红色糖多孢菌M合成3-脱氧-3-羰基-赤酮酸内酯B的限速因子研究

目的探讨红色糖多孢菌KR6基因突变体生物合成3-脱氧-3羰基-赤酮酸内酯B（DOEB）产量显著降低的原因。方法以KR6基因突变体M菌株为研究对象,采用相对实时荧光定量RT-PCR技术、抗原-抗体检测技术和高分辨LC-MS分析技术等,分别从基因的转录水平、翻译水平以及聚酮化合物水平等层面研究了DOEB的生物合成量。结果红色糖多孢菌M菌株与出发菌株A226相比,两者聚酮合酶（PKS）基因簇在转录水平和翻译水平上的表达差异均非造成DOEB产量降低的限速因子;而DOEB的前体转化能力却大幅度降低,因此,DOEB合酶的活力降低是造成生物合成DOEB产量降低的关键因素。结论 DOEB合酶的活力是生物合成DOEB的限速因子,本研究为进一步探讨利用基因工程途径提高新酮内酯类化合物产量奠定了基础。     

医用电子直线加速器建设项目屏蔽设计

目的为医用电子直线加速器建设项目提供优化的屏蔽设计方案,使之在可合理达到的尽量低水平(ALARA原则),避免过度防护。方法选取2017年广东省某医院电子加速器建设项目作为评价对象,利用十分之一值层厚度法(TVL)分别估算医用电子直线加速器机房屏蔽墙屏蔽防护和距离防护与剂量率的关系及防护门屏蔽设计,为医用电子直线加速器建设项目提供屏蔽设计方案。结果屏蔽设计方案确定为:机房屏蔽墙的主、副和次屏蔽墙外30 cm处与等中心点距离分别为8.0、7.5和5.5 m,屏蔽厚度分别为3 100、1 500和1 600 mm混凝土,防护门为18 mm铅板+100 mm含硼聚乙烯板。结论在考虑到社会代价和经济利益等因素的条件下,采用屏蔽设计优化方案,使医用电子直线加速器建设项目满足辐射防护要求,又满足资源利用最大化,防止屏蔽过度,对辐射防护的发展有重要意义。     

反义寡核苷酸的药代动力学研究进展

反义药物在经历了20年后，又迎来了一个蓬勃的发展阶段。研究结果表明，反义药物在抗肿瘤、抗炎和抗病毒等方面展现出令人鼓舞的前景，反义寡核苷酸可能成为新药开发新的生长点。本文调查了近年反义寡核苷酸药代动力学的研究进展，对反义寡核苷酸的吸收、分布、代谢和排泄进行了详细的综述。     

东莞市放射工作人员健康状况及职业放射暴露水平对健康影响分析

目的 了解东莞市放射工作人员的健康状况及职业放射暴露水平对健康的影响,探讨放射工作人员晶状体浑浊发生的影响因素。方法 选取2018年在东莞市职业病防治中心进行健康体检的663名放射工作人员作为研究对象。其中,研究对象的健康体检根据《放射工作人员职业健康监护技术规范》进行,包括眼部检查、血尿常规、肝肾功能及心电图等;本研究对个人累积放射剂量的评估,采用个体剂量计的连续监测。最后,整合所有数据进行统计分析。结果 本研究放射工作人员的平均年龄为30.0(26.0,35.0)岁。其中,男性占74.1%;年均照射剂量为(1.19±0.90)mSv;视力异常发生率为38.5%、晶状体浑浊发生率为3.5%、高尿酸发生率为27.5%,甲状腺功能异常、脂肪肝以及心电图异常的发生率分别为4.8%、17.2%和13.9%;在≥1 mSv组中,晶状体浑浊的发生率为(4.7%)明显高于<1 mSv组(1.5%),差异有统计学意义(χ²=4.82,P=0.03),其它指标间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。logistic回归结果表明,年均照射剂量≥1 mSv(OR=3.13,95%CI:1.03~9.51)、工业辐照(OR=3.13,95%CI:1.10~8.90)能显著增加放射工作人员发生晶状体浑浊的风险。结论 低剂量电离辐射暴露是放射工作人员发生晶状体浑浊的危险因素,应加强放射工作过程的眼部防护。     

原核表达基质金属蛋白酶-2的催化域

 目的 体外表达人基质金属蛋白酶－2(MMP－2)的催化域,为进一步研究其在肿瘤侵袭和转移中的作用打下基础。方法 通过PCR方法获得了编码MMP－2催化域(MMP－2－C)的cDNA序列,并构建了重组质粒pGEX－5X－3／MMP－2－C,由IPTG诱导在大肠杆菌中表达,表达产物被复性后鉴定酶活性。结果表达产物为68－Kda的融合蛋白且具有明胶酶活性。结论 体外表达的具有催化活性的融合蛋白可用于研究抗肿瘤转移药物。     

尿酸氧化酶的表达纯化及活性形式鉴定

目的:在大肠杆菌内表达具有活性的黄曲霉尿酸氧化酶。方法:用重叠PCR从黄曲霉(Aspergillusflavus)3.1398中钓取了尿酸氧化酶(urateoxidase,UO,EC1.7.3.3)基因,克隆到原核表达载体pET22b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选到高表达的重组转化子菌株。经乳糖诱导目的蛋白表达,阴离子交换柱纯化,获得纯品。SDS PAGE分析样品纯度。用尿酸缓冲液测定酶活性,用戊二醛交联结合质谱法测定相对分子质量。结果:目的蛋白为胞内可溶性表达,表达量达菌体总蛋白的35%,纯化后的样品纯度达99%,其酶比活力可达35U/mg。经质谱测定重组UO单体的相对分子质量为34×103。交联后相对分子质量为160×103。结论:黄曲霉尿酸氧化酶可在大肠杆菌中可溶表达,并具有活性,其活性形式为四聚体。     

Bax反义硫代脱氧寡核苷酸的体外抗辐射效应研究

目的 :Bcl_2 Bax蛋白比值降低是辐射所致细胞凋亡启动的检查点。本研究拟用Bax反义核酸干预Bax基因的表达 ,提高Bcl_2 Bax蛋白比值 ,抑制辐射所致凋亡 ,促进细胞存活。方法 :人胚肺成纤维细胞 (HELF)和小鼠受γ射线照射后 ,立即用Bax反义脱氧寡核苷酸处理HELF细胞和小鼠骨髓细胞 6h(终浓度均为 10 0nmol L) ,用MTT法、SRB法和小鼠骨髓中性粒细胞_巨噬细胞系祖细胞 (CFU_GM)集落形成法 ,确定细胞的存活状况。用RT_PCR方法和流式细胞仪检测BaxmRNA的表达状况、细胞周期的变化 ,分析其作用机制。结果 :HELF细胞的存活率分别增加 2 4 .4 % (MTT法 ,P <0 .0 1)和 12 .8% (SRB法 ,P <0 .0 1) ;骨髓细胞处理组CFU_GM集落形成数量远高于照射对照(72± 17vs 13± 6 ,P <0 .0 1) ;RT_PCR检测显示 ,处理组的目标条带和内标条带的灰度比值 (Bax β_actin)低于对照组(分别为 4 3.9%和 6 8.6 % ) ;流式细胞仪检测表明 ,处理组总S期细胞的比例高于对照组 ,分别为 2 4 .2 %和 7.7% ,提示处理组细胞内BaxmRNA拷贝数量低于对照组 ,细胞增殖活动较强。结论 :靶向BaxmRNA的反义硫代脱氧寡核苷酸 ,能够促进γ射线辐射后细胞的存活 ,其机制与破坏靶mRNA分子 ,继而造成Bax蛋白表达减少 ,抑制凋亡启动并促进细胞增殖活动有关。     

重组人肝再生增强因子对肝纤维化大鼠血清透明质酸浓度的影响

目的探讨重组人肝再生增强因子(hALR)对肝纤维化大鼠血清透明质酸浓度的影响.方法建立四氯化碳中毒性及人血白蛋白免疫损伤性两种大鼠肝纤维化模型.模型完成后予不同剂量hALR(50μg·kg-1·d、10μg·kg-1·d)治疗.在不同的时间点留取大鼠血清标本,测定透明质酸浓度.结果在两种模型中hALR治疗组大鼠血清透明质酸浓度在治疗过程中的不同阶段(治疗1、2个月)均明显低于模型组(四氯化碳模型分别为340.7±32.1、234.1±19.5;人血白蛋白模型分别为366.5±32.3、287.3±30.1).高剂量hALR组大鼠血清透明质酸浓度(四氯化碳模型分别为203.3±15.5、134.1±9.8;人血白蛋白模型分别为218.9±15.8、143.1±8.7)均明显低于低剂量组(四氯化碳模型分别为273.3±13.4、186.6±11.3;人血白蛋白模型分别为276.1±23.4、198.7±11.5).结论重组人肝再生增强因子可降低肝纤维化大鼠血清透明质酸含量.     

青蒿素衍生物抗癌机制探讨

目的：探讨青蒿素衍生物诱导肿瘤细胞产生自由基,引导肿瘤细胞死亡的机制。方法测定小鼠肿瘤动物模型的瘤体铁含量、观察青蒿素衍生物诱导肿瘤细胞产生自由基、采用单细胞彗星电泳法观察自由基对肿瘤细胞DNA杀伤的效应。结果小鼠的H22瘤体的铁含量显著高于血和肌肉、肺组织铁含量, Lewis肺癌的实验结果相同。K562细胞经青蒿素衍生物作用,能测出微量的自由基。青蒿素衍生物作用K562细胞可引起DNA损伤并溢出细胞。结论青蒿素衍生物可在含铁量较高的肿瘤细胞内产生自由基,导致肿瘤细胞死亡。     

东莞市68个家具企业职业卫生状况调查

目的了解东莞市家具企业职业卫生现状,提出家具企业职业病危害因素的预防和控制措施,为有关部门今后的监督管理提供依据。方法收集和整理本市68个家具企业的职业病危害因素现场调查资料以及检测数据,利用Excel软件对检测数据建立数据库,用SPSS 13.0软件进行相关统计分析。结果在1 128个检测点中,噪声合格率44.3%,木粉尘合格率52.0%,化学毒物合格率76.9%。大型企业的木粉尘以及化学毒物检测合格率远高于于中小型企业,差异有统计学意义(χ2=8.90、χ2=7.89,均P<0.05)。结论目前,东莞的家具企业职业卫生状况令人堪忧,职业危害因素样品检测合格率低,监督执法重点在于中小型企业。