(64.1%),基因型分别为CTX-M-3(4株)、CTX-M-9(2株)、CTX-M-13(3株)、CTX-M-14(28株)和 CTX-M-3 合并CTX-M-14(2株).在另外2株菌中发现1种新的CTX-M型酶,经美国Lahey临床医学中心专家确认并被命名为CTX-M-38,GenBank登录号AY822595.结论 我院临床分离的肺炎克雷伯菌产CTX-M型ESBLs检出率较高,其中以CTX-M-14型为最常见,CTX-M-38是一种新基因型ESBL.     

2006-2008年深圳市某医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性监测

目的 了解2006-2008年深圳市某医院从临床标本分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药情况.方法 收集深圳市某医院2006-2008年从临床标本分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,采用纸片琼脂扩散法（K-B法）对菌株进行药敏试验,用WHONET 5.3软件进行统计分析.结果 2006-2008年共收集大肠埃希菌854株、...     

深圳社区感染沙门菌耐药基因调查与同源性分析

目的 调查深圳社区感染沙门菌耐药特点和分子机制,并进行同源性分析.方法 收集深圳市人民医院2002——2007年临床分离沙门菌共93株,PCR和DNA测序分析沙门菌gyrA、gyrB、parC和parE基因QRDR的突变,PCR检测质粒介导喹诺酮耐药基因qnr和aac(6')-Ib-cr,β内酰胺酶基因blaTEM、blaSHV、blaOXA和blaCTX-M基因,以及Ⅰ类整合子,PFGE对沙门菌进行分子分型.结果 伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌对氨苄西林、氯霉素、复方磺胺甲噁唑、头孢曲松和环丙沙尾敏感率为96%～100%;52%(13/25)伤寒沙门菌和95%(61/64)甲型副伤寒沙门菌对萘啶酸耐药.24%(6/25)萘啶酸耐药伤寒沙门菌和94%(60/64)萘啶酸耐药甲型副伤寒沙门菌对环丙沙星敏感性降低(MIC 0.125～μg/ml).75株萘啶酸耐药环丙沙星敏感沙门菌仅GyrA的QRDR均存在第83位或87位单个氨基酸替代,其中Ser83Phe突变占91%(68/75).2株环丙沙星耐药沙门菌在QRDR中均携带GyrA上2个点突变和parC上1个点突变.93株沙门菌均未发现质粒介导的qnr和aac(6')-Ib-cr 基因.1株头孢曲松耐药甲型副伤寒沙门菌检测到blaCTX-M-14基因,且该基因上游存在插入序列ISEcpl.3株多重耐药沙门菌均存在一个1 900 bp的Ⅰ类整合子,其基因盒均为dhfrⅫ-orfF-aadA2,同时携带blaTEM-1或blaOXA-30基因.25株伤寒沙门菌共有22种不同的PFGE带型,64株甲型副伤寒沙门菌的PFGE带型平均相似性为91%.90例患者均系社区感染,6例甲型副伤寒患者发病前30天内曾前往外地旅行.结论 深圳社区感染伤寒和甲型副伤寒沙门菌对萘啶酸耐药率较高,沙门菌GyrA的QRDR点突变是萘啶酸耐药的重要机制,甲型副伤寒沙门菌菌株间遗传同源性极高,来自同一克隆.

Abstract：

Objective To investigate the antimicrobial resistance mechanisms and genetic homogeny of Salmonella from community acquired infections in Shenzhen,China.Methods Ninety-three of Salmonella were isolated from 2002 to 2007 at Shenzhen People's Hospital,China.PCR and DNA sequencing were used to investigate the mutation in QRDR of the gyrA,gyrB,parC and parE.Plasmid mediated quinolone resistance genes including qnr and aac(6')-Ib-cr,β-lactamase genes including blaTEM,blaSHV,blaOXA, blaCTX-M, and class 1 integron were detected. All isolates were typed by PFGE. Results S. enterica typhi and S. enterica paratyphi A were susceptible to ampicillin, chloramphenicol, trimethoprim/sulfamethoxazole, ceftriaxone and ciprofloxacin, with the susceptible rate of 96%-100%. Fifty-two percent (13/25) of S. enterica typhi and 95% (61/64) of S. enterica paratyphi A were resistant to nalidixic acid. Twenty-four percent (6/25) of nalidixic acid-resistant S. enterica typhi and 94% (60/64) of nalidixic acid-resistant S. enterica paratyphi A showed decreased susceptibility to ciprofloxacin (MIC of 0. 125-1 μg/ml).All nalidixic acid-resistant (susceptible to ciprofloxacin ) Salmonella (NARS) isolates had a single substitution in the QRDR of GyrA, and 91% (68/75) of these isolates carried the substitution Ser83Phe in GyrA. Two mutations in the QRDR of GyrA were detected in both of two ciprnfloxacin-resistant Salmonella,with the additional one mutation in the QRDR of parC. Plasmid mediated quinolone resistance genes including qnr and aac(6')-lb-cr were not detected in any isolate. The blaCTX-M-14 gene was detected in a ceftriaxoneresistant isolate of S. enterica paratyphi A, with ISEcpl located on the upstream of it. Three muhidrugresistant strains of Salmonella all carried one 1 900 bp classⅠ integron gene cassette dhfrⅫ-orfF-aadA2,with the additional one β-lactamase gene of blaTEM-1, or blaOXA-30. Twenty-two distinct PFGE patterns were observed among twenty-five S. enterica typhi. The PFGE patterns of sixty-four S. enterica paratyphi A showed limited genetic diversity (average similarity of 91% ). Ninety investigated inpatients were infected in the community. Six patients infected by S. enterica paratyphi A had a travel history before infection. Conclusions Nalidixic acid-resistant S. enterica typhi and S. enterica paratyphi A are highly prevalent in Shenzhen,China. The mutation in the QRDR of GyrA is the prevalent mechanism responsible for the resistance to nalidixic acid in Slmonella. The great genetic similarity among S. enterica paratyphi A isolates indicates endemic disease from the presence of a single clone over 6-year period.     

肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的比较产超广谱β-内酰胺酶（EsBk）肺炎克雷伯菌与非产ESBLs菌株的耐药隋况。方法收集2007年1～12月深圳市人民医院住院患者分离的肺炎克雷伯菌76株。采用K－B法对其进行药敏试验,ESBLs确证采用CLSI（临床实验室标准化委员会）推荐的纸片扩散法表型确证试验。结果所有分离株均对亚胺培南敏感;产酶株对抗生素的耐药率高于非产酶株;产酶株对哌拉西林和头孢克洛100％耐药。结论肺炎克雷伯菌的耐药状况严重,β-内酰胺类抗生素和酶抑制剂联合用药、阿米卡星、头孢西丁和碳氢霉烯类药物可控制产ESBI．s肺炎克雷伯菌感染。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌CTX-M基因检测及药敏分析

目的：了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBIB)肺炎克雷伯菌分离株中，CTX-M型菌株与非CTX-M型菌株的耐药特点，为临床用药提供数据。方法：收集ESBLs阳性的肺炎克雷伯菌临床分离株64株，应用聚合酶链反应(PCR)扩增产ESBLs株质粒的CTX—M基因。采用NCCLS推荐的琼脂稀释法测定11种抗生素对所有产酶株的最低抑菌浓度(MIC)，并对结果进行分析。结果：产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率为100％，对哌拉西林／他唑巴坦、环丙沙星、头孢西丁和阿米卡星敏感率分别为71．8％、70．3％、65．6％和62．5％，氨苄西林／舒巴坦几乎没有抗菌活性(敏感率为1．6％)，产CTX-M株与非CTX-M型产酶株对上述药物的敏感性无显著差异。但对头孢噻肟和头孢他啶却表现出不同的药敏特性。CTX-M阳性株对头孢噻肟的敏感性远低于CTX-M阴性株(7．1％比68．2％)。但对于头孢他啶，CTX—M阳性株的敏感性却明显高于CTX-M阴性株(54．2％比27．3％)。结论：(1)亚胺培南、哌拉西林／他唑巴坦、环丙沙星、头孢西丁和阿米卡星对产ESBLs肺炎克雷伯菌有较好的抗菌活性，氨苄西林／舒巴坦对其几乎没有抗菌作用。(2)用于检测ESBLs的底物应包括头孢噻肟，以防漏检CTX-M型ESBLs。