维甲酸诱导多种肿瘤细胞凋亡相关基因克隆的研究

目的应用基于聚合酶链式反应(PCR)技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤凋亡相关基因,验证维甲酸调控生物细胞增殖、分化,诱导多种肿瘤细胞凋亡的作用。方法以全反式维甲酸(all-transretinoicacid)诱导前列腺癌DU-145细胞、早幼粒白血病HL-60细胞和乳腺腺癌MCF-7细胞产生凋亡,在此基础上,采用基于PCR技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤细胞凋亡相关基因。结果在维甲酸诱导前列腺癌DU-145细胞、早幼粒白血病HL-60细胞和乳腺腺癌MCF-7细胞产生凋亡过程中,有TNF、泛素、热休克蛋白和C-erbB-2基因参与,并成功克隆出多条可能与凋亡密切相关的未知基因,均被GenBank收录,登录号为AF174394,AF144056,AF141882。结论这种基于PCR技术的改良消减杂交方法对于差异表达基因的克隆是十分有效的。     

烟的危害不仅限于吸烟

2010年4月7日出版的《临床医师肿瘤杂志》（CA Cancer J Clin）上刊载了一篇题为“吸烟与人乳头状瘤病毒核酸载量的增加相关”的文章。我们对该论文进行研读后,就二手烟、三手烟可能也与人乳头状瘤病毒核酸载量的增加相关提出见解,得到编辑认可。我们撰写的Letter于2010年7月9日刊登在《CA Cancer J Clin》上。     

BMP2在成釉细胞瘤中的表达及成熟肽片断的基因克隆

成釉细胞瘤是较常见的一种牙源性的肿瘤 ,目前普遍认为其来源于胚胎发育时期的成釉器 ,肿瘤性的成釉上皮过度增生且失去其诱导硬组织形成的活性。骨形成蛋白 (ｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ,ＢＭＰ)在牙胚成釉器中有较高表达并诱导间充质细胞向成釉上皮分化 ,是牙釉质和牙本质形成过程中的重要因素之一。我们检测了成釉细胞瘤中的ＢＭＰ的表达及作用 ,研究成釉细胞瘤丧失其成骨性的病理发生机制。一、材料和方法1 标本来源 :16例标本来源于第四军医大学口腔医学院手术切除标本。取有ＢＭＰ表达和ＢＭＰ2ｍＲＮＡ扩增的 …     

改良消减杂交法在多种肿瘤细胞凋亡相关基因克隆中的应用

目的　应用基于聚合酶链反应 (PCR)技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤凋亡相关基因。方法　以全反式维甲酸 (ATRA ,1× 10 -5mol/L)诱导前列腺癌DU 14 5细胞、早幼粒白血病HL 6 0细胞和乳腺腺癌MCF 7细胞产生凋亡 ,在此基础上 ,采用基于PCR技术的改良消减杂交方法克隆肿瘤细胞凋亡相关基因。结果　在维甲酸 ( 1× 10 -5mol/L)诱导前列腺癌DU 14 5细胞、早幼粒白血病HL 6 0细胞和乳腺腺癌MCF 7细胞产生凋亡过程中 ,有肿瘤坏死因子、泛素、热休克蛋白和C erbB 2基因参与 ,并成功克隆出 3条可能与凋亡密切相关的未知基因 ,均被GenBank收录 ,登录号为AF174394、AF14 4 0 5 6、AF14 1882。结论　这种基于PCR技术的改良消减杂交方法对于差异表达基因的克隆是十分有效的。     

Apr-1基因对胆管癌细胞QBC939细胞周期基因表达的影响

目的探讨Apr-1基因调控QBC939胆管癌细胞周期的机制。方法运用脂质体介导法将Apr-1基因转染胆管癌细胞系QBC939,建立稳定表达Apr-1基因的细胞模型(QBC939-Apr-1)。采用细胞周期基因芯片,观察转染Apr-1基因前后胆管癌细胞细胞周期相关基因表达的变化。结果转染Apr-1基因的QBC939-Apr-1细胞出现Apr-1 mRNA的表达,成功建立了稳定表达Apr-1基因的细胞模型。基因芯片检测结果发现:Skp2及UBE基因的表达水平明显上调,而CDC6,Cyclin H等25种基因的表达下降,其中MRE11A,CKS2,CDK8及CDC45等下调在3倍以上。结论过表达的Apr-1基因可诱导QBC939细胞多种细胞周期相关基因表达发生变化,为深入认识Apr-1基因参与调节细胞周期的机制提供了新的思路。     

hsMAD2基因及Nocodazole对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响

目的观察hsMAD2过表达以及联合Nocodazole处理对HepG2细胞的生长和细胞周期的影响。方法将人全长hsMAD2基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HepG2细胞，经G418筛选期获得转基因癌细胞克隆，采用免疫细胞化学法、Western blot方法检测hsMAD2的表达情况。观察细胞形态、测量生长曲线和分裂指数曲线，观察hsMAD2基因对HepG2细胞生长和细胞增殖能力的影响，流式细胞仪检测HepG2细胞周期的变化。然后观察在纺锤体阻滞剂50nmol/L Nocodazole作用下，hsMAD2对HepG2细胞的影响。结果稳定表达外源性hsMAD2蛋白的HepG2细胞生长速度和细胞增殖能力并无变化；流式细胞仪检测结果显示HepG2-hsMAD2细胞周期G2、S期比例增加，而G1期细胞比例下降，但差异无显著性。经过nocodazole处理后，HepG2-hsMAD2细胞生长速度下降，差异具有显著性，细胞周期出现G2期阻滞。相反。HepG2在受到Nocodazole处理后无明显变化。结论单纯过表达外源性hsMAD2对细胞无影响。由于hsMAD2蛋白发挥了细胞周期关卡作用，使受到Nocodazole破坏作用的细胞出现细胞周期的阻滞。     

凋亡抑制基因Survivin在人肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨凋亡抑制基因Survivin在人肝癌 (HCC)中的表达及其临床意义。　方法 :应用SABC免疫组化染色技术和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测 95例HCC及其癌旁组织、8例非肝癌肝组织Survivin蛋白以及 8例HCC组织SurvivinmRNA的表达 ,分析其与病理分级、临床分期和肿瘤大小等临床指标之间的关系。　结果 :HCC组织中Survivin基因蛋白表达率显著高于癌旁组织和非肝癌肝组织 (5 9.77%vs 2 6 .0 0 %和 5 9.77%vs0 .0 0 % ,P <0 .0 1) ;HCC组织中SurvivinmRNA表达阳性率显著高于癌旁组织 (37.5 %vs 0 .0 0 % ,P <0 .0 1) ;Sur vivin蛋白表达与肝癌组织学分级、临床分期、肿瘤大小无相关关系。　结论 :Survivin基因在HCC组织表达上调 ,提示该基因参与了HCC的发生过程 ;Survivin基因表达与组织分化程度无关 ,提示其可能成为HCC特异性诊断指标或基因治疗的新靶点。     

交通事故致颈椎损伤的有关分析

目的 分析交通事故所致的颈椎损伤的基本特点。方法 回顾性分析我科收治的181例交通事故致颈椎损伤的I临床资料，其中上颈椎66例（36．5％），下颈椎115例（63．5％）。168例（93％）合并多发伤，以颅脑及胸伤多见。结果 本组总死亡率为3．3％。车撞人时，颈椎损伤发生率明显低于其他事故；行人的发生率低于驾乘人员，驾驶员的发生率则低于20％。结论 对交通事故致颈椎损伤的普遍性、复杂性及其不良预后应受得重视。     

中药精制颗粒饮片研制开发的市场调查报告

在国际上,日本、韩国等在70年代就开展了中药精制颗粒饮片的研究,取得了明显的效益,而国内在这方面研究相对处于落后状况,亟待解决的问题不少。但可喜的是江苏天江制药厂、广东一方制药厂等已生产300种以上的品种上市试销,正在或准备新上该项目的厂家也不少。为了有助于国内中药精制饮片的研制开发与推广应用,防止过热发展或低水平的重复开发,故立题开展中药精制颗粒饮片的市场调查,内容报道如下。 1 问卷调查 本次调查问卷特请市场调研公司协助设计,主要通过在医院拦截访问,座谈会,对医生、药剂、管理、销售人员进行访问,收集患者及专…