肾综合征出血热研究的现状与未来

肾综合征出血热研究的现状与未来杨为松黄长形肾综合征出血热（ＨｅｍｏｒｈａｇｉｃＦｅｖｅｒｗｉｔｈＲｅｎａｌＳｙｎｄｒｏｍｅ）是一组以发热、出血和肾损害为主要临床表现的急性传染病，它的病原体是汉坦病毒（Ｈａｎｔａｖｉｒｕｓ）。１９９３年在美国发生的由汉...     

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA套式-实时荧光定量聚合酶链反应的建立

目的 建立检测HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)的套式一实时荧光定量PCR法.方法 根据HBV cccDNA与松环DNA(rcDNA)结构上的差异,设计2对跨缺口的特异引物及1条位于负链缺口下游的特异TaqMan荧光探针.根据Plasmid-SafeTM ATP-Dependent Dnasc(PSAD)对rcDNA与cccDNA作用的不同,对模板DNA进行酶切纯化,降解reDNA,再进行套式PCR扩增,先用外引物和模板进行第一轮常规PCR,再用内引物、荧光探针和第一轮PCR产物进行实时荧光定量PCR,根据阳性参照标准品,得出待检标本定量值.结果 检测阳性参照标准品.得出该方法灵敏度可达2 lg拷贝/mL.用上述方法检测34份乙型肝炎患者血清HBV DNA阳性标本,25份血清HBVcccDNA阳性,28份外周血单个核细胞HBV cccDNA阳性.27份健康对照者血清HBV DNA阴性标本,6份HBV cccDNA阳性.对5份HBV cccDNA阳性标本扩增产物进行克隆测序,无碱基缺失、突变.与HBV不同基因型序列(A～G)比较,同源性为90.6%～99.1%,其中,与B、C基因型同源性为95.3%～99.1%,验证了方法的特异度.结论 套式-实时定量PCR法可检测乙型肝炎患者血清、PBMC中的HBV CCCDNA,且具有敏感、特异性.     

亚急性重型肝炎为首发症状的自身免疫性肝炎2例

一 、临床病例： 病例1，女，13岁，因“乏力、纳差1月余，伴眼黄20d、 烦躁1 d”入院。患者1个月前无明显诱因出现乏力、纳差，20d 前出现眼黄，就诊于当地医院，按“急黄肝”给予保肝、退黄 等治疗，症状无明显缓解。1 d 前患儿乏力加重，伴周身不适、 烦躁不能入睡，收入我院。患者有类风湿性关节炎家族史，否 认肝炎家族史、输血史和损肝药物应用史。查体：烦躁不安，计 算力、定向力下降，皮肤巩膜重度黄染。实验室检查：血常规     

应用RNA聚合酶Ⅰ反向遗传操作技术拯救汉滩病毒84FLi株微基因组

目的 建立基于汉滩病毒(HTNV)84FLi株L片段的RNA聚合酶Ⅰ微基因组拯救体系.方法 将含有氯霉素乙酰转移酶(CAT)编码区的cDNA插入含有HTNV 84FLi株L片段5'端和3'端非编码区的质粒内的两个非编码区之间,将此eDNA嵌合体(polⅠ表达盒)克隆人人polⅠ肩动子和终止子之间,分别获得正义和反义方向的RNA polⅠ转录报告质粒.用报告质粒转染293T细胞或等量293T和HTNV感染的Vero混合培养细胞,在HTNV的L蛋白和核衣壳蛋白表达质粒共转染后48 h收获细胞,检测CAT活性.用上清液感染293T细胞,了解CAT活性的传代能力.结果 构建了正义和反义方向的HTNV 84FLi株L片段微基因组RNA聚合酶Ⅰ报告质粒pLvRNA-CAT和pLcRNA-CAT,用此质粒转染细胞后能检测到CAT的表达,且CAT活性能在拯救病毒微基因组中传代.结论 应用RNA聚合酶Ⅰ反向遗传操作技术成功拯救了HTNV 84FLi株微基冈组.     

肝硬化患者腹水中细菌DNA的检测及临床意义

目的 利用PCR测序方法检测肝硬化患者腹水中的细菌DNA，探讨肝硬化患者发生细菌移位的高危因素及其后果。方法 在细菌16SrRNA基因保守区设计一对通用引物，对37份肝硬化患者腹水标本进行扩增，腹水中细菌DNA阳性者纯化后经核苷酸测序鉴别细菌种类；同时对患者的临床症状及实验室检查结果进行统计分析。结果 37份腹水标本中有9份获得530bp细菌DNA片段，占24．3％。测序共检测出4种细菌，其中大肠埃希菌6例，表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、阴沟肠杆菌各1例；统计分析表明，腹水中细菌DNA阳性和阴性两组肝硬化患者在Child-Pugh积分（12．3±0．8，10．9±1．2）、上消化道出血的发生率（3例，1例）、血清TBil水平[（395．5±216．6）μmol／L，（192．7±206．3）μmol／L]、凝血酶原活动度[（31．3±9．7）％，（50．4±15．1）％]、腹水总蛋白浓度[（4．1±2．8）g／L，（7．9±5．2）g／L]、外周血WBC总数[（12．3±7．5）×10^9／L，（5．3±4．1）×10^9／L]等方面比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 PCR测序方法可应用于肝硬化患者腹水中细菌DNA的检测及细菌移位的研究；肝功能损害、腹水调理活性低下和上消化道出血是肝硬化患者发生细菌移位的高危因素和后果。     

慢性乙型肝炎患者发生血清HBeAg阴转影响因素分析

目的 探索慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者发生血清HBeAg阴转的影响因素，为CHB有效治疗提供依据。方法 在空军军医大学第二附属医院传染科门诊收集HBeAg阳性CHB患者，建立观察随访队列，定期随访和检测实验室检查指标，分析HBeAg阳性CHB患者随访期间血清HBeAg变化情况，根据患者血清HBeAg是否发生阴转将研究对象分为病例组（血清HBeAg阴转）和对照组（血清HBeAg未阴转），分析比较两组患者基线资料特点，并采用Cox单因素及多因素回归分析血清HBeAg阴转的影响因素。结果 共纳入HBeAg阳性CHB患者634例，共累计随访2 570.01人年，其中发生血清HBeAg阴转237例，平均随访时间为40.92月，血清HBeAg阴转率为9.22/100人年。血清HBeAg阴转组与血清HBeAg未阴转组在HBV家族史、抗病毒治疗、基线WBC、PLT、ALT、AST、T-Bil、GGT、AFP、HBsAg定量、HBeAg定量等指标差异有统计学意义（P<0.05）。Cox回归结果提示HBV家族史（HR=0.68,95%CI:0.50～0.92,P...     

肝细胞原代培养的常用添加物

随着肝细胞在生化研究、药代动力学研究、毒理学研究、人工肝支持系统及肝细胞移植方面越来越广泛的应用,如何获得完好无损的肝细胞及长期、稳定地培养活力和功能均良好的肝细胞,是首先要解决的问题。本文就肝细胞原代培养的常用添加物作了综述。     

肝硬化合并毛细血管渗漏综合征、甲状腺功能减退性肌病1例报告

<正>1病例资料患者男性,79岁,因"乏力、纳差1个月余,腹胀2周"于2018年9月27日入本院。查体:血压110/70 mm Hg,神志清,精神差,全身皮肤巩膜无黄染,未见蜘蛛痣、肝掌,心肺查体无明显异常,腹部膨隆,腹围103 cm,腹部无压痛及反跳痛,肝脾肋下未触及,肝肾区叩痛阴性,移动性浊音阳性,双下肢中度凹陷性水肿。既往史:确诊冠状动脉粥样硬化性心脏病1个月,服用     

IL-21与疾病关系的研究进展

白细胞介素21(IL-21)是2000年被发现的细胞因子,作为IL-2细胞因子家族的新成员,参与多种免疫学功能,参与固有免疫应答和适应性免疫应答。IL-21具有多效性,与其受体结合后不仅可以促进淋巴样细胞的增殖,增强CD8+T细胞和自然杀伤细胞的细胞毒作用,还可诱导B细胞分化为浆细胞,促进CD4+T细胞向Th17分化。IL-21与多种疾病的发展也密切相关。本综述旨在介绍IL-21的生物学特性基础上,重点阐述它与疾病的关系的研究进展。