乙型和丙型肝炎病毒双重感染肝组织病毒标志物的检测

为观察乙型肝炎和丙型肝炎双重感染的尸体肝组织中两种病毒核酸及抗原的分布，对１５例ＨＢＶ与ＨＣＶ双重感染的尸检肝组织用免疫组织化学法检测ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ和ＨＣＡｇ，Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的探针原位杂交法分别检测ＨＢＶ ＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ。结果：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＣＡｇ和ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性数分别为１２／１５（８０．０％）、１０／１５（６６．７％）、９／１５（６０     

反向聚合酶链反应检测肝细胞癌中乙型肝炎病毒DNA整合

目的应用反向聚合酶链反应(inverse polymerase chain reaction,IPCR)法检测肝细胞癌(HCC)中乙型肝炎病毒(HBV)DNA整合.方法提取手术切除石蜡包埋人肝癌组织中DNA,根据IPCR原理,选用HBV DR1区无酶切位点的限制性内切酶酶切,通过连接反应形成环化DNA分子,以此作为模板进行PCR扩增得到已知序列的旁侧序列.琼脂糖凝胶电泳观察PCR扩增产物片段.结果 19例HCC标本中有14例检出整合型HBV DNA,2例同时存在游离型HBV DNA.结论 IPCR可以准确测定肝细胞中HBV DNA的整合.该方法为研究HBV DNA在肝细胞中的整合机制提供一简单、快速、经济途径.     

Study on Antibodies to Liver Antigens in Chinese Patients with Different Liver Diseases

Autoimmune liver diseases include autoimmune hepatitis(AIH), primary biliary cirrhosis (PBC) and primary scle rosing cholangitis (PSC). The examination of autoimmuneantibodies is important to diagnose these kinds of diseases.But up to the present, due to the limited knowledge of au toantigens and immature method of examination, especiallyof some autoantibodies which are not only present in au toimmune diseases but found in 10% 15% of the patientswith viral hepatitis or other immune…     

原位杂交和免疫组化双标记技术在大鼠全脑脑片培养中的应用

目的探讨联合应用原位杂交(in situ hybridization,ISH)和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)技术检测全脑脑片特定核酸和蛋白的表达。方法在静态全脑脑片培养的基础上,将培养的脑片进行冰冻切片,然后联合应用原位杂交和免疫组化技术检测特定基因的表达情况。结果脑片冰冻切片的质量可以进行后续的实验;与单纯应用一种方法相比,联合应用两种技术可同时在核酸水平和蛋白水平检测待测基因,两种显色方法不相互冲突,且可以更直观地显示核酸和蛋白的表达模式。结论原位杂交和免疫组化双染技术明显优于单纯的原位杂交技术或免疫组化;该双染技术可用于脑片培养中的基因和蛋白检测。     

应用基因工程菌表达的丁型肝炎抗原(HDAg)制备抗-HD酶联免疫试剂及其应用

采用基因工程技术使国外引进的HDAg基因克隆株在大肠杆菌中转化和表达。以这种工程菌提取的HDAg为抗原,建立了检测血清中抗-HD的ELISA试剂,采用竟争法测定。与爱尔兰Noc-tech及美国Abbott两公司的同类试剂盒相比,前者57份血清检测结果,2份阳性和55份阴性全部符合;后者55份血清中2份阳性和53份阴性,亦均完全符合。对本院HBsAg阳性各类型肝炎或携带者血清测定抗-HD的检出率为6.38％(25/392);对国内8省市同类病例检出率为0.69％(5/729)。临床及流行病学调查表明本试剂特异性、敏感性均良好。对菌产HDAg的特性和酶联试剂的特点进行了分析和讨论。     

乙型肝炎治疗性疫苗的研究进展

疫苗按其在传染病防治中的作用可分为预防性疫苗和治疗性疫苗。疫苗的最广泛用途是预防 ,即通过对广大人群的普遍接种或对高危人群的选择性接种 ,达到预防特定传染病的目的。治疗性疫苗主要应用于治疗微生物感染患者。乙型肝炎治疗性疫苗的应用目的是对已经存在ＨＢＶ感染的机体 ,即慢性乙型肝炎或乙肝病毒携带者发挥治疗作用。通过弥补或激发机体免疫反应 ,达到清除病毒的治疗效应。慢性乙型肝炎病毒感染及其所致疾病是危害我国人民健康的主要传染病之一 ,目前尚无有效的药物治疗 ,干扰素被认为是对乙肝病毒感染有效的药物 ,但其疗效仍不十…     

用原位杂交证实检测非甲～非戊型肝炎患者肝组织中存在HGV RNA

应用原位杂交技术以地高辛素标记的ＨＧＶｃＤＮＡ探针，对３６例血清非甲～非戊型肝炎（ＨＮＡ－Ｅ）患者肝组织中ＨＧＶＲＮＡ进行了检测，ＨＧＶＲＮＡ总检出率为３０．６％（１１／３６），其中急性重型肝炎１例，亚急性重型肝炎３例，急性轻型肝炎３例，慢性肝炎４例...     

分子杂交法研究肝炎病人血清和肝组织中输血传播病毒

目的 对各型肝炎病人血清和肝组织中输血传播病毒（TTV）核酸检测分析,探讨病毒的致病性。方法 以地高辛为标记物制备TTV DNA探针,斑点杂交法、原位杂交法分别检测血清中及肝组织中TTV DNA。结果 检测103例血清,TTV总阳性率为25．24％（26／103）;甲－戊型肝炎组检出率21．81％（12／55）、非甲－非庚型患者检出率47．37％（9／19）,显著高于正常对照组15％（3／20）。临床可见TTV的单独感染和重叠感染;出现急性、慢性甚至重度肝损伤。12 肝组织可见TTV阳性,阳性颗粒主要见于肝细胞核内。结论 从血清和肝组织证实了TTV的存在,提示这种病毒可能是导致肝脏炎症的一种新病原。     

采用原位杂交法检测肝组织中的TT病毒

目的：检测肝组织中ＴＴ病毒。并探讨其致病性。方法：采用对称和不对称ＰＣＲ法,以地高辛素分别标记ＴＴＶ双链和单链探针,原位杂交法检测５６例肝组织。结果：５１例非甲￣非庚型肝炎肝组织中ＴＴＶ总检出率２７．５％（１４／５１）;５例非肝炎肝组织杂交阴性。ＴＴＶ ＤＮＡ主要见于肝细胞核内,在急性、慢性及重型肝炎组织中均有检出。双链探针杂交结果与单链探针检测病毒基因链的结果一致,２／６例组织ＴＴＶ基因链与互补链同时存在,结论：ＴＴＶ是导致肝炎的一种新病原,并且在肝脏内有复制。