肝纤维化肝硬化患者肝组织中IGFBP 2，6，7的表达及意义

目的 研究胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)在肝纤维化和肝硬化患者肝组织中的表达、分布和意义.方法 对18例肝纤维化、18例肝硬化患者肝组织和6例对照组(为手术切除的肝血管瘤外的正常肝组织)标本分别进行HE染色、VG染色,以及TGF-β1、TGFRI、胶原纤维、IGFBP-2,-6,-7及CD14的免疫组织化学染色,并将其通过图像分析系统进行半定量分析和相关分析.结果 对照组正常肝组织IGFBP-2,-6,-7的表达表现为极少数肝细胞、中央静脉和胆管上皮细胞有阳性染色,在肝纤维化组和肝硬化组的表达主要见于肝窦内和纤维间隔.并且IGFBP-2,-6,-7在对照组正常肝组织、肝纤维化组和肝硬化组肝组织的表达逐渐增高,组间差异有统计学意义(P＜0.05).定量分析肝组织IGFBP-2,-6,-7的表达分别与肝组织胶原纤维、TGF-β1、TGFRI、CD14的表达呈正相关.结论 IGFBP-2,-6,-7在人肝纤维化的发生发展中可能起重要作用.     

拟康定乌头和林地乌头中二萜生物碱类化学成分研究

目的 对拟康定乌头Aconitum rockii和林地乌头A. nemorum中二萜生物碱类化学成分进行研究。方法 采用硅胶柱色谱对其总生物碱进行分离纯化,通过HR-ESI-MS、IR、1D和2D NMR等波谱技术鉴定化合物的结构。结果 从拟康定乌头中共分离得到了6个化合物,分别鉴定为1α,6α,8β,16β,18-pentamethoxy-14α-benzoyloxy-N-ethylaconitane(1)、工布乌碱（2）、大渡乌碱（3）、膝乌宁碱甲（4）、滇乌碱（5）和黄乌生（6）;从林地乌头中共分离并鉴定了10个化合物,分别为塔拉萨敏（7）、14-乙酰塔拉萨敏（8）、卡马考宁（9）、16-epipyroaconine(10)、乌头碱（11）、3-脱氧乌头碱（12）、牛扁碱（13）、甲基牛扁碱（14）、德尔色明甲（15）、德尔色明乙（16）。结论 化合物1是新的乌头碱型C19-二萜生物碱,命名为拟康定乌碱甲;化合物2～6为首次从拟康定乌头中分离得到,化合物9～16为首次从林地乌头中分离得到。     

维纳托克在肝癌细胞中的抗肿瘤活性及其机制

目的探讨维纳托克(Venetoclax)在HepG2、Hep3B 2个肝癌细胞株的抗癌活性。方法对人肝癌细胞株HepG2、Hep3B细胞株进行体外培养,采用不同浓度的Venetoclax(0、3、10、30μmol/L)处理肝癌细胞,以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性,0,3,10和30μmol/L Venetoclax作用细胞48 h,锥虫蓝拒染法检测细胞的死亡,0,5μmol/L Venetoclax,作用24 h,流式细胞学检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测Venetoclax诱导半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活化,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)裂解。组间比较采用t检验。结果Venetoclax对HepG2、Hep3B细胞株均有较强活性抑制作用。不同浓度的Venetoclax处理肝癌细胞48、72 h,Venetoclax在HepG2细胞株中取得的半数细胞活性抑制率(IC50)值分别为46.5μmol/L和14.2μmol/L;在Hep3B细胞的IC50值分别为24.6μmol/L和11.2μmol/L。处理24 h,30.0μmol/L的Venetoclax在HepG2和Hep3B细胞株中诱导57%[对照组、实验组凋亡率分别为(4.00±1.00)%、(56.67±8.51)%,t=-10.650,P<0.01]和54%[对照组、实验组凋亡率分别为(5.67±1.53)%、(54.33±9.87)%,t=-8.440,P<0.01]的肝癌细胞发生凋亡,并能诱导肝癌细胞的Caspase-3活化,PARP裂解,差异均有统计学意义。用0、3、10和30μmol/L的Venetoclax处理48 h,在HepG2细胞株中可诱导3%(3.26±1.71)%,12%[(12.36±1.99)%,(t=-12.36,P<0.05)],32%[(32.38±4.57)%,(t=-10.350,P<0.01)]和67%[(66.71±6.29)%,(t=-16.86,P<0.01)]的细胞死亡,差异均有统计学意义;在Hep3B细胞株诱导2%(1.91±0.68)%,16%[(15.72±3.40)%,(t=-6.890,P<0.05)],42%[(42.39±6.86)%,(t=-10.180,P<0.01)]和73%[(73.32±2.69)%,t=-44.490,P<0.01]的细胞死亡,差异均有统计学意义。应用半胱氨酸蛋白酶(Caspase)抑制剂预处理,Venetoclax对HepG2和Hep3B细胞的死亡率分别从56%(56.71±6.29)%降低至11%(10.70±1.43)%,(t=12.350,P<0.01)和68%(68.05±10.16)%至12%(12.7±6.12)%,(t=8.080,P<0.01),差异有统计学意义。结论Venetoclax能够通过诱导Caspase的活化,诱导肝癌细胞发生凋亡,并对肝癌细胞进行杀伤。     

未足月胎膜早破孕妇剩余羊水量与母儿结局

目的 探讨未足月胎膜早破(PPROM)发生后剩余羊水量与母儿结局的关系.方法 选择2002年1月-2009年2月重庆医科大学附属第一医院产科住院分娩的PPROM孕妇78例,2005年1月-2009年2月重庆市妇幼保健院产科住院分娩的PPROM孕妇67例,共计145例.根据胎膜破裂后羊水指数(AFI)结果将孕妇分为3组:羊水量正常组(80 mm≤AFI＜180 mm)78例;羊水量偏少组(50 mm≤AFI＜80 mm)31例;羊水量过少组(AFI＜50 mm)36例.观察各组AFI、孕妇发热情况、白细胞计数、发生PPROM的孕周、潜伏期时限、分娩方式、围产期感染、胎儿窘迫、新生儿窒息情况及出生体重、新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)、新牛儿呼吸衰竭、新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)、缺血缺氧性心肌损害等,并对各组的母儿围产期发病情况进行分析.结果 (1)3组孕妇破膜时间、新生儿出生体重、胎盘早剥、白细胞计数、发热等指标分别比较,差异无统计学意义(P＞0.05).羊水量过少组孕妇潜伏期时间明显短于羊水量偏少组及羊水量正常组,分别比较,差异有统计学意义(P＜0.01).羊水量过少组孕妇剖官产率(69%)明显高于羊水量正常组(39%),两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)羊水量过少组羊膜腔感染13例(36%,13/36),羊水量偏少组8例(26%,8/31),羊水量正常组7例(9%,7/78),3组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(3)羊水量过少组新生儿败血症10例(28%,10/36),羊水量偏少组8例(26%,8/31),羊水量正常组7例(9%,7/78),3组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(4)羊水量过少组的胎儿窘迫(19%)、新生儿窜息(28%)、缺血缺氧性心肌损伤发生率(56%)明显高于羊水量正常组(分别为3%、8%、13%),差异均有统计学意义(P＜0.01);3组的NRDS、呼吸衰竭、新生儿HIE、新生儿黄疸、新生儿低血糖、新生儿脑室出血发生率分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(5)以羊膜腔感染为应变量,logistic回归分析显示,PPROM剩余羊水量过少为羊膜腔感染的惟一有效自变量(r=0.863±0.374,P＜0.05);以新生儿病率为应变量,logistic回归分析显示,PPROM剩余羊水量过少是新生儿败血症的惟一有效白变量(γ=0.874±0.462,P＜0.05).结论 PPROM后的剩余羊水量过少与潜伏期缩短,剖官产率升高、羊膜腔感染、胎儿窘迫、新生儿窒息、新生儿败血症、新生儿缺氧缺血性心肌损害的增加有关;PPROM后剩余羊水量的多少可作为期待治疗时有效预测母儿结局的指标.     

脂肪间充质干细胞移植提升脊髓损伤小鼠血小板反应蛋白4表达促进运动功能恢复

目的:评估脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)移植对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)小鼠血小板反应蛋白4(thrombospondin-4,Thbs-4)表达水平的影响,及ADSCs修复SCI的作用。方法:制备小鼠T10 SCI模型,随机分为假手术组、模型组、ADSCs移植组,每组30只。取同种系转绿色荧光基因小鼠皮下脂肪组织,分离培养ADSCs。损伤后即刻移植106个细胞至ADSCs移植组小鼠脊髓内,模型组注射同等剂量PBS。术前及术后每周进行运动功能BBB评分;采用免疫荧光法检测移植细胞存活、炎症反应情况;采用Western Blot法检测移植术后第7 d各组动物脊髓组织Thbs-4蛋白表达水平;采用ELISA法检测术后第3、14 d各组动物脊髓组织TNF-α浓度。结果:ADSCs移植后可在宿主体内存活至少2周。移植术后第7 d,Thbs-4在假手术组表达水平最低,模型组次之,在ADSCs移植组表达水平最高(P0.05);ADSCs移植下调SCI后TNF-α浓度;移植术后第14 d,ADSCs移植组ED-1+炎症细胞数量显著少于模型组(P0.05);运动功能评分结果显示从第2周起,ADSCs移植组小鼠显著优于模型组(P0.05)。结论:ADSCs移植促进SCI小鼠运动功能恢复,其机制与提升Thbs-4蛋白表达水平,减轻受损脊髓组织炎症反应增生有关。     

白鲜碱通过Wnt/β-catenin信号通路抑制前列腺癌骨转移PC-3细胞的作用

目的 探讨白鲜碱对人前列腺癌细胞上皮-间充质转化的抑制作用及其机制.方法 培养人前列腺癌PC-3细胞,用白鲜碱处理PC-3细胞,通过MTS检测白鲜碱的半抑制浓度IC50及对PC-3细胞增殖的时间依赖性.细胞侵袭能力的检测采用Transwell实验;E-cadherin、vimentin、β-catenin和Snail蛋...     

尿液足细胞标志蛋白水平联合血清炎症因子对糖尿病肾病合并高尿酸血症的诊断价值

目的:探讨尿液足细胞标志蛋白(podocalyxin,PCX)联合血清炎症因子在糖尿病肾病合并高尿酸血症诊断中的应用价值.方法:选取106例糖尿病肾病病人,根据是否合并高尿酸血症,分为糖尿病肾病组(52例)和糖尿病肾病合并高尿酸血症组(54例),在相同的条件下检测并分析比较2组病人尿液PCX水平以及血清中C反应蛋白(C...     

四逆汤组成药物不同配伍对Lewis肺癌小鼠血清血管内皮生长因子表达的影响

目的研究温阳法代表方四逆汤及其组成药物不同配伍,对Lewis肺癌小鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,及其抗肿瘤复发转移作用。方法采用正交设计确定四逆汤中附子、干姜、炙甘草的不同配伍,共分为17组,C57BL/6小鼠102只,按正交表分为17组,每组6只,Lewis肺癌小鼠模型制备的次日起,各组小鼠每天进行灌胃给药60 mg/kg。第15天脱颈椎处死各组小鼠。瘤组织称重,计算抑瘤率。观察瘤组织病理变化,计数肺表面转移瘤结节数。用双抗体夹心ELISA法检测血清VEGF变化。结果四逆汤对小鼠Lewis肺癌的瘤重有不同程度的影响。第4、6、7、10组小鼠瘤重、瘤重指数明显低于对照组(第1组,P<0.05)和完整方组(第17组,P<0.05),尤以第10组最明显(P<0.01)。就抑瘤率来说,第4、6、7、10组的抑瘤率也是各药物组中最高的。第5、7、11、16组在转移瘤结节数量上与第1组比较有统计学意义(P<0.05),其中第7、11、16组的转移瘤结节数量少于第1组;在血清VEGF的表达上,第2、3、6、7、10、11、12、13、14、16、17组与第1组比较有显著差异(P<0.01)。结论四逆汤中附子、干姜、炙甘草均具有抑制Lewis肺癌小鼠细胞增殖的作用,其配伍以3∶1∶6的比例对Lewis肺癌小鼠细胞增殖抑制最明显。     

萍蓬草属植物中生物碱成分和药理作用研究进展

萍蓬草属Nuphar Smith. 植物广泛分布于亚洲、欧洲及美洲大陆,其主要药效成分为倍半萜类生物碱,具有抑制肿瘤转移、免疫抑制、抗炎、抗菌等多种药理作用。综述萍蓬草属植物生物碱成分和药理作用的研究进展,为深入研究萍蓬草属植物药用价值,发掘其药用潜力提供参考。