嗜麦芽窄食单胞菌耐药性分析

嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomonas maltophilia)广泛分布于自然界,为条件致病菌,因其具有对多种抗生素耐药的特点,使临床感染难以治愈.因此,耐药性分析具有重要意义.本研究对分离的101株嗜麦芽窄食单胞菌进行药敏试验,现报告如下.     

产ESBLs细菌体外药敏试验结果报告探讨

目的探讨产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的Vitek药敏试卡法和纸片扩散法(Kirby-Bauer)检测ESBLs以及药敏结果的差别。方法256株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌采用Vitek药敏试卡和K-B法进行药敏试验,对Vitek药敏试卡法检测ESBLs疑似假阴性菌进行确证试验验证,同时对25株产ESBLs细菌的感染患者进行β-内酰胺类抗生素临床疗效监测。结果Vitek药敏试卡法ESBLs的检出率为21.87%(56株),K-B法检测结果与Vitek药敏试卡法专家修正结果差异显著(P<0.05)。产ESBLs细菌不经修正的K-B法的药敏结果与临床疗效相吻合,CAZ的敏感率和临床疗效均优于头胞噻肟CTX(P<0.05)。结论对Vitek药敏试卡法检测ESBLs疑似假阴性菌应采用K-B法确证试验加以确认,国内分离的产ESBLs细菌的β-内酰胺类抗生素药敏实验结果不应盲目采用NCCLS推荐标准加以修正,而应结合临床疗效如实报告Vitek药敏试卡法仪器结果或K-B法结果,同时对药敏结果进行注评。     

鼻咽拭子中鼻病毒三种检测方法比较分析

目的 比较三种检测方法(病毒分离培养鉴定法、核酸序列测定法和PCR-荧光探针法)检测鼻咽拭子标本中鼻病毒(HRV)的可靠性。方法 采用盲法、对比试验设计。根据纳入标准和排除标准入组220例鼻咽拭子标本,分别用病毒分离培养鉴定法、核酸序列测定法和PCR-荧光探针法进行盲法检测,以评价三种检测方法的临床应用性能。结果 本次试验入组的220例鼻咽拭子样本中,病毒分离培养鉴定法检测结果为阳性的样本20例,核酸序列测定法检测结果为阳性的样本32例,PCR-荧光探针法检测结果为阳性的样本35例。与病毒分离培养相比,PCR-荧光探针法检测阳性符合率为100.00%,阴性符合率为92.50%,总符合率为93.18%;PCR-荧光探针法与病毒分离培养鉴定法检测结果一致性一般(kappa=0.692),与核酸序列测定法检测结果一致性较好(kappa=0.947)。结论 PCR-荧光探针法检测鼻咽拭子标本中的HRV可靠、准确、安全、简便、稳定,具有较高的临床应用价值。     

甲状腺结节细针穿刺标本中BRAFV600E突变的临床意义

目的探讨BRAFV600E突变率在甲状腺结节术前诊断中的意义及其可行性。方法选择2012-01-2013-01行细针穿刺术（FNA）的甲状腺结节患者337例,根据细胞学诊断分为Thy1、Thy2、Thy4和Thy5组,分别检测FNA标本的BRAFV600E突变。结果 Thy5组BRAFV600E突变率为22.2%;甲状腺结节的不同病理类型及BRAF突变率与桥本甲状腺炎（HT）无相关性（均P＞0.05）;与Thy2组比,Thy5组TSH水平较高[（2.83±2.11 vs 1.95±1.29）mU/L,t=2.251,P＜0.05]。结论检测甲状腺结节FNA标本的BRAFV600E突变简便、可行;对一部分因取材不满意标本可提供补充诊断;BRAF突变与HT可能无关。     

不同液化处理及核酸共提取方法对痰样本中病毒核酸的提取效果比较

目的 比较不同痰液液化方法及不同核酸提取方法共提取痰液中病毒RNA和DNA的效果,并比较其优劣.方法 将痰液样本分为二硫苏糖醇(DTT)、氢氧化钠(NaOH)液化痰液组,以生理盐水为对照,分别使用TTIANamp Virus DNA/RNA Kit(方法1)、KBW酶法(方法2)、KBW通用法(方法3)和单一核酸提取试剂盒(方法4)提取核酸,微量核酸分析仪检测核酸纯度,多重定量PCR方法检测核酸的浓度.结果 核酸纯度测定结果:生理盐水组中方法2和方法3,DTT处理组中方法1和方法2,NaOH处理组中方法3所提DNA纯度略大于1.8;各组中采用方法1所提RNA纯度均明显超过2,方法4及NaOH处理组中方法3所提RNA纯度均低于1.8,其余纯度均在正常范围内.PCR浓度测定结果:腺病毒(DNA)Ct值:生理盐水组＜NaOH处理组(q=35.09,P＜0.05),生理盐水组和DTT处理组间差异无统计学意义(q=2.54,P＞0.05);提取方法1＜方法3(q=12.68,P＜0.05),方法1、方法2与方法4之间差异无统计学意义(q=0.84、1.69、2.53,P＞0.05);呼吸道合胞病毒(RNA)Ct值:生理盐水组＜DTT组＜NaOH组(F=152.76,P＜0.01);提取方法1＜方法2＜方法3(q=6.98、3.75,P＜0.05),方法2与方法4之间差异无统计学意义(q=1.28,P＞0.05).结论 痰液液化前处理会影响病毒RNA和DNA的共提取,TIANamp Virus DNMRNA Kit和KBW酶法对痰样本中病毒核酸共提取效果较好.     

多重实时荧光定量PCR方法在高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测中的应用

摘要：目的?建立一种基于多重实时荧光定量PCR(MRT-PCR)技术的可同时检测14种高危亚型人乳头瘤病毒(HPV16、18、31、33、35、39、52、45、51、56、58、59、66、68)癌基因E6/E7 mRNA的方法。方法?对14种高危型HPV各自的E6/E7基因序列区域设计特异性引物和探针，配以优化的反应体系，形成HPV E6/E7 mRNA检测体系，评价方法检出限、特异性。收集223例临床样本，分别用自建的一步法MRT-PCR法与转录介导等温核酸扩增(TMA)技术(Aptima?HPV试剂盒)检测HPV E6/E7 mRNA，同时评估HPV E6/E7 mRNA检测结果与薄层液基细胞学检测、宫颈组织病理学检测结果的一致性。结果?建立的检测方法对常见的低危型HPV无交叉检出，且对14种高危型HPV的检测限可达10～100 copies/μL。该方法检测223例临床标本的结果与Aptima??HPV检测结果相比，一致性较好(Kappa=0.910)。以组织病理结果为CINⅡ及以上的作为阳性，MRT-PCR法临床检测敏感性为84.0%，特异性为94.4%，阳性预测值为65.6%，阴性预测值为97.9%。结论?建立的MRT-PCR方法具有特异性好、灵敏度高和稳定性好等优点，为HPV临床快速检测以及宫颈病变筛查提供了一个有效的技术平台。     

养阴通脑颗粒对脑缺血大鼠红细胞变形能力和小鼠减压缺氧耐力影响的实验研究

目的：探讨养阴通脑颗粒对脑缺血大鼠红细胞变形能力和小鼠减压缺氧耐力影响。方法：采用四血管阻断法（4V0法）制作老年大鼠脑缺血损伤模型，观察养阴爱脑颗粒对血液变学指标的影响；采用小鼠减压缺氧耐力方法观察了本品的抗缺氧能力。结果：养阴通脑颗粒具有提高红细胞变形能力、降低全血粘度的作用，延长减压缺氧小鼠存活时间。结论：养阴通脑颗粒对脑缺血性老年大鼠异常血液流变学变化具有改善作用和提高小鼠的缺氧耐受能力。     

1028份痰标本真菌分离率分析

随着医疗水平的不断提高和治疗手段的不断丰富,人类的寿命已经越来越长,老年人占人口的比例越来越大。而老年人由于生理防御机能、免疫力等下降,容易引起真菌感染犤1犦。因此,即将步入老年社会的我国应加强真菌感染方面的研究。本文对我院今年夏天住院患者痰标本的真菌分离状况     

723例结核病住院患者结核分枝杆菌耐药性分析

目的 了解结核病住院患者结核分枝杆菌耐药情况.方法 收集2010年全年新收治结核病住院患者主要临床特征信息并进行统计分析,包括性别、年龄、糖尿病史、吸烟史及结核治疗史.回顾分析结核分枝杆菌临床分离株药敏试验结果.结果 2010年新分离分枝杆菌723株,其中结核复合群共671株,非结核分枝杆菌52株.671例结核病患者中,总耐药率43.82%、初治耐药率56.30%、复治耐药率32.07%;其中单耐药率、多耐药率和泛耐药率分别为13.41%、24.74%和5.66%.男女患者比例为2.2：1,患者年龄最小8岁,最大88岁.女性患者患耐药结核病风险低于男性,OR值为0.63（95%CI：0.42～0.94）,差异有统计意义（P〈0.05）.结核病治疗史和吸烟史是患者发生耐药结核的危险因素,OR值分别为1.62（95%CI：1.21～2.09）和2.72（95%CI：2.35～3.05）,差异有统计学意义（P均〈0.05）.非结核分枝杆菌株检出量及其检出率逐年上升,检出率由2006年的4.61%上升到2010年的7.19%.结论 应采取有效措施控制结核分枝杆菌感染及其耐药情况的进一步恶化.     

荧光PCR技术在粪便幽门螺杆菌ureA基因检测中的应用

目的 评价荧光PCR技术检测粪便幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）urea基因的价值.方法 采用荧光PCR技术检测50例消化内科住院患者的粪便样本,其中23例通过胃黏膜活检组织尿素酶及病理组织染色确诊为HP感染.同时进行HP培养和血清HP尿素酶抗体检测.四格表x2检验比较3种方法的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值.结果 荧光PCR技术检测粪便HP感染的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为1.00、0.96、96%和100%,而HP培养检测的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为0.78、1.00、100%和84%,其中敏感性和阴性预测值与荧光PCR法相比,差异具有统计学意义（X2=5.60和4.44,P值均〈0.05）.血清HP尿素酶抗体检测的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为0.96、0.74、76%和95%,其特异性和阳性预测值与荧光PCR法比较,差异具有统计学意义（X2=5.28和4.08,P值均〈0.05）.结论 粪便HPureA基因检测对诊断HP感染具有较高的临床价值.