不同抗排斥治疗方案对肾移植术后巨细胞病毒感染的影响

巨细胞病毒 (ＣＭＶ)感染是肾移植术后患者较常见的感染并发症 ,是造成机体功能严重损害甚至死亡的重要原因[1,2 ] ,因此 ,如何减少肾移植术后患者ＣＭＶ感染的发生 ,是提高肾移植术后患者生存质量的重要手段。本文在排除ＣＭＶ血清学状态对ＣＭＶ感染影响的前提下 ,对我院 1997年 1月～ 2 0 0 0年 12月 35 3例行同种异体肾移植术患者中 167例血清ＣＭＶ抗体阴性受者 (Ｒ )接受ＣＭＶ血清抗体阳性供肾 (Ｄ )ＣＭＶ感染 (即原发性ＣＭＶ感染 )情况进行分析 ,探讨四种常用抗排斥治疗方案对肾移植术后ＣＭＶ感染的影响 ,为更好防治ＣＭＶ感染…     

精子表面蛋白受精素β在精卵结合和融合中的作用研究

为探讨精子表面蛋白受精素β（Fβ）在精－卵结合和融合中的作用。西文应用鼠β单抗,通过体外受精试验观察该单抗预卿育不同浓度精子后,对精－卵结合和融合功能的影响;应用免疫细胞化学方法确定Fβ在精子表面的特异性定位。结果在不同精子浓度下,Fβ单抗均可显著降低体外精－卵的结合和融合能力;可使精－卵结合指数降低34．43％－75．46％,平均56．05％;使精－卵融合的受精指数降低47．68％－56．32％,平均52．18％;受精率下降28．06％－54．32％,平均41．56％。在精子顶体反应前后,Fβ在精子表面均特异性定位于精子头部赤道区域和顶体内膜区域。结论：Fβ在精－卵的结合和融合中均具有重要作用,支持将Fβ蛋白作为精子靶抗原之一用于避孕疫苗的开发研究。     

表达小鼠精子受精素β胞外区减毒沙门菌疫苗株的构建

目的 :构建表达鼠精子抗原受精素 β亚单位 (Fβ)胞外区的可口服减毒沙门菌活疫苗株。　方法 :设计一对引物 ,应用PCR方法获得Fβ 胞外区cDNA片断 ,将其插入表达载体pYA3 14 9中 ,构建重组质粒pFEC ,将该重组质粒转入鼠沙门菌疫苗株X4 63 2 ,获得杂合菌株X4 63 2 (pFEC)。该重组菌口服免疫雌鼠 ,通过ELISA方法检测其诱导雌鼠血清IgG抗体和阴道分泌物IgA抗体滴度变化。　结果 :此疫苗株X4 63 2 (pFEC)可稳定表达被Fβ 抗体识别的重组Fβ 胞外区蛋白 ,口服该菌株不但可激发雌鼠产生高水平血清抗重组Fβ 蛋白IgG抗体 ,而且在阴道分泌物中可出现一定程度抗重组Fβ 蛋白IgA抗体 ,无明显毒性作用。　结论 :X4 63 2 (pFEC)疫苗株的构建为研究以Fβ 为靶抗原的精子抗原避孕疫苗打下了基础。     

雄激素受体反义寡核苷酸对前列腺癌细胞生长的抑制作用

目的　探讨雄激素受体 (AR)反义寡核苷酸 (aODN)对前列腺癌细胞AR表达和生长的抑制作用。　方法　合成 1对AR正、反义寡核苷酸 ,与LNCaP细胞共培养 ,观察LNCaP细胞的增殖情况 ,RT PCR和Westernblot方法检测ARmRNA水平和AR蛋白表达水平。　结果　含ARaODN的培养基培养处于静止期和对数生长期的LNCaP细胞增殖较对照组均明显减慢。RT PCR证实aODN组吸光度A值 (0 .5 3± 0 .18)与ODN组 (1.14± 0 .2 1)差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ,提示ARaODN可导致LNCaP细胞ARmRNA显著下调。Westernblot分析显示aODN组条带的吸光度A值 (2 6 .35± 1.33)与ODN组 (33.5 1± 1.4 8)之间差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ,提示ARaODN可下调LNCaP细胞AR蛋白含量。　结论　ARaODN可抑制前列腺癌细胞AR表达并抑制前列腺癌细胞增殖。     

移植动脉慢性排斥反应的实验研究

目的 建立慢性排斥反应的简化动物模型,观察移植体动脉硬化发展规律。方法 采用病理图像分析及电镜观察移植后3、7、14、20、30、60 d移植动脉硬化情况,结合PNCA及C－myc免疫组化了解细胞增殖与原癌基因表达的关系。结果 ①术后14d内膜层明显增生,术后60d持续增厚,细胞数术后30d达高峰,术后20d内膜层出现大量合成型平滑机细胞;②术后14d中层细胞变性坏死,向内层迁移,α－actin阳性细胞数下降,而内膜层α－actin阳性细胞却迅速升高,两者呈显著负相关;③术后3d外膜大量炎性细胞浸润。结论 ①移植动物硬化具有内膜增生,中层细胞坏死、迁移、炎细胞浸润三大特点;②内膜增生在术后早期以细胞增生为主,后期则为细胞外基质增生,且伴随平滑肌形态改变;③PCNA表达反映出细胞增殖进程,而C－myc还可能与非增殖因素有关。     

胃粘膜癌变过程中细胞增殖活性的研究

目的 探讨胃粘膜癌变过程中细胞增殖活性的变化以及PCNA、P53基因在胃癌发病过程中的意义。方法 采用免疫组化（Immunohistochemistry)方法对临床95例胃手术切除标本PCNA、P53基因的表达情况进行检测分析。结果 胃癌变过程中均可见PCNA的阳性表达，随病变程度的加重，PCNA增殖指数亦逐渐上升，各组间差异显著（P＜0．05），但重度异型增生与胃癌组织相比较，PCNA指数变化不大（P＞0．05）。仅在重度异型增生组织中发现P53蛋白表达，胃癌P53蛋白 的表达阳性率明显增高，与重度异型增生组织相比较，具有显著性差异（P＜0．05）。结论 在胃癌过程中，细胞增殖活性逐渐增高，对临床标本进行PC－NA检测，可较方便准确地判断组织的增殖状况。P53蛋白表达出现较晚，其可能表明P细胞已有明显的恶性转化。     

肾缺血再灌注损伤时血小板衍化生长因子的表达及意义

20 0 0年 1月至 2 0 0 1年 3月 ,我们在建立肾缺血再灌注损伤动物模型的基础上 ,采用免疫组化方法检测血小板衍化生长因子 (ＰＤＧＦ Ａ)在肾脏的表达 ,观察其变化规律和作用 ,现报告如下。材料与方法　 1.动物实验 :雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 78只。体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ。分为 3组 :肾缺血再灌注损伤组 (实验组 )4 8只 ,切除右肾 ,左肾蒂夹闭 45ｍｉｎ后松开 ;假手术组 15只 ,暴露左右肾蒂即关腹 ;对照组 15只 ,单纯切除右肾。术后 1、3及 7ｄ处死动物 ,免疫组化ＳＰ法对各时相点标本分别行ＰＤＧＦ Ａ检测。一抗为兔抗鼠ＰＤＧＦ Ａ抗体。用…     

表达鼠精子Cyritestin蛋白的重组沙门氏菌疫苗株的免疫性避孕效应研究

目的　为观察沙门氏菌疫苗株诱导雌鼠免疫性避孕效应。方法　应用表达鼠精子抗原cyritestin的两种重组沙门氏菌疫苗株X46 32 (pCFL)、X45 5 0 (pCFL)口服免疫雌鼠 ,通过ELISA方法检测其激发雌鼠产生抗重组Cyritestin蛋白和抗菌体LPS(脂多糖 )的血清IgG抗体和阴道分泌物IgA抗体滴度变化。 结果　发现 :两种重组疫苗株不但可激发雌鼠产生高水平血清抗重组Cyritestin蛋白和抗菌体LPSIgG抗体 ,而且在阴道分泌物中可出现相应IgA抗体。同时 ,口服免疫后雌鼠生育能力明显降低 ,两实验组雌鼠妊娠率降低 30 %～ 40 % ,一胎产仔数量平均降低 6 6 .96 %～ 70 .48%。结论　表达精子Cyritestin蛋白的重组沙门氏菌疫苗株可诱导有效的免疫性避孕效应 ,值得深入研究。     

两种不同免疫抑制剂方案对肾移植术后感染及排异的影响

目的:观察两种不同免疫抑制剂方案对肾移植术后感染及排异的影响。方法:将150例肾移植术后患者分成两组,即2001年以前手术的96例为环孢素(CsA)组,免疫抑制剂为CsA加泼尼松(Pred)加硫唑嘌呤(Aza),CsA初始用量为6~8mg/(kg.d);2002~2004年1月手术的54例为FK506组,免疫抑制剂为FK506加Pred加骁悉(MMF)FK506初始用量为0.1~0.2mg/(kg.d),以后根据血药浓度进行调整。结果:150例肾移植术后患者,随访2个月~6年,总的感染率为20.7%,排异率18.1%;其中CsA组感染率为26.0%(25/96),5例死亡,排异逆转率为91.7%(22/24);FK506组感染率为11.1%(6/54),无死亡病例,排异逆转率为100.0%(7/7)。两者之间感染率差异有显著意义(P<0.05)。结论:用FK506+MMF代替CsA与Aza可以显著减少肾移植术后的感染率,降低排斥反应,并提高移植肾成活率。