急性白血病Id4基因启动子区甲基化状态研究

本研究探讨正常人和不同疾病状态急性白血病（AL）患者Id4基因启动子区甲基化状态差异。采用甲基化特异性聚合酶链反应（MS—PCR）对正常人和AL患者骨髓进行Id4基因启动子区甲基化状况检测。结果表明：Id4基因在正常骨髓中呈完全性非甲基化状态，初治AML和ALL患者中Id4基因甲基化比例分别为84％和86％。8例复发难治的AL患者中Id4基因全部甲基化，14例Id4基因甲基化的完全缓解ALL患者中有8例在12个月内复发，而9例Id4基因非甲基化的完全缓解ALL患者中12月内复发仅1例；Id4基因呈甲基化状态的完全缓解的AML患者中12个月内复发率为62．5％，而在非甲基化的患者中12个月内复发率仅为10％，两者差异有显著性意义。完全缓解的ALL患者甲基化比例为64．3％，而完全缓解的AML患者甲基化比例为28．6％，两者差异有显著性意义。39例初治AL中。有33例Id4基因呈甲基化状态，8例复发难治的AL患者的Id4基因均呈甲基化状态，58例完全缓解的AL中。有24例Id4基因呈甲基化状态。结论：与正常人不同，AL患者中Id4基因都发生了不同程度的甲基化改变，缓解状态患者的甲基化比例低于非缓解状态患者，Id4基因甲基化模式的改变与AL的发生密切相关。     

ZO-1基因与白血病相关性的研究及其在K562细胞中高表达意义的探讨

目的 探讨白血病细胞ZO-1基因的表达、甲基化情况及其与白血病发生的相关性.方法 应用基因组限制性酶切扫描(RLGS)技术自白血病小鼠标本中钓取ZO-1基因,用甲基化PCR方法检测自血病细胞系Molt4、HL-60、K562细胞及白血病患者原代白血病细胞及正常人外周血单个核细胞ZO-1基因甲基化水平,用RT-PCR方法检测ZO-1基因表达水平,并对高表达ZO-1基因的K562细胞进行小十扰RNA(siRNA)靶向干扰,然后用Northem blot方法验证ZO-1基因抑制效率,用CCK-8检测细胞增殖情况,膜联蛋白V(Annexin V)和碘化丙锭(PI)舣染色法观察细胞凋亡率及细胞周期.结果 采用RLGS技术从门血病小鼠标本中成功钓取ZO-1基因.原代白血病细胞及Moh4、HL-60细胞ZO-1基因呈高甲基化状态,ZO-1基因表达水平较正常人外周血细胞明显下降或不表达.正常人外周血单个核细胞ZO-1基因不发生甲基化,ZO-1基因高表达.K562细胞高表达ZO-1基因,未见ZO-1基因甲基化;去甲基化药物可以诱导Molt4及HL-60细胞重新表达ZO-1基因.经ZO-1小干扰RNA干预的K562细胞ZO-1基因的表达明显降低,但并不影响细胞的增殖及凋亡.结论 绝大多数急性白血病细胞中ZO-1基因呈高甲基化状态,表达明显降低,ZO-1基因是一个白血病相关基因.其在K562细胞中高表达的意义尚不明确.     

肾病综合征患儿细胞因子检测的临床意义

目的：探讨白细胞介素－6（IL－6）,白细胞介素－8（IL－8）,肿瘤坏死因子－α（TNF－α）在肾病综合征（NS）患儿发病中的动态变化及临床意义。方法：将18例NS患儿在活动期和缓解期分别采外周血进行间接酶联免疫吸附试验方法同时检测IL－6,IL－8和TNF－α的含量。结果：与对照组比较,NS患儿活动期IL－6,IL－8和TNF－α含量明显升高,差异有显著意义（P＜0．01）,NS患儿缓解与对照组比较,IL－6,IL－8的水平差异有显著意义（P＜0．01）,TNF－α的水平差异无显著意义（P＞0．05）。结论：IL－6,IL－8和TNF－α参与NS活动期的发病,可作为肾脏疾病活动指标之一。平差异有无显著意义（P＞0．05）。结论：IL－6,IL－8和TNF－α参与NS活动期的发病,可作为肾脏疾病活动指标之一。     

急性白血病细胞中ID4基因甲基化的PCR定量检测系统的建立及其特异性和敏感性

ID4基因启动子区甲基化发生率在急性白血病中极高,甲基化程度与急性白血病关系密切。因缺少合适的研究方法,其具体的甲基化量化水平与疾病的关系,人们一直缺乏认识。本研究旨在建立ID4甲基化定量PCR体系,同时验证该方法的特异性及敏感性,并初步尝试在初治急性白血病骨髓样本中评估ID4的甲基化水平。首先构建质粒并建立体系标准曲线,分别使用MSP和定量MSP对细胞系样本进行检测,以传统MSP的结果为对照,验证新方法的特异性;按不同比例将甲基化阴性和阳性细胞混合,用甲基化定量PCR扩增验证新方法敏感性。结果表明,本研究成功建立了符合绝对定量要求的标准曲线;通过细胞系验证,MSP结果与定量MSP结果完全一致;同时在甲基化阴性细胞背景下,定量MSP可以稳定的检测到1：10-5水平的ID4甲基化阳性细胞。在急性白血病骨髓样本检测中,定量MSP甲基化阳性检出率高于MSP。结论：本研究成功建立了完整的ID4基因甲基化定量PCR体系,该方法特异性好、敏感性高。     

北京市血液净化中心10年透析用水化学污染物变化分析

目的 透析用水的质量直接影响透析患者的治疗安全和透析并发症的发生.通过分析北京市属医院透析中心透析用水十年化学污染物检测结果,找出化学污染物不合格的原因,研究解决方法,可以帮助透析中心更好的选择合适的水处理系统,以及设备的正确维护方法.方法 铝、铜、钡、锌、砷、铅、银、锡、镉、铬采用电感耦合等离子体质谱法检测、硒和汞采用氢化物发生-原子吸收分光光度法,氯、氯胺采用分光光度测定法,氟、硝酸盐和硫酸盐应用离子色谱法检测.钙、镁、钠、钾采用电感耦合等离子体原子发射光谱法.结果 从2003年开始,19家透析中心透析用水化学物质超标,第2年4家,随后超标中心逐步减少,直到最后2年,北京全部透析中心透析用水化学物质全部达标.结论 在血液透析质量控制和改进中心的统一管理和指导下,血液透析中心使用高品质的水处理系统,同时,透析设备的常规维护和水质监测是保证透析用水质量的关键.     

FLT3基因3＇-非翻译区-荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定

为分析FMS样酪氨酸激酶3（FMS—like tyrosine kinase3,FLT3）基因3i非翻译区（3’untranslated region,3’-UTR）可能的微小RNA（miRNA）调控位点,构建FLT3基因3’-UTR-荧光素酶报告载体,与miRNA共转染293T细胞,分析miRNA对其调控作用。采用PCR方法从HepG2细胞基因组DNA中扩增FLT3基因3,-UTR区序列,插入经PstI和EcoRI双酶切的经过改造的荧光素酶报告载体pGL3-control（pGL3-control—ITI）;通过Target Scan5．1软件预测可能与FLT3基因3’-UTR作用的miRNA;采用FuGENEHD转染试剂包裹荧光素酶报告重组子和miRNA真核表达载体共转染293T细胞,双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果表明,成功构建了含有804bp的FLT3基因3’-UTR序列的荧光素酶报告重组子,通过酶切和基因测序的方法鉴定正确;miRNA靶位点预测显示,FLT3基因3’-UTR可能是miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-16、miRNA-195、miRNA-424、miRNA-497的作用靶点;与对照组相比,miRNA-15a、15b、195可使荧光素酶报告重组子的荧光素酶活性降低20％左右。结论：成功构建了FLT3基因3’-UTR-荧光素酶报告载体,而miRNA-15a、miRNA-15b、miRNA-195可抑制其荧光素酶活性。     

国产雷帕霉素支架和进口紫杉醇支架治疗急性心肌梗死的对比研究

目的 比较国产雷帕霉素洗脱支架和进口紫杉醇洗脱支架治疗急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者的安全性和临床疗效.方法 选择1年内接受国产雷帕霉素洗脱支架(51例)和进口紫杉醇洗脱支架(46例)治疗的STEMI患者共97例,观察术后9个月死亡、再次心肌梗死、支架内血栓形成、靶病变血运重建及主要不良心脏事件(MACE)发生率.结果 国产雷帕霉素支架和进口紫杉醇支架置入成功率均为100%.术后随访9个月,再发心绞痛(9.8%与8.7%)、死亡(0%与0%)、再次心肌梗死(2.0%与2.2%)、支架内血栓形成(0%与0%)、靶病变血运重建(0%与0%)及主要不良心脏事件发生率(11.8%与10.9%)比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 在STEMI患者直接PCI术中应用国产雷帕霉素洗脱支架与进口紫杉醇洗脱支架相比,具有相似的安全性和临床疗效,而性价比优于进口紫杉醇支架.     

尘肺CR摄片350例技术分析

近年来,医疗技术不断革新,尘肺摄片中,除常规普通仟伏摄片外,通过CR摄影检查,再通过技术处理,能够获得更清晰的影像资料。为临床提供更准确的诊断依据。     

慢性淋巴细胞白血病免疫表型分析及临床意义

1对象和方法1.1对象2001年4月-2005年3月在我院血液科就诊的慢性淋巴细胞白血病(chron ic lymphocytic leukem ia,CLL)患者31例,其中男25例,女6例,年龄52~81岁(平均61.8岁)。患者起病缓慢。早期表现为乏力、疲倦,后期出现食欲减退、消瘦、低热、盗汗及贫血等症状。淋巴结肿大常     

经腹肾癌扩大根治术

报告４３例经腹肾癌扩大根治术，整块切除肾周筋膜及其内容物，大范围系统的长度清扫腹膜后淋巴结。淋巴结阳性检出率１３．９５％。５年生存率Ⅰ－Ⅱ期８２．６％，Ⅲ期４４．４％，无手术死亡。该术式与其它根治术式相比，手术难度、手术残废率和术后并发症不增加，远期效果良好。认为肾癌根治术时应行扩大的淋巴清扫术。