生活饮用水中碘化物的测定

[目的]为基层实验室找到一种夏季测定水中碘化物的可行方法。[方法]2004年3月采用提高砷铈反应溶液的酸度的同时提高水浴温度，使砷铈反应在碘离子的催化下维持一个较平稳的反应速度，从而测定碘离子的浓度。[结果]该方法的检出限为10ug／L，回收率为89．0％～95．7％，RSD为1．6％～7．4％，该方法与国标法比较无显著性差异。[结论]该方法可在高温季节测定水中碘化物，可靠实用。     

16S rDNA多重PCR检测牙周组织感染菌及混合感染与慢性牙周炎病变程度关系的研究

目的　建立多重 16SrDNAPCR检测慢性牙周炎 (CP)标本中牙龈卟啉单胞菌 (Pg)、伴放线杆菌 (Aa)和齿垢密螺旋体 (Td) ,了解不同感染情况与CP严重程度的关系。方法　将轻、中和重度15 2例CP患者牙周袋标本和 30名牙周健康者龈沟标本置于 2 0 0 μl裂解缓冲液中 ,10 0℃水浴 10min后取 10 μl上清液作为聚合酶链反应 (PCR)模板。常规酚 氯仿法提取的PgATCC332 77株、AaY4株、TdFM株和E .coliDH5α株DNA分别作为PCR阳性和阴性对照。采用Pg、Aa和Td 16SrDNA特异性引物 ,建立多重PCR检测上述标本。 3例Pg、Aa和TdPCR结果均阳性标本的目的扩增片段T A克隆后测序。采用 χ2 检验分析不同混合感染情况与牙周炎严重程度之间的关系。结果所建立的多重 16SrDNAPCR最低可检出 10个Pg、2 0个Aa和 2 0个Td细胞。Pg、Aa和Td 16SrDNA扩增片段与已报道的序列比较 ,相似性分别高达 99.4 5 %、97.0 8%和 96 .5 9%。 30名牙周健康者龈沟标本中 ,仅有 1名Pg(3.3% )、2名Aa(6 .7% )的 16SrDNA扩增结果阳性 ,其余标本均阴性。 15 2例CP患者牙周袋标本中 ,14 7例 (96 .7% )检出Pg、Aa和 /或Td的 16SrDNA ,5例 (3.3% )扩增结果均阴性。Pg的PCR检测阳性率 (91.5 % ,139 15 2 )明显高于Aa(72 .4 % ,110 15 2 )或Td(80 .9% ,12 3 15     

骨碎补提取物促小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和钙化作用的研究

目的 :探讨中药骨碎补有无促进成骨细胞增殖、分化和钙化的作用。方法 :制备骨碎补的水、醇提取液。小鼠成骨细胞株MC3T3 E1作为药物筛选的细胞模型 ;用MTT法和流式细胞术测定不同浓度的骨碎补水、醇提取液的促细胞增殖作用 ;采用ALP活性和骨钙素定量检测分别观察上述药物提取液的促细胞分化作用 ;以Vonkossa钙化染色法了解上述药物提取液的促细胞钙化作用。结果 :0.01,1mg·L^-1骨碎补水提液能促进MC3T3 E1细胞数量增加 (P <0 .0 5 ) ;0.01,1mg·L^-1骨碎补水提液和醇提液能使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少 ;1,10 0mg·L^-1骨碎补醇提液能使细胞ALP的活性升高 (P <0.05 ) ;100mg·L^-1骨碎补醇提液能明显促进细胞骨钙素合成和分泌 (P <0 .001) ;1mg·L^-1骨碎补水提液及 0.01mg·L^-1骨碎补醇提液均可促进细胞钙化 (P <0.05 )。结论 :骨碎补水相和醇相提取物中分别存在有较高活性的促成骨细胞增殖、分化和钙化的物质。     

骨碎补提取液对实验性牙槽骨吸收疗效的研究

目的 :建立实验性大鼠牙槽骨吸收模型 ,了解中药骨碎补 (DFS)对大鼠牙槽骨吸收的疗效。方法 :采用SD大鼠局部注射大肠杆菌内毒素 (E-LPS)建立牙槽骨吸收模型。制备DFS水相提取液。建模大鼠用DFS水提液每天灌胃 1次 ,分别用药 10 ,2 0 ,30d。采用血清碱性磷酸酶 (ALP)活性、钙离子 (Ca²⁺ )和骨钙素 (OC)浓度测定 ,以及牙体-牙周联合标本骨密度 (BMD)、抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)染色破骨细胞计数、HE染色组织病理学检查 ,评价DFS水提液治疗实验性牙槽骨吸收的疗效。结果 :与相应阴性对照组比较 ,用药 10d大鼠的实验牙位骨密度显著升高 (P <0 .0 5 ) ,牙周破骨细胞消失 (P <0 .0 5 ) ,Howship陷窝明显减少 ,大多出现根分叉区有成骨细胞附着的新生未钙化骨样基质 ,且第 20 ,30天检查结果与第 10天相似。用药 10～ 30d大鼠的血清标本中ALP活性、Ca²⁺ 和OC浓度与对照组比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :DFS水提液对大鼠实验性牙槽骨吸收有明确的疗效 ,能抑制骨质吸收、促进骨质再生。血清ALP活性、Ca²⁺和OC浓度不能作为观察动物模型中牙槽骨吸收及再生的有效指标。     

慢性牙周炎患者龈下菌斑中不同基因型牙龈卟啉单胞菌的检测

摘要 目的:建立临床标本中牙龈卟啉单胞菌(P.g)的PCR检测方法,探讨慢性牙周炎患者不同牙位的龈下菌斑中P.g基因型的差异。方法:采用培养法分离鉴定慢性牙周炎患者不同牙位龈下菌斑中P.g,同时采用PCR检测 P.g16SrDNA、prtC和fimA基因。部分扩增产物测定了核苷酸序列。结果:在66例患者的127个龈下菌斑标本中, P.g16SrDNA、prtC和fimA多重引物扩增的阳性率为9814%;PCR阳性率显著高于培养法P.g的检出率(P< 0101)。3010%的患者(18/60)同时感染了不同基因型的P.g菌株。P.g16SrDNA、prtC和fimA扩增片段的核苷酸序列同源性在98162%~100%之间。结论:本文所建立的P.g的PCR检测方法具有较高的敏感性和特异性,适用于P.g的快速临床诊断。同一患者可被不同感染来源的多株P.g同时感染。     

牙龈类杆菌内毒素与牙周炎关系的研究 Ⅲ.牙龈类杆菌单克隆抗体的研制

应用杂交瘤技术建立了三株分泌牙龈类杆菌单克隆抗体的细胞系CY—4、CY—5和CY—6。CY—4、CY—5和CY—6分泌的单克隆抗体均属IgM,能与牙龈类杆菌内毒素发生特异性结合,且经ELISA证实具有较高的种特异性。该3株杂交瘤细胞体外培养7个月余和冻存3个月后复苏培养仍能稳定地分泌单克隆抗体。     

基因治疗在牙周组织再生中的应用

安全有效的牙周组织再生疗法一直是牙周领域研究的热点,但是现有的疗法都存在着各自的缺陷。由于基因治疗和组织工程技术的联合应用模仿了牙周自然生物发育过程,因此在牙周组织再生中已经有了不少的应用研究。本文就基因治疗在牙周组织工程领域方面的应用作一综述。     

1例神经外科患者置入中长导管并发血栓性堵塞致拔管的原因分析及预防

本文总结1例神经外科高龄患者置入中长导管进行静脉输液后第6天并发导管相关性血栓,第20天并发血栓性堵塞,致导管失功后安全拔管的治疗过程,并对该患者中长导管并发血栓性堵塞致非计划性拔管个体、医源性及其他因素等原因进行综合分析。该患者为导管相关性血栓形成高危人群,通过严密观察、全面评估、选择合适时机后安全拔管,进而总结出包括密切观察病情、规范导管护理维护、强化健康宣教效用、预警继发性并发症发生等预防对策的护理经验。本文通过对中长导管并发血栓性堵塞致拔管的典型案例进行原因分析及预防对策总结,为以后治疗、护理、预防中长导管相关性血栓提供临床实践循证参考依据,确保导管安全应用,提高患者满意度,提升专科护理水平。     

牙龈紫质单胞菌脂多糖通过诱生IL—1、TNF和PGE激活破骨细胞的骨吸收

目的：研究牙龈紫质单胞菌脂多糖（Pg-LPS)诱生IL－1、TNF、PGE和激活破骨细胞的活性,了解破骨细胞激活机制。方法：用酚水法制备Pg-LPS,采用层析法分离Pg-LPS诱生的IL－1、TNF和PGE,用原子吸收光谱法测定Ca^2 离子浓度,用组织化学法检测牙周膜中酸性磷酸酶和碳酸酐酶。结果：Pg-LPS能刺激人外周血单个核细胞（PBMC）或人牙周组织细胞分泌IL－1、TNF和PGE。这些细胞因子的产量在一定范围内随Pg-LPS浓度（0．5－5．0mg/L)增高而增加。IL－1、TNF和PGE能促进SD大鼠头盖骨Ca^2 离子的释放,但以PGE的活性最强。Pg-LPS注射的SD大鼠牙周膜中酸性磷酸酶和碳酸酐酶数量明显升高（P＜0．01）。SD大鼠牙周膜中活化的破骨细胞数量随Pg-LPS注射次数增加而明显增多（P＜0．01）,但由于未活化破骨细胞数量也随之增多而使破骨细胞活化率稳定在65％左右。结论：Pg-LPS具有很强的诱导人PBMC和人牙周组织细胞产生IL－1、TNF或PGE的作用,这种作用在一定的范围内呈剂量依赖型、Pg-LPS可有效地激活破骨细胞,其激活机制可能与碱性磷酸酶和碳酸酐酶增多有关。     

方晓华抑木扶土法临床运用验案举隅

肝为刚脏,其性属木,主疏泄,肝之为病,易累及他脏;脾胃者,后天之本,气血生化之源,脾主升清,胃主降浊,脾胃的升降功能有赖于肝之疏泄。方晓华主任医师临床中重视肝郁脾胃的关系,抑木扶土,从肝治胃。该文介绍其抑木扶土法临床运用验案5则。