八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导大鼠肺组织NF-κB活性增高的抑制作用

目的与方法：为探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）防治内毒素引起急性肺损伤的分子作用机理，用电泳迁移率变动分析技术（EMSA），观察CCK-8对脂多糖（LPS）诱导核转录因子κB（NF-κB）活性变化的影响，用光密度扫描电泳谱带峰面积积分值表示NF-κB活性，观察肺组织的病理学变化。结果：LPS入血可以明显引起大鼠肺组织的NF-κB活性1 639.92±198.63（P<0.01），显著高于对照组（593.56±89.34），此作用为预先静脉注入CCK-8部分逆转，NF-κB活性低至823.91±97.32（P<0.01），CCK-8可减轻LPS引起的肺组织病理学变化。结论：CCK-8对LPS激活肺组织NF-κB有抑制作用。     

八肽胆囊收缩素对经钥孔戚血蓝蛋白免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对经钥孔戚血蓝蛋白（KLH）免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法：雌性BALB/c小鼠KLH免疫同时分别给予不同剂量CCK-8。流式细胞法检测小鼠外周血及脾细胞中CD4+、CD8+T细胞阳性百分率；RT-PCR法检测脾细胞中Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-4 mRNA表达；ELISA法检测其培养上清中IFN-γ、IL-4水平；HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果：CCK-8下调KLH免疫小鼠外周血及脾细胞中上升的CD4+、CD8+T细胞阳性百分率，降低CD4+/CD8+比值；进一步提高其IFN-γ mRNA表达和培养上清中IFN-γ分泌量，同时下调上升的IL-4 mRNA表达和培养上清中IL-4分泌量；减轻KLH免疫所致小鼠肺部炎症。结论：CCK-8可调节适应性免疫应答，抑制T细胞尤其是CD4+T细胞活性；抑制Th2功能，提高Th1功能，因此可能在变态反应性疾病的发病和防治中具有一定作用。     

大鼠视网膜发育过程中细胞增殖与凋亡的形态学

目的:观察视网膜发育过程中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化及细胞凋亡状态。方法:14~20 d胎鼠(E14-20 d)、生后0~15 d幼鼠(P0-15)及成年鼠(P36),取出眼球组织,免疫组织化学显色及原位末端标记(TUNEL)观察PCNA的表达和细胞凋亡变化。结果:发育早期E14~P7,可观察到有较强PCNA阳性表达,P9时PCNA阳性细胞数目明显减少,P15开始未见明显PCNA阳性表达。E18可观察到凋亡细胞,随着发育的进行,凋亡细胞逐渐增多,P7时凋亡细胞数目最多,之后又逐渐减少,成熟的视网膜组织内未见明显凋亡细胞。结论:在视网膜神经细胞发育过程中,细胞的增殖和凋亡呈现了有序的动态变化,正是这种有序的增殖和凋亡的平衡才使视网膜最终发育成了正常的组织结构及功能。     

不同时程应激对大鼠下丘脑弓状核和室周核神经细胞的影响

目的:观察不同时程应激对大鼠下丘脑弓状核和室周核神经细胞的影响及酪氨酸羟化酶(TH)的表达变化,为应激性损伤的机制研究提供病理形态学依据。方法:建立每日束缚固定8 h加冰水游泳5 min的应激大鼠模型,分为1、3、7、14、21d组及各时间点正常对照组,采用硫堇染色观察弓状核、室周核内神经细胞尼氏体变化及细胞形态学改变;TH免疫组织化学标记观察大鼠下丘脑弓状核和室周核内多巴胺能神经细胞阳性表达变化,采用全景组织细胞定量分析系统,进行统计分析。结果:较长时程反复的应激刺激导致了大鼠弓状核和室周核神经细胞细胞质内尼氏体消失及部分细胞固缩。TH免疫组织化学标记显示随着应激时程的延长,下丘脑弓状核和室周核内多巴胺能神经细胞阳性表达数目减少。结论:较长时程的反复应激刺激可导致大鼠下丘脑弓状核和室周核神经细胞损伤及多巴胺能神经细胞缺失。     

CCK-8对LPS诱导树突状细胞成熟的影响

目的: 观察八肽胆囊收缩素(CCK-8)对脂多糖(LPS)诱导树突状细胞(DCs)成熟的影响。方法: 采用粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导法培养小鼠骨髓来源DCs,在LPS诱导其成熟过程中用不同浓度的CCK-8进行干预,采用流式细胞分析技术检测DCs表面主要组织相容性复合物II(MHC II)、分化群80(CD80)和分化群86(CD86)的表达;ELISA法检测DCs培养上清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;MTT法检测CCK-8处理DCs对同种异体T细胞增殖反应的影响。结果: CCK-8剂量依赖性地抑制LPS诱导DCs表面CD80、CD86和MHC II表达(P<0.01, P<0.05 );CCK-8抑制LPS诱导DCs分泌IL-1β、IL-6和TNF-α(P<0.01);并且,CCK-8降低LPS诱导DCs刺激同种异体T淋巴细胞增殖的活性(P<0.05,P<0.01)。结论: CCK-8对LPS诱导DCs成熟过程中的细胞表型、细胞因子分泌和抗原提呈功能有抑制作用,提示CCK-8有可能在抗感染和抵抗自身免疫性疾病过程中发挥重要调节作用。     

河北汉族人群D1S8位点DNA结构多态性

目的 研究小卫星变异重复序列（ｍｉｎｉｓｔａｅｌｌｉｔｅ ｖａｒｉａｎｔ ｅｒｐｅａｔ,ＭＶＲ）位点Ｄ１Ｓ８的结构多态性,为ＤＮＡ指纹数据库的构建及法医学应用提供基础资料。方法 应用ＭＶＲ－聚合酶链反应和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法,检测２４０名河北汉族针关个体Ｄ１Ｓ８位点重复序列的变异并进行数字编码。结果 每一个体得到约３０个数字编码,未发现任何两个无关个体编码相同,３０个编码完全相同的概率为３     

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导RAW264.7细胞IL-1β、IL-6、IL-10表达的影响

目的 研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW 264.7细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6及抗炎性细胞因子IL-10的动态变化规律及八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK.-8)对其表达的影响.方法 LPS诱导RAW 264.7细胞不同时间(0、...     

八肽胆囊收缩素通过p38MAPK通路抑制LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达

目的研究八肽胆囊收缩素(CCK-8)对LPS诱导RAW264.7细胞IL-1β表达的影响及相关机制。方法用ELISA及RT-PCR法检测RAW264.7细胞IL-1βmRNA及蛋白表达;用Western blot检测RAW264.7细胞p38 MAPK的磷酸化水平。结果①LPS可时间依赖性的诱导RAW264.7细胞IL-1βmRNA及蛋白的表达,分别于刺激后3 h及6 h达到高峰;②10-10 mol.L-1 CCK-8对LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达无影响;10-8、10-6 mol.L-1CCK-8浓度依赖性地抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达;③10-10 mol.L-1 CCK-8未影响LPS诱导的p-p38MAPK水平,10-8、10-6 mol.L-1 CCK-8浓度依赖性地抑制了LPS诱导的p-p38 MAPK水平;④p38 MAPK特异性抑制剂SB203580可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达,与CCK-8共同作用后,抑制作用进一步加强。结论 CCK-8通过抑制p38 MAPK磷酸化而抑制了LPS诱导的RAW264.7细胞IL-1β表达,这可能是CCK-8发挥抗炎作用的信号转导机制之一。