四氢生物喋呤改善大鼠心脏冷保存12小时的效果

四氢生物喋呤(BH4)是一氧化氮合酶(NOS)的重要辅助因子[1],细胞内BH4的水平与一氧化氮(NO)的合成密切相关,而NO参与机体多种生理功能的调节,内源性NO可减轻心脏缺血再灌注损伤.     

高职高专药学专业药理学精品课程建设的探索与实践

课程建设是专业建设的重点和难点,是提高教育教学质量的关键环节。自开展药理学精品课程建设以来,通过优化教学内容,改革教学方法,实施“工学结合”的教学模式,改革考试考核办法,加强师生互动交流等方面的探索与实践,使师资队伍素质得到提高,教学模式得到创新,教学方法形式多样,教学效果显著提高。     

高糖通过环加氧酶2依赖性途径诱导GRP78表达改变

目的： 观察高糖慢性处理对血管内皮细胞内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）表达的影响及其作用机制。方法：培养的HUVECs细胞用含正常糖（5.5 mmol/L）或高糖（30 mmol/L）的培养基处理不同时间后,用MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪测定细胞凋亡,Western blotting法测定蛋白表达情况。结果：与相应对照组相比,HUVECs细胞经高糖孵育24-48 h 后,GRP78蛋白表达量先增加后减少;而环加氧酶-2（COX-2）蛋白表达量逐渐增加。COX-2选择性抑制剂尼美舒利与高糖共孵育后,可明显抑制高糖引起的GRP78蛋白表达改变;同时尼美舒利可抑制高糖孵育48 h 后诱导的细胞凋亡。结论：高糖慢性处理可诱导HUVECs细胞GRP78表达先增加后减少,此过程依赖于COX-2蛋白的上调。     

二氮嗪对冷保存诱导的大鼠供心Smac/DIABLO蛋白表达的抑制作用

目的： 探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道（mitoKATP）开放剂二氮嗪（DE）对离体大鼠供心不同时程冷保存时促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达的影响及机制。方法：SD大鼠随机分为3组,包括空白对照组、单纯冷保存组、DE组（Celsior保存液中含30μmol/L DE）,后2组又按冷保存时程不同,分别分为3、6、9、12 h组。实验结束后采用原位末端标记染色法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡,采用Western blotting法检测心肌组织中caspase-3蛋白及胞浆Smac/DIABLO蛋白表达。结果：（1）在Celsior保存液中加入DE后,心肌细胞凋亡指数及caspase-3蛋白表达显著低于相应单纯冷保存组。（2）DE可使Smac/DIABLO蛋白表达高峰由冷保存6 h延迟至9 h。（3）DE的上述作用可被mitoKATP通道特异性阻断剂5-羟基葵酸盐（5-HD）所取消。结论：DE具有对抗冷保存诱导心肌细胞凋亡的作用,这种保护作用可能与其激活mitoKATP 通道和减少促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达有关。     

交感神经对小鼠小肠T淋巴细胞亚型及其增殖的影响

采用化学阻断剂6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁交感神经,研究了交感神经对小鼠小肠局部细胞免疫作用的内在机理。将30只雄性昆明小鼠随机分为2组,一组连续5d腹腔注射6-OHDA,另一组用作对照。采用免疫组织化学染色和细胞培养方法检测两组动物小肠CD4+、CD8+T淋巴细胞数量及肠系膜淋巴结T淋巴细胞体外增殖能力。结果表明,试验组的CD4+T细胞数量比对照组少6.5%～51.5%,十二指肠、空肠段差异极显著(P<0.01);CD8+T细胞数量比对照组增加5.6%～22.7%,十二指肠段差异显著(P<0.01);CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值总体呈下降趋势。肠系膜淋巴结T淋巴细胞转化率降低,在ConA浓度为3μg/ml时比对照组降低了9.2%,差异显著(P<0.05)。以上结果提示:交感神经通过调节小鼠小肠T淋巴细胞增殖以及亚型CD4+、CD8+T淋巴细胞的数量,影响肠黏膜细胞免疫的调控。     

表观遗传影响胚胎发育研究进展

表观遗传学是研究没有DNA 序列变化的、可遗传的基因表达改变,这种改变在胚胎发育和细胞增殖过程中能稳定传递,是胚胎发育的关键.     

丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡及Fas表达的蛋白影响

目的:探讨丹参对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury I/RI)后细胞凋亡及Fas蛋白表达的影响.方法:健康豚鼠72只,雌雄不拘.随机分成正常组、假手术组、丹参干预假手术组、模型组和干预组(术前腹腔注射丹参注射液,每天一次共7d),后两组各在缺血30min、再灌注6h及24h取材.用组织化学方法观察缺血及再灌注不同时间段耳蜗各部位的组织学改变;用免疫组织化学法检测内耳Fas的表达;用原位凋亡法(TUNEL法)检测内耳细胞凋亡情况.结果:正常组、假手术组、丹参干预假手术组内耳罕见调亡细胞,Fas为弱阳性表达;模型组Corti器、血管纹、螺旋神经节在缺血及再灌注每个时间点均有细胞凋亡,Fas为阳性表达,与正常组比较有统计学意义(P＜0.05);干预组Corti器、血管纹、螺旋神经节在缺血及再灌注每个时间点均有细胞凋亡,Fas为阳性表达,程度较模型组减弱.与模型组比较有统计学意义(P＜0.05).结论:Fas参与了耳蜗I/RI后细胞凋亡的发生,丹参可能通过抑制Fas蛋白的表达使凋亡细胞减少而对I/RI后的耳蜗起保护作用.     

蛋白酶抑制剂利托那韦、沙奎那韦和印地那韦对细胞色素P450同工酶的不同抑制作用

人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的3个主要基因编码的多聚蛋白质,其翻译的后加工过程是由细胞或病毒编码的蛋白酶水解完成的。如果这些蛋白酶丧失了活性,就可以产生不成熟的、无传染性的病毒颗粒,所以HIV病毒编码的蛋白酶抑制剂可以起到抗HIV的作用。目前,该类化合物的研究已经得到很大程度的重视。本研究通过体外实验观察了3个HIV蛋白酶抑制剂利托那韦(ritonavir)、沙奎那韦和印地那韦(indinavir)对人肝细胞微粒体中细胞色素同工酶催化代谢的抑制效应。肝微粒体从6名肾移植供者的正常肝脏中制取,细胞色素P450同工酶CYP1A2、CYP2C9、C…     

龙藤筋骨片治疗军事训练致腰肌劳损35例疗效观察

目的评价龙藤筋骨片治疗慢性腰肌劳损的临床疗效、适应性、安全性和使用注意事项。方法选择军事训练致腰肌劳损患者67例,中医辨证为湿热型者,随机分为治疗组35例及对照组32例。治疗组口服龙藤筋骨片,对照组口服伤科接骨片。结果服药30d后,治疗组总有效率为91.4%,对照组总有效率为71.9%,两组比较差异有统计学意义(χ2=4.35,P<0.05)。腰部疼痛、腰部功能等症状和体征分析,龙藤筋骨片治疗效果优于伤科接骨片。结论龙藤筋骨片治疗部队官兵军事训练致腰肌劳损疗效确切。     

HSP90依赖的Akt线粒体转位参与IGF-1对低温保存心脏的保护作用

目的: 观察胰岛素样生长因子1(IGF-1)是否可对抗低温保存诱导的心肌损伤,并探讨其可能的机制。方法: 观察SD大鼠心脏低温保存9 h后,再灌注期左心室发展压(LVDP)和细胞凋亡指数的变化。Western blotting法检测蛋白激酶B(Akt)蛋白表达。结果: (1)Celsior保存液中加入10 nmol/L IGF-1可促进低温保存9 h后心脏收缩功能的恢复、减少心肌细胞凋亡的发生、抑制线粒体渗透性转换孔开放。(2)IGF-1可上调心脏Akt蛋白磷酸化水平。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)特异性抑制剂LY294002不仅可降低IGF-1诱导的Akt磷酸化水平,且可逆转IGF-1促进低温保存心脏心功能的恢复和抗凋亡作用。(3)抑制热休克蛋白90(HSP90)可降低IGF-1诱导的Akt磷酸化和线粒体转位,阻断IGF-1的心肌保护作用。结论: IGF-1可明显减少低温保存心脏心肌细胞凋亡的发生,促进再灌注期心功能的恢复,其机制可能与HSP90依赖性Akt的激活和线粒体转位有关。