两种不同免疫抑制剂方案对肾移植术后感染及排异的影响

目的:观察两种不同免疫抑制剂方案对肾移植术后感染及排异的影响。方法:将150例肾移植术后患者分成两组,即2001年以前手术的96例为环孢素(CsA)组,免疫抑制剂为CsA加泼尼松(Pred)加硫唑嘌呤(Aza),CsA初始用量为6~8mg/(kg.d);2002~2004年1月手术的54例为FK506组,免疫抑制剂为FK506加Pred加骁悉(MMF)FK506初始用量为0.1~0.2mg/(kg.d),以后根据血药浓度进行调整。结果:150例肾移植术后患者,随访2个月~6年,总的感染率为20.7%,排异率18.1%;其中CsA组感染率为26.0%(25/96),5例死亡,排异逆转率为91.7%(22/24);FK506组感染率为11.1%(6/54),无死亡病例,排异逆转率为100.0%(7/7)。两者之间感染率差异有显著意义(P<0.05)。结论:用FK506+MMF代替CsA与Aza可以显著减少肾移植术后的感染率,降低排斥反应,并提高移植肾成活率。     

雄激素受体反义RNA抑制前列腺癌细胞对激素的增殖反应

目的　观察前列腺癌细胞LNCaP整合雄激素受体 (AR)反义RNA后对雄激素、雌激素和孕激素的增殖反应性变化。　方法　分别用含不同浓度雄激素、雌激素和孕激素的培养基培养前列腺癌细胞LNCaP、LNCaPas AR(基因组DNA中整合了AR反义RNA逆转录病毒载体的LNCaP细胞 )和LNCaPNeo(基因组DNA中整合了空逆转录病毒载体的LNCaP细胞 ) ,观察其生长情况 ,台盼蓝染色并细胞计数。　结果　在 1nmol/L合成雄激素R1881、10nmol/L 17β 雌二醇或 1nmol/L孕酮作用下 ,LNCa Pas AR细胞计数分别为 (2 .6± 0 .2 )× 10 5、(2 .6± 0 .2 )× 10 5、(2 .5± 0 .1)× 10 5/ml,与LNCaPNeo和LNCaP相比 ,生长显著受抑制 (P <0 .0 5 ) ,LNCaPNeo与LNCaP细胞增殖差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。显微镜下见LNCaP和LNCaPNeo细胞生长状态良好 ,而LNCaPas AR细胞稀疏且有较多细胞死亡。　结论　AR反义RNA可改变前列腺癌细胞LNCaP的雄激素非依赖性特征 ,可同时抑制其对雄激素、雌激素及孕激素的增殖反应。     

人睾丸精原细胞的分离和纯化

目的探讨人睾丸精原细胞的分离纯化.方法用联合二步酶消化法获得人生殖细胞悬液,经Percoll不连续密度梯度离心,再用差异粘附法纯化得到成活率较好、含量较高的人精原细胞.结果所获得睾丸组织细胞悬液内活细胞、死细胞平均所占百分比分别为89.71%、10.29%.Percoll不连续密度梯度中,细胞主要在相邻梯度的界面处形成细胞带,其中精原细胞主要分布于27%～35%Percoll梯度间,根据细胞体外培养时的形态学特征等进行判断和分析,经纯化后精原细胞的纯度达到60.42%.结论应用联合酶消化法、Percoll不连续密度梯度离心和差异粘附等方法可以有效地对人精原细胞进行分离和纯化.     

雄激素受体反义RNA逆转录病毒载体的构建及其鉴定

目的　构建雄激素受体 (AR)反义RNA逆转录病毒载体pL AR SN并进行包装和鉴定。方法　PCR扩增ARcDNA片段并将之反向插入到逆转录病毒载体pLXSN ,用脂质体法转染PA31 7细胞 ,提取转染细胞基因组DNA和培养上清中重组逆转录病毒RNA ,用PCR和RT PCR法进行鉴定 ,NIH 3T3细胞测定病毒滴度。结果　限制性内切酶分析证明pL AR SN含有反向插入的ARcDNA目的片段 ;培养上清中病毒滴度为 2 .34× 1 0 5 CFU/ml,PCR和RT PCR分别从转染细胞基因组DNA和培养上清中的重组逆转录病毒RNA中扩增出了插入的目的片段。结论　成功构建了AR反义RNA逆转录病毒载体并包装出了高滴度的重组逆转录病毒。     

胃粘膜癌变过程中bcl-2、p53和Rb基因的表达

目的 研究胃粘膜癌变过程中ｂｃ１－２、ｐ＾５３和Ｒｂ的基因的表达及意义。方法 采用免疫组化方法对５０例胃癌,１８例癌旁肠化生,７例癌旁轻中度异型增生及９例重度异型增生组织中ｂｃ１－２、ｐ＾５３和Ｒｂ基因表达情况进行检测和比较。结果 正常胃粘膜上皮增殖带干细胞区ｂｃ１－２蛋白呈弱阳性表达,异性增生病变中,ｂｃｌ－２蛋白表达率和表达强度明显大于肠化生病变和正常胃粘膜上皮（Ｐ〈０．０５）,胃癌组织中表达     

移植肾慢性排斥反应与血小板衍化生长因子及胰岛素样生长因子表达的关系

目的 :探讨慢性排斥反应移植体动脉硬化与血小板衍化生长因子 A(PDGF A)链、胰岛素样生长因子 1(IGF 1)表达的关系。　 方法 :采用免疫组化S P法研究 2 2 2只大鼠的移植动脉 ,用RIA法及S P法研究 2 0例慢性排斥反应移植肾组织及动脉中PDGF A、IGF 1的表达。　 结果 :实验组 :术后 3天 ,PDGF A、IGF 1在大鼠移植动脉壁各层出现阳性表达 ;术后 7天 ,PDGF A在动脉壁各层表达为最高峰 ,IGF 1术后 2 1天达最高峰 ;术后 2 1天 ,内膜明显增生 ,面积比为 (2 6 4± 3 12 ) %。临床组 :移植肾动脉PDGF A表达主要集中在内膜 ,其次为外膜 ,中层较少 ,IGF 1在肾动脉血管壁全层中均呈阳性表达 ;而在肾组织中PDGF A与IGF 1的表达均主要集中在远曲小管、远直小管上皮细胞及肾小球毛细血管上皮细胞。　 结论 :移植体动脉硬化过程中 ,细胞增生、内膜增厚、血管及肾组织纤维化与PDGF A、IGF 1表达关系密切。慢性排斥反应的移植肾动脉及肾组织中PDGF A、IGF 1呈高表达 ,且与术后早期排斥反应的发生频率及程度等因素密切相关。     

慢性排斥移植体动脉硬化与C—myc表达

移植体动脉硬化是大器官移植慢性排斥反应三大病理学特征之一[1] 。目前 ,在移植体动脉硬化过程中细胞增生ＤＮＡ复制与ＰＣＮＡ的表达研究已有报道[2 ] 。但是在移植体动脉硬化中Ｃ ｍｙｃ表达以及Ｃ ｍｙｃ与ＰＣＮＡ表达、细胞凋亡两者之间有何关系 ,尚缺乏了解。我们在建立慢性排斥反应动脉模型基础上 ,对移植体动脉硬化与Ｃ -ｍｙｃ表达作了观察 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　实验分组　雄性Ｗｉｓｔａｒ及ＳＤ大鼠共 165只 ,重 12 0～ 2 0 0ｇ ,购于第三军医大学大坪医院动物研究中心及华西医科大学动物实验中心。实验分两组 :异系…     

肾移植术后巨细胞病毒性肺炎的诊断与治疗

肺部感染是肾移植术后最主要的感染并发症 ,也是造成肾移植受者死亡的主要原因之一 ,而在移植受者肺部感染中又以巨细胞病毒性肺炎 (Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａ ,ＣＭＶ)处理较为棘手 ,是临床工作中的难点。我科自 1997年 1月至 2 0 0 0年 12月共收治重症ＣＭＶ肺炎患者 19例 ,其中 17例救治成功 ,取得较为满意的效果 ,现报告如下。1　资料与方法1.1　一般情况　　 19例患者中 ,男性 14例 ,女性 5例 ,年龄 2 2～ 65岁 ,平均44 3岁。1.2　ＣＭＶ肺炎发生的时间　　发生在肾移植术后 6个月以内者 16例 ,6个月至 1年者…     

表达鼠精子受精素β的减毒沙门菌疫苗株的构建

目的 构建表达鼠精子抗原受精素β亚单位(Fβ)的可口服减毒沙门菌活疫苗株。方法 通过酶切从克隆载体TOP0中获得FβcDNA片段，将其插入表达载体PYA3149中，构建重组质粒pFFL，将该重组质粒转入鼠沙门伤寒杆菌疫苗株X4632，获得重组菌株X4632(pFFL)，行Western blot分析及初步毒性试验。结果 此无抗药性的重组菌株X4632(pFFL)可稳定表达被Fβ抗体识别的重组Fβ蛋白，口服该菌株无明显毒性作用。结论 该疫苗株的构建为研究以Fβ为靶抗原的精子抗原避孕疫苗打下了基础，值得进一步行诱导免疫观察。     

胃粘膜癌变过程中bc1-2、p~(53)和Rb基因的表达

目的　研究胃粘膜癌变过程中bc1- 2、p53 和Rb的基因的表达及意义。方法　采用免疫组化方法对 5 0例胃癌 ,18例癌旁肠化生 ,7例癌旁轻中度异型增生及 9例重度异型增生组织中bc1- 2、p53 和Rb基因表达情况进行检测和比较。结果　正常胃粘膜上皮增殖带干细胞区bc1- 2蛋白呈弱阳性表达 ,异性增生病变中 ,bcl- 2蛋白表达率和表达强度明显大于肠化生病变和正常胃粘膜上皮 (P <0 .0 5 ) ,胃癌组织中表达减少 ,p53 蛋白和Rb蛋白仅在重度异型增生病变和胃癌组织中表达。结论　bcl-2蛋白的表达主要是在胃癌的启动和促进阶段起作用 ,而在已具有恶性表型的细胞中不起关键作用。p53 和Rb基因的改变可能发生在胃粘膜癌变的较后期阶段 ,使胃癌的细胞凋亡受抑。