NgR-Rhoa-Rock信号通路在早期糖尿病大鼠RGC凋亡中的作用

目的： 研究NgR-Rhoa-Rock信号通路在糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用及机制。

方法：健康SD大鼠,以50mg/kg体质量单次腹腔注射1%链脲佐菌素的方法处理,以血糖值大于16.7mmol/L定为糖尿病模型; 然后随机分成3组,每组10只。另取10只健康SD大鼠作对照组。再依次对4组大鼠进行双侧眼球玻璃体腔内注射NgR小干扰病毒10μL(siRNA组)、NgR小干扰病毒稀释液10μL(DM组)、NgR小干扰病毒阴性对照液10μL(siRNA空白组)、NgR小干扰病毒稀释液10μL(正常对照组),正常喂养。期间对血糖、体质量等一些生命指标进行观查、测量并记录。12wk后,行视网膜Western blot检测NgR、Rhoa的表达,HE染色、TUNEL染色。

结果：Western检测：与正常对照组相比,DM组和siRNA空白组中NgR、Rhoa表达明显增加(P<0.01),而siRNA组无明显变化(P>0.05); 与DM组和siRNA空白组相比,siRNA组NgR、Rhoa表达明显下调。HE染色：与正常对照组相比,三组模型鼠均有不同程度节细胞排列紊乱、形态不规则、间距不一致; 与DM组和siRNA空白组相比,siRNA组节细胞在排列顺序、外形大小等有一定程度改善。TUNEL染色：与正常对照组相比,三组模型鼠均有节细胞凋亡; 与DM组和siRNA空白组相比,siRNA组凋亡细胞数量较少,细胞外形有明显改善。

结论：DM时大鼠视网膜NgR、Rhoa表达上调,抑制NgR-Rhoa-Rock可以改善糖尿病视网膜神经节细胞的凋亡。     

TORCH感染与不良妊娠关系的分析

目的比较正常妊娠和异常妊娠妇女血清TORCH感染情况。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对3851例妊娠(包括3449例正常妊娠和402例异常妊娠)妇女进行TORCH-IgM抗体检测。结果 3449例正常妊娠孕妇血清弓形虫(TOX)、风疹病毒(RUV)及巨细胞病毒(CMV)IgM抗体阳性率分别为0.32%、0.20%、1.88%,总阳性率为2.41%;402例异常妊娠妇女TOX、RUV、CMVIgM抗体阳性率分别为3.48%、2.74%、9.20%,总阳性率为15.42%。异常妊娠妇女TOX、RUV、CMV的IgM阳性率以及TORCH感染总阳性率明显高于正常妊娠孕妇,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TORCH感染与不良妊娠密切相关,应重视TORCH感染的早期筛查和诊治。     

重组碱性成纤维细胞生长因子通过Notch1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的　探讨重组碱性成纤维细胞生长因子(recombinant basic fibroblast growth factor,rbFGF)通过Notch1信号通路对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell，RGC)的保护作用。方法　雄性SD大鼠40只，随机分成对照组、糖尿病组、rbFGF组、rbFGF+DAPT组(DAPT为Notch1通路的特异性拮抗剂)，每组10只。后三组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ) 诱导糖尿病模型。模型诱导成功后，rbFGF组给予rbFGF 10 μL(200 U)玻璃体内注射给药，rbFGF+DAPT组在给予rbFGF基础上加用DAPT(10 μmol·L^-1)。注射12周后，HE染色检测RGC密度，免疫组织化学染色检测神经元再生相关蛋白GAP-43、Notch1蛋白表达，Western blot检测GAP-43、Notch1蛋白及凋亡相关蛋白Caspase-3相对表达量。结果　与对照组RGC密度(433.49±6.02)个·mm^-2，GAP-43荧光强度(8.96±0.26)%、Notch1阳性率(45.04±0.46)%及Caspase-3 (27.91±0.63) %蛋白表达相比，糖尿病组RGC密度(328.35±6.43)mm^-2，Notch1荧光强度(31.66±0.40)%蛋白表达明显降低，GAP-43荧光强度(13.66±0.52)%、Caspase-3 (48.91±0.64)%蛋白表达明显增加(均为P<0.05)；而与糖尿病组相比，rbFGF组RGC密度(425.30±7.98)个·mm^-2，Notch1阳性率(41.76±0.62)% 及GAP-43荧光强度(33.05±0.37)%蛋白表达明显增加，Caspase-3 (28.86±0.71)%蛋白表达明显降低(均为P<0.05)；而rbFGF+DAPT组RGC密度(324.91±8.22)个·mm^-2，GAP-43荧光强度(14.27±0.64)%、Notch1阳性率(30.40±0.82)%及Caspase-3 (47.63±0.68)%蛋白表达均无明显变化(均为P>0.05)。结论　rbFGF可上调糖尿病状态下视网膜GAP-43蛋白表达，下调Caspase-3蛋白表达，进而提高RGC的存活，其机制可能与激活Notch1信号通路有关。     

解放思想,勇于创新,加快高等医学教育教学改革

反思传统医学教育模式存在的弊端,解放思想、更新教育观念,明确医学人才培养新目标,提高开放式医学教育是培养新世纪医学人才要求的认识,思索与探讨面向21世纪的高等医学教育新模式,促进医学教育教学改革的进程。     

糖网病发病机理的研究进展

糖尿病视网膜病变是致盲的常见原因 ,因而最引人注意。多年来 ,国内外学者对糖网病进行了大量实验性和应用性研究 ,取得了一定的进展。本文在简要回顾糖网病病理变化的基础上 ,对其发病机制 ,诸如高血糖与糖网病、糖网病与糖代谢异常的学说以及血管生成因子的作用等作一综述。     

链脲佐菌素-糖尿病大鼠视网膜微血管病理改变

目的：观察SIZ-糖尿病大鼠视网膜微血管的早期病理变化。方法：45只SD大鼠被随机分为糖尿病组(DM)和对照组(CON)，用链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导SD大鼠建立糖尿病动物模型，分别饲养3个月和6个月。各组大鼠到期后，取眼球，采用视网膜消化铺片PAS染色、细胞图像分析及透射电镜技术进行早期糖尿病视网膜微血管形态学检查，记数微血管细胞数和无细胞血管数目，观察微血管及细胞超微结构。结果：糖尿病视网膜早期微血管周细胞数目逐渐减少，无细胞血管增多。超微结构显示微血管细胞结构异常，基底膜变性、增厚。结论：糖尿病视网膜病变早期存在微血管细胞病变、基底膜变性增厚及无细胞血管形成的改变。临床应重视糖尿病视网膜病变(DR)的早期防治，改善微血管循环。     

体外培养大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化：Wnt3a信号分子的诱导作用**

背景：Wnt信号通路是细胞增殖分化的关键调控环节。已有证据显示此通路参与了对神经前体细胞增殖、分化以及决定细胞命运的调控。目前有关Wnt信号通路对间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用还少见报道。目的：寻找促进间充质干细胞向神经元样细胞分化的Wnt信号分子。方法：采用密度梯度离心法在体外分离培养SD大鼠股骨间充质干细胞并培养。传代后通过形态学和流式细胞学检测细胞表面标志物CD29、CD44、CD34、CD45,筛选并鉴定培养细胞。采用神经营养因子碱性成纤维细胞生长因子分别联合Wnt3a和Wnt5a诱导方案,通过免疫组化和RT-PCR的方法比较Wnt3a、Wnt5a在间充质干细胞向神经元样细胞分化过程中的作用,以碱性成纤维细胞生长因子单独培养为对照。结果与结论：间充质干细胞经培养、传代后,细胞贴壁生长,形态均一,呈长梭形,流式细胞学检测细胞表面标志物CD29、CD44高表达, CD34、CD45低表达。Wnt3a诱导后细胞巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶呈阳性,胶质纤维酸性蛋白无明显表达,诱导后细胞的活力良好;Wnt5a诱导组及对照组巢蛋白呈弱阳性表达,神经元特异性烯醇化酶及胶质纤维酸性蛋白阴性。RT-PCR结果显示,Wnt3a诱导组巢蛋白在诱导前后均有表达,神经元特异性烯醇化酶在诱导后5 d可见明显的扩增条带,10 d后更加明显;胶质纤维酸性蛋白在诱导10 d后有比较弱的扩增条带出现。结果说明Wnt3a分子能够促进体外培养的间充质干细胞向神经元样细胞分化。     

碘对骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞存活时间的影响**

背景：体外实验中人们发现,常规化学诱导剂诱导骨髓间充质干细胞分化的神经元样细胞存活时间较短,这就限制了其进一步的应用。关于碘是否可以延长诱导的神经元样细胞的存活时间尚未见系统报道。目的：观察微量元素碘对由骨髓间充质干细胞分化成的神经元样细胞存活时间的影响。方法：无菌条件下取大鼠第3代间充质干细胞,分为A~F组：A组不加碘离子,B~F组中分别加入质量浓度为2,55,90,125和2 500 mg/L的碘离子,另设空白对照组,同时加化学诱导剂二甲基亚砜向神经元方向诱导分化。对诱导后的细胞进行免疫组织化学检测,观察诱导的神经元样细胞在不同质量浓度碘离子下的存活时间。结果与结论：加入的碘离子质量浓度在55~125 mg/L时,细胞存活时间可达到5 d,镜下细胞结构完整,5 d后随培养时间的延长,死亡细胞逐渐增多,至1周左右,神经元样细胞几乎全部死亡。碘离子质量浓度为2 mg/L和2 500 mg/L时,细胞存活时间为12~36 h,和未加碘离子组差异无显著性意义,至两三天,神经元样细胞几乎全部死亡。提示适当浓度的碘离子加入到常规化学诱导剂中,可延长骨髓间充质干细胞分化的神经元样细胞的存活时间;加入到化学诱导剂中的碘离子质量浓度过低或过高时,不改变骨髓间充质干细胞分化的神经元样细胞的存活时间。     

宫颈病变患者人乳头瘤病毒检测结果分析

目的 探讨宫颈病变者人乳头瘤病毒(HPV)感染现状及不同基因型分布.方法 采用PCR及分子杂交技术对795例宫颈病变者(宫颈病变组)及500例体检健康者(对照组)进行HPV及HPV DNA亚型检测.结果 宫颈病变组HPV阳性率为51.9%(413/795),高于对照组的14.4%(72/500)(P＜0.05).将宫颈病变组按年龄分为:≤20岁、(＞20～30)岁、(＞30～40)岁、(＞40～50)岁、>50岁组.各组HPV阳性率分别为24.2%、48.0%、63.8%、51.4%、63.0%.413例HPV阳性标本中,高危基因型以HPV16、18型为主,分别占23.5%、11.6%;低危型以HPV6、11型为主,分别占12.6%、14.8%.结论 女性宫颈病变与HPV感染关系密切,在不同年龄段均有较高的感染率.HPV筛查对宫颈癌的早防早治非常重要.     

关爱老人 远离抑郁

<正>一、引起老年抑郁的原因老年人退休后生活环境反差较大,不可避免地出现社会地位的下降和职业权利的丧失,生活重心也被迫转移到家庭和生活琐事上,会有自我价值感和认同感下降、不断否定自己、产生悲观的情绪的可能。