汉滩病毒S基因在Vero-E6细胞中的分段表达

目的　体外研究汉滩病毒 (HTNV)S基因及其 5’端、3’端表达的意义 ,为核蛋白T细胞表位的研究奠定基础。方法　设计 2套引物 ,用PCR方法从PBV2 2 0 -S2 2原核质粒中扩增出S基因全读码框 (37- 132 6bp)及S基因 5’端 (37-5 0 1bp) ,S基因 3’端 (5 0 2 - 132 6bp)用TA克隆将其克隆入 pcDNA3 1/V5 -His -TOPO载体中 ,成功构建 pcDNA3 1-S及pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C真核表达载体 ,并通过脂质体转染至Vero -E6细胞中 ,进行了瞬时表达。 结果　间接免疫荧光成功检测到 pcDNA3 1-S及pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C在Vero -E6细胞中的表达。 结论　pcDNA3 1-S及 pcDNA3 1-S -N、pcDNA3 1-S -C真核表达载体有较高的转染效率 ,目的基因能在宿主细胞中表达 ,有利于研究HTNV -S基因在T细胞表位研究中的意义。     

微载体粘附培养的肝细胞腹腔内移植治疗急性肝功能衰竭大鼠的实验研究

目的　评价微载体粘附培养的肝细胞腹腔内移植对D 氨基半乳糖盐酸盐诱导的大鼠急性肝功能衰竭的治疗作用。方法　胶原酶灌注分离大鼠肝细胞 ,行Cytodex 3粘附培养 ,移植 1× 10 7个微载体粘附肝细胞至D 氨基半乳糖盐酸盐诱导的急性肝功能衰竭大鼠腹腔内 ,比较各组间生存率、肝功能及肝脏病理改变情况以评估疗效。结果　微载体移植组大鼠存活率明显高于空载体组 ,移植 5d后两组比较差异显著 (P <0 .0 5 ) ;空载体组大鼠肝功能及肝脏修复明显迟于微载体组。结论　微载体粘附培养的肝细胞腹腔内移植可对急性肝衰竭大鼠提供代谢支持作用 ,提高急性肝衰竭大鼠存活率。     

聚合酶链反应技术用于汉坦病毒的基因分型

应用反转录ＰＣＲ技术对国内外分离的１８株汉坦病毒基因进行了检测，结果１０株血清Ⅰ型病毒仅能用Ⅰ型引物扩增，８株血清Ⅱ型引物扩增，与既往空斑减少中和试验的分型结果完全一致。     

异位妊娠破裂出血误诊为肝硬化腹水2例分析

0　引言　近 2 0 a异位妊娠的发生率令人难以置信地增长 ,临床表现也呈多样化 ,误诊率约在 40 %～ 50 % [1 ] ,现将 2例误诊为肝硬化腹水病例报告如下 .1　病例报告　病例 1 ,女 ,37岁 ,因发现乙肝标志物阳性 1 2a,腹痛腹胀发热 5 d入院 .查体 :T 37℃ ,P 1 0 8次· min-1 ,BP1 3.3/ 7.33k Pa,贫血貌 ,心肺 (- ) ,下腹微膨隆 ,无明显压痛反跳痛 ,腹水征阳性 .外周血 WBC 64× 1 0 9L-1 ,N 0 .80 ,Hb 96g· L-1 ,PL T1 2 8× 1 0 6L-1 ,肝功正常 ,HBs Ag,抗 -HBe,抗 - HBc阳性 .超声检查提示 :肝光点增粗 ,腹水中量 .按肝硬化并腹…     

Study on the Cytotoxic T Lymphocytes Clone Specific for the Nucleocapsid Protein of Hantaan Virus from Peripheral Blood in Patients with Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome

Hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) occursmainly in China with a high mortality rate and threatensthe health and life of population, Hantaan virus (HTNV),the prototype member of Hantavirus (HV) genus, causesHFRS in human. In the structural proteins of HV, the nu cleocapsid protein (NP), is associated with the functionsof viral RNA, and is also an important immunogen involv ing in the protective immune responses against infection.The pathogenesis of Hantaan virus infecti…     

紫外线体表局部照射对健康青年人血t－PA等活性的影响

紫外线体表局部照射对健康青年人血ｔ－ＰＡ等活性的影响丁立新，武志耀，张旭东，黄长形，姚红（唐都医院康复医学科，唐都医院出血热实验室西安７１００３８）关键词紫外线；健康青年人；ｔ－ＰＡ；ＰＡＩ；Ｐｌｍ中图号Ｒ４５４．２紫外线（ＵＶ）体表局部照射可激活血...     

肾综合征出血热患者B淋巴母细胞系的建立方法及意义

目的 :探讨EB病毒 (EBV)转化B淋巴细胞的最佳方法 ,为进一步研究肾综合征出血热 (HFRS)患者的细胞免疫功能奠定基础。　方法 :采用环孢素A(CsA)法、微量全血法和冻存全血法三种方法建立B淋巴母细胞样细胞系 (B LCL) ,比较建立细胞系成功率和所用时间。　结果 :EBV成功转化后的B LCL ,其体积增大并永生化 ,进而增生的淋巴细胞积聚成团。CsA法、微量全血法和冻存全血法转化的成功率分别为 73.3%、2 6 .7%和 4 6 .7%。　结论 :CsA法成功率高 ,建立细胞系所用时间短 ,是建立B LCL的最佳选择。     

Construction and expression of the bicistronic expression vector with RANTES and SDF-1 genes

Objective: To construct bicistronic expression vector with RANTES and SDF-1 genes, the ligands of HIV-1 principal coreceptors, and identify its expression. Methods: RANTES-KDEL was amplified from plasmid pCMV-R-Kby PCR and cloned into eukaryotic expression vector pCMV-S/K. Gene transfection into HeLa cells was carried out by lipofectin. Indirect immumofluorescence and radioimmunoprecipitation were used to confirm the expression of RANTES and SDF-1. Results:The construction of pCMV-R-K-S-K was confirmed by enzymatic digestion and sequencing.RANTES and SDF-1 were shown expressed in HeLa cells by indirect immumofluorescence and radioimmunoprecipitation. Conclusion: pCMV-R-K-S-K was constructed and expressed in cell line Hela successfully, which will contribute to further study of gene therapy of AIDS by HIV-1 coreceptors knockout.