多中心、多物种临床前研究向临床研究的转化进展

随着医学研究进展,新的干预措施不断被引进临床,特别是与重症医学相关的治疗措施在近几十年里取得了显著进展.得益于过去20年临床试验经验与教训,提高了新药临床前研究转化为临床研究的比例.本文探讨实施动物实验和系统评价方法中存在的问题.探索把现代临床试验方法有效地应用于临床前研究的可行性,重点阐述了多中心、多物种临床前研究和临床研究的关联与差异,希望有益于减少基础研究向临床转化的风险.     

肺血栓栓塞症患者血小板功能和血清抗心磷脂抗体的变化及意义

目的　探讨肺血栓栓塞症 (PTE)患者溶栓和抗凝治疗前后血小板功能和血清抗心磷脂抗体 (ACA)的变化及临床意义。方法　选择经螺旋CT肺动脉造影确诊的PTE患者 4 8例为病例组 ,年龄、身高、体重相匹配的健康者 2 0名为对照组。用流式细胞仪检测血小板膜上P 选择素、糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)的变化 ;酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测血浆血栓素B2 (TXB2 )、6 酮 前列腺素F1α(6 Keto PGF1α)、血管性假血友病因子 (vWF)、D 二聚体和血清ACA ,并比较溶栓和抗凝治疗前及治疗 1周时各项指标的变化。结果　病例组P 选择素、GPⅡb/Ⅲa、vWF、TXB2 、D 二聚体、TXB2 / 6 Keto PGF1α(T/K)分别为 (12 4 2± 7 0 3) %、(19 6± 12 5 ) %、(3 8± 1 9)mg/L、(194 5± 2 3 1) %、(341 1±4 2 6 )ng/L、(5 7 3± 19 2 ) ,显著高于对照组的 (2 2 0± 1 5 0 ) %、(1 8± 0 9) %、(0 3± 0 1)mg/L、(99 8± 2 2 8) %、(5 3 7± 16 8)ng/L、(3 4± 1 5 ) ,两组相比差异有显著性 (P均 <0 0 1) ;而 6 Keto PGF1α为(6 7± 2 8)ng/L ,显著低于对照组的 (16 8± 2 6 )ng/L ,差异有显著性 (P <0 0 1)。ACA IgG、IgA显著高于对照组 (P <0 0 1)。PTE患者经治疗 1周后 6 Keto PGF1α较治疗前明显升高 (P <0     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血栓素B26-酮-前列腺素F1α和抗心磷脂抗体检测的临床研究

目的观察阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-K-PGF1α)和抗心磷脂抗体(ACA)的变化及经鼻持续正压通气(nCPAP)对其影响.方法选择经多导睡眠图(PSG)确诊的OSAHS患者60例为试验组,根据睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、最低血氧饱和度(SaO2min)将OSAHS患者分为轻、中重度组,并设正常对照组20名,19例重度OSAHS患者接受nCPAP治疗为治疗组,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组TXB2、6-K-PGF1α和ACA,比较各试验组与对照组,治疗组治疗前、后的各项指标的差异. 结果 (1)中重度OSAHS组血浆TXB2显著高于对照组(P<0.01),nCPAP治疗后比治疗前明显下降(P<0.001);中重度OSAHS组血清抗心磷脂抗体IgG和IgM(ACA-IgG、ACA-IgM)显著高于对照组(P<0.01),nCPAP治疗后比治疗前明显下降(P<0.001);中重度OSAHS组血浆6-K-PGF1α显著低于对照组(P<0.01),nCPAP治疗后比治疗前明显升高(P<0.001);(2)TXB2、ACA与AHI呈正相关,与SaO2 呈负相关(P<0.001);而6-K-PGF1α与AHI呈负相关,与SaO2呈正相关(P<0.001). 结论 OSAHS患者易患血栓栓塞性疾病.TXB2、6-K-PGF1α和ACA在OSAHS患者血栓栓塞性疾病高发病率中起重要作用,并与夜间低氧血症密切相关;nCPAP治疗可有效逆转上述改变.     

低分子肝素减轻大鼠肺纤维化机制探讨

目的探讨低分子肝素减轻大鼠肺纤维化的可能作用机制。方法54只雄性SD大鼠,随机分成正常对照组(A组)、模型组(B组)、低分子肝素组(C组)。B组、C组经气管内一次性注入博莱霉素A5(5mg·kg-1·ml-1)制作大鼠肺纤维化模型,A组气管内一次性注入等量生理盐水;C组皮下注射低分子肝素1000U/d,A、B组给予每天0.2ml生理盐水皮下注射。3组大鼠分别于造模后7d、14d、28d留取肺组织、血清、血浆、肺泡灌洗液。取肺组织做HE、Masson染色,并取肺组织测定肺组织胶原含量,取血清和肺泡灌洗液测定转化生长因子β1(TGF-β1)含量。结果C组较B组肺纤维化程度明显减轻,C组肺组织、血清及肺泡灌洗液中TGF-β1含量、胶原含量较B组明显减少。结论低分子肝素可能是通过影响TGF-β1的含量,从而减轻大鼠纤维化程度。     

雾霾暴露对气道炎症因子表达的影响

目的 对石家庄市区中重度雾霾天气进行污染特征的分析,并探讨中重度雾霾天气短期暴露对痰液中相关炎症因子水平及细胞分类计数的影响.方法 选择石家庄市中心城区户外工作人群为研究对象,分别于岗前、岗后(间隔4~6h)收集痰液送炎症因子检测、细胞计数,分析其前后统计学差异.结果 ①冬季石家庄市区雾霾严重,颗粒物、硫化物、氮氧化物都比较严重;3~4月份有所改善,细颗粒物及有害气体改善显著,但是由于沙尘影响可吸入颗粒物比例还是比较大;5~7月入夏季节均有明显改善,颗粒物及有害气体水平都有显著降低.②雾霾短期暴露后痰液中促炎因子IL-2、IL-8表达升高,抑炎因子转化生长因子β1(TGF-β1)表达降低,脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧自由基清除因子超氧化物歧化酶3(SOD-3)表达水平降低,差异有统计学意义.③雾霾短期暴露后痰液中中性粒细胞及淋巴细胞数目较暴露前增多趋势,但差异无统计学意义.结论 雾霾对户外高暴露人群存在一定健康威胁,可以刺激气道产生一定的炎症反应,对机体防御功能及氧化应激能力造成干扰及影响.     

吸入上转换纳米颗粒对小鼠肺肝均有一过性损害

BACKGROUND: Lots of in vitro experiments have explored the toxicity of upconversion nanoparticles, but its toxicity in vivo is little reported. OBJECTIVE: To investigate the toxicity of upconversion nanoparticles in mouse organs. METHODS: After tracheotomy, 36 Balb/c mice were randomly divided into three groups, followed by instilled with 28 mg/kg upconversion nanoparticle (experimental group), the same volume of normal saline (control group), and nothing (sham operation group), respectively. The functional changes of the lung, liver and kidney were detected at 1 day, 1 and 2 weeks postoperatively, and meanwhile, the morphological changes of the lung, liver, kidney, and heart were observed. RESULTS AND CONCLUSION: At 1 day postoperatively, the pH values in the experimental group were lower than those in the control and sham operation groups (P < 0.05), while the glutamic-pyruvic transaminase level was higher than that in the control and sham operation groups (P < 0.05). The oxygen partial pressure in the sham operation group was higher than that in the other two groups at 1 day postoperatively (P < 0.05). The oxygen partial pressure and glutamic-pyruvic transaminase level did not significantly differ among groups at 1 and 2 weeks postoperatively. The carbon dioxide differential pressure and kidney function showed no significant differences among groups at different time points after surgery. At postoperative 1 day, in the experimental group, hyperplasia and inflammation were most obvious, distorted alveolar cavity and congestion of blood vessels were visible. In the control group, obvious hyperplasia and inflammation were found, the alveolar cavity was crimped and the gap between alveoli was broadened. The sham operation group had normal alveoli with no inflammations. Lung lesions in the experimental and control groups became mild with time at postoperative 1 and 2 weeks. One day postoperatively, hepatocyte swelling and vacuolar degeneration were severer in the experimental group. Moderate hepatocyte swelling and vacuolar degeneration occurred in the control group. The sham operation group showed mild hepatocyte swelling and vacuolar degeneration. The morphology of the liver in each group returned to normal at 2 weeks postoperatively. Fortunately, the heart and kidney structure showed no overt changes in each group. These findings suggest that upconversion nanoparticles cause transient damage to the mouse lung and liver.     

河北省严重急性呼吸综合征患者骨坏死状况调查

严重急性呼吸综合征（SARS）是由新型冠状病毒（SARS-CoV）引起的急性传染病，其靶器官主要是肺和淋巴系统。患者出院后往往遗留不同程度的残疾，已有康复后短期内骨关节损害的报道。我们于2004年11月至2005年1月对出院20个月的患者骨关节进行MRI检查，现将结果报道如下。     

白三烯受体拮抗剂对致敏大鼠血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的 研究白三烯受体拮抗剂(孟鲁司特)对支气管哮喘(简称哮喘)气道炎症和气道重塑的影响,揭示白三烯受体拮抗剂对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体的调控作用.方法 将24只清洁级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘组和干预组,每组8只.对照组采用生理盐水致敏和激发,哮喘组采用卵清白蛋白致敏和激发,干预组在采用卵清白蛋白致敏和激发前给予孟鲁司特灌胃.采用肺功能检测各组大鼠气道呼气阻力;采用酶联免疫吸附法(ELISA)对各组大鼠血清中VEGF和白三烯D<4>(LTD4)进行定量分析;用免疫组织化学方法检测VEGF、VEGF受体1(VEGFR1)及VEGFR:在大鼠肺组织内的表达水平.采用图像分析软件测定肺组织切片中的血管计数、血管平滑肌厚度.结果 (1)肺功能检测显示哮喘组平均呼气阻力显著升高;(2)对照组血清中VEGF和LTD4的水平分别为(17±5)ng/L和(6.1±0.7)ng/L,哮喘组分别为(31±6)ng/L和(10.7±3.5)ng/L,干预组分别为(15±4)ng/L和(9.8±1.6)ng/L,对照组和干预组分别与哮喘组比较差异有统计学意义(F值分别为63.78和39.56,均P<0.01);(3)免疫组织化学结果显示哮喘组VEGF及受体均大量表达,而对照组和干预组有较少表达.(4)图像分析显示,对照组、哮喘组和干预组的血管计数分别为14±2、22±2和16±4.(5)直线相关分析显示,血管计数与血清中VEGF的水平正相关(r=0.705,P<0.05).结论 VEGF及其受体在哮喘气道及肺内过度表达,参与了气道炎症和气道血管重塑的过程.孟鲁司特可能通过影响VEGF及其受体的表达影响气道炎症和气道血管重塑的病理生理过程.     

咯利普兰对类风湿关节炎合并间质性肺疾病患者外周血单个核细胞核因子-κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素-8表达的影响

目的 探讨选择性磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂对类风湿关节炎(RA)合并间质性肺疾病(ILD)患者外周血单个核细胞(PBMC)体外产生促炎性细胞因子的影响及机制,为选择性PDE4抑制剂治疗RA合并ILD提供理论依据.方法 采集15例健康志愿者(健康对照组)和20例初治活动期RA合并ILD患者(RA合并ILD组)的PBMC.RA合并ILD组PBMC分为空白对照组、茶碱组、咯利普兰组和地塞米松组,免疫细胞化学法检测PBMC核因子-κB (NF-κB) p65阳性细胞百分率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测PBMC培养上清中肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素-8(IL-8)水平.结果 (1)健康对照组、RA合并ILD组中咯利普兰组、地塞米松组PBMC培养上清中TNFα、IL-8水平和NF-κB p65阳性细胞百分率低于空白对照组(P＜0.01),咯利普兰组、地塞米松组低于茶碱组(P＜0.01);地塞米松组IL-8水平低于咯利普兰组(P＜0.05).(2)相关性分析:RA合并ILD组PBMC培养上清中NF-κB p65阳性细胞百分率与TNFα、IL-8水平呈正相关(r值分别为0.902、0.735,P＜0.01).咯利普兰组NF-κBp65阳性细胞百分率与TNFα、IL-8水平呈正相关(r=0.874,P＜0.01;r =0.561,P ＜0.05).结论 RA合并ILD患者PBMC NF-κB活化并产生促炎性细胞因子,参与了RA合并ILD的发病过程;选择性PDE4抑制剂可能通过抑制NF-κB活性抑制PBMC产生促炎性细胞因子,从而抑制RA合并ILD的炎症反应.     

类风湿关节炎外周血单个核细胞磷酸二酯酶活性的变化及与间质性肺疾病的关系

目的 观察类风湿关节炎(RA)外周血单个核细胞(PBMC)磷酸二酯酶(PDEs)活性的变化及与间质性肺疾病(ILD)的关系,探讨PDEs在RA及RA-ILD发病机制中的作用.方法 67例初治活动期RA患者分为RA-ILD组30例和单纯RA组37例,同时设健康对照组20名,高效液相色谱法测定PBMCs中环磷酸腺苷(cAMP) PDEs的活性变化,并与患者的临床、实验室及肺损伤指标进行相关性分析.采用单因素方差分析、Student-Newman-Keuls检验、t检验、Spearman相关分析进行统计学分析.结果 ①RA患者PBMC-cAMP-PDEs活性(51±11)高于对照组(34±8,P＜0.01),其中RA-ILD组PBMC-cAMP-PDEs活性(58±10)高于单纯RA组(46±7,P＜0.0l).②RA患者PBMC-cAMP-PDEs水平与晨僵时间、关节压痛数、关节肿胀数、X线分期、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)以及28个关节疾病活动指数(DAS28)评分呈正相关(r值分别为0.432、0.441、0.527、0.430、0.466、0.616、0.662、0.519,P均＜0.01).③RA-ILD患者PBMC-cAMP-PDEs水平与ERS、CRP、RF、CT评分呈正相关(r值分别为0.466、0.616、0.662、0.488,P均＜0.01),与动脉血氧分压(PaO2)呈负相关(r=--0.563,P＜0.01),与肺活量(VC)及一氧化碳弥散吸收率(DLCO)无明显相关性(r值分别为0.118、-0.259,P＞0.05).结论 RA及RA-ILD患者免疫细胞内PDEs活性增高,并与RA疾病活动性及RA-ILD肺损伤严重程度有关,提示PDEs可能参与了RA及RA-ILD的发病过程.