七叶皂苷对肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用

目的 研究七叶皂苷(aescine)对肺腺癌细胞A549的增殖抑制作用,及对细胞周期分布和细胞凋亡的影响.方法 采用MTT方法观察药物对A549的增殖抑制作用;流式细胞仪分析细胞周期的变化;Annexin-FITC/PI双标记检测细胞凋亡.结果 七叶皂苷能明显抑制A549的生长,且呈时间剂量依赖性;流式细胞仪结果表明,七叶皂苷能明显的将细胞周期阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡.结论 七叶皂苷对A549细胞增殖有明显的抑制作用,并可诱导A549细胞凋亡.     

鼠抗人CD28分子单克隆抗体的研制及生物学特性研究

目的 制备鼠抗人CD28分子的单克隆抗体（mAb),研究其在T细胞的活化、增殖及信号传导中的作用。方法 以小鼠淋巴瘤细胞转染人CD28基因的细胞株（CD28-T）为免疫原,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,获取分泌特异性mAb的杂交瘤细胞株,以体内诱生法生产腹水,并以免疫亲和层析法对其纯化,以快速定性试纸法鉴定mAb的Ig亚类,竞争抑制法分析mAb识别的抗原表位,3H-TdR掺入法研究mAb对T细胞的刺激效应,结果 成功地获得了5株分泌特异性抗入CD28mAb的杂交瘤细胞株,鉴定的1株（克隆18G8）属IgG2a,腹水效价（流式细胞仪分析）达1：2400以上,该mAb能60%阻断标准鼠抗入CD28抗体与相应抗原的结合,提示其识别的抗原表位与标准mAb不完全相同,mAb18G8可取代B7-1分子介导的协同刺激信号,促进人外周血T细胞增殖（ST=7）。结论 18G8是12株功能性mAb,具有重要的研究和应用价值。     

催化极谱法测定人发和血清中痕量硒

本文介绍用催化极谱法测定人发和血清中痕量硒.在氨性介质中以亚硫酸钠作还原剂,高碘酸钾作氧化剂,EDTA 作掩蔽剂,硒在滴汞电极上产生灵敏度很高的催化电流,可不经分离直接测定人发和血清中痕量硒。回收率达90～105%。     

外周血树突状细胞的诱导及其对T细胞的激发效应

目的建立外周血树突状细胞(Dendritic     

再生多孔丝素膜在创面的降解及对免疫细胞的影响

目的研究再生多孔丝素膜在创伤局部应用后的降解吸收及对免疫细胞的影响。方法取SD大鼠,切除背部皮肤建立创面,面积为2cm×2cm。将125I标记的再生多孔丝素膜覆盖在创伤面,再将切除皮肤的表皮层盖在再生多孔丝素膜上进行缝合。在术后3h和3、6、13、20、27、34、41、48、55d,采用单光子发射计算机断层成像术（SPECT）进行显像,示踪至同位素信号消失。处死大鼠,取创面皮肤经HE染色后对其中的炎症细胞进行分析。脾脏细胞经双色免疫荧光及流式细胞术检测CD3＋CD25＋/CD3＋T细胞的比率。结果大鼠种植再生多孔丝素膜55d,SPECT显像的同位素信号基本消失。创面皮肤下HE染色观察到少量的炎症细胞,未观察到残留丝素成分。实验组脾脏中CD3＋CD25＋/CD3＋T细胞的百分率为（7.34±1.85）%,对照组为（7.18±0.37）%,两者无明显差异（P〉0.05）。结论再生多孔丝素膜创面局部应用可在2个月内完全降解吸收,对免疫细胞的激发作用较小,是一种较为理想的创面修复组织工程材料。     

术前静注氯诺昔康对子宫切除术病人围术期单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

目的 探讨术前静注氯诺昔康对子宫切除术病人围术期单核细胞趋化蛋白-1表达的影响.方法 择期行子宫切除术的病人30例,随机分为3组,对照组、氯诺昔康8 mg组、氯诺昔康16 mg组,每组各10例.氯诺昔康8 mg组在开放静脉后静脉注人氯诺昔康8 mg,氯诺昔康16 mg组在开放静脉后静脉注入氯诺昔康16 mg.分别在开放静脉前、手术开始后30 min、手术结束、术后24 h、术后48 h外周静脉采血4 ml测定血浆单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)浓度.结果 ①三组病人的血浆MCP-1水平在手术开始后升高,到手术结束达到高峰,分别为(76±16)μg/L、(46±7)μg/L和(47±10)μg/L,与开放静脉前比较差异有统计学意义(P＜0.05);②氯诺昔康8 mg组在手术结束时和术后24 h血浆MCP-1水平为(46±7)μg/L和(30±7)μg/L与对照组比要低(P＜0.05),氯诺昔康16 mg组在手术结束时和术后24 h血浆MCP-1水平为(47±10)μg/L和(32±6)μg/L与对照组比要低(P＜0.05);③氯诺昔康8 mg组和16 mg组比较对血浆MCP-1水平影响差异无统计学意义.结论 术前静注氯诺昔康8 mg和16 mg可以有效的抑制子宫切除病人围术期MCP-1的表达的增加,16 mg组并不优于8 mg组,术前静注氯诺昔康有助于维持子宫切除病人围术期的免疫功能稳定.     

移植物抗宿主病小鼠肝脏及异体CD8+ T细胞趋化因子和趋化因子受体表达分析

为探讨趋化因子及其受体介导的效应性细胞迁移在移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)发生发展中的重要作用,采用次要组织相容性抗原异配的GVHD小鼠模型,应用流式细胞分选术(FACS)、实时荧光定量聚合酶链反应等方法,分析GVHD靶器官和异体CD8+T细胞趋化因子及受体的表达。肝脏高表达干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、干扰素诱导的T细胞趋化因子(ITAC)、γ干扰素诱生单核因子(MIG)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α/β等趋化因子。异体CD8+T细胞上则高表达CXC趋化因子受体(CXCR)3和CC趋化因子受体(CCR)5。随着肝脏趋化因子的表达增加,异体CD8+T细胞迁移浸润的数量也增高。因而趋化因子及异体CD8+T细胞上趋化因子受体的特异对应关系,促使大量异体CD8+T细胞迁移浸润并造成肝脏损伤。     

gp130单克隆抗体B-S12的生物学特性研究

研究ｇｐ３０单克隆抗体Ｂ－Ｓ１２的生学特性。方法用细胞计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入的方法观察人多发性骨髓瘤细胞株ＸＧ－１和ＸＧ－２在抗ｇｐ１３０的单抗Ｂ－Ｓ１２与它们的Ｆａｂ片段和Ｆ（ａｂ’）２片段作用下，细胞增殖和生长情况；此外，也观察ｇｐ１３０单抗Ｂ－Ｐ８以及ＩＬ－６和ＩＬ－６Ｒ单抗Ｂ－Ｅ８和Ｂ－Ｒ６对Ｂ－Ｓ１２单抗在这２个细胞株上作用的影响。结果Ｂ－Ｓ１２可刺激ＸＧ－１和ＸＧ－２细胞增殖，并维持     

人外周血树突状细胞的诱导及其生物学特性的研究

目的：建立体外诱导和扩增人外周血树突状细胞（ＤＣ） 的方法,并分析其生物学特性。方法：造血动员后外周血单个核细胞经贴壁去除悬浮细胞,加入细胞因子（ＩＬ－４、ＧＭ－ ＣＳＦ和ＴＮＦ－α）培养８ 天。用流式细胞仪分析细胞的表型,经ＥＬＩＳＡ法测定其培养上清中的ＩＬ－ １２ ,并将诱导的树突状细胞与脐带血原始Ｔ（ｎａｉｖｅ Ｔ） 细胞混合培养,用３Ｈ－ ＴｄＲ掺入法测定细胞的增殖指数。结果：贴壁的造血动员后外周血单个核细胞在体外经细胞因子诱导培养后,高表达人树突状细胞分化抗原ＣＤ１ａ（８９ ．１％ ）、ＣＤ４０（９９ ．８％ ）、ＣＤ８０（９５ ．１％ ）、ＣＤ８３（４５ ．７％ ）、ＨＬＡ－ ＤＲ（９７．６％ ）,同时所获的ＤＣ能分泌ＩＬ－１２ 和可有效地激活脐带血原始Ｔ细胞并促其增殖（ＳＩ＝ ６．９２） 。结论：采用造血动员的外周血经体外贴壁去除非粘附细胞,再经过细胞因子序贯培养,无需纯化ＣＤ３４ ＋ 细胞,能获得高纯度（ ＞８０％ ）和具有功能性的ＤＣ细胞。     

抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建及瞬时表达

目的构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体。方法采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株（克隆号：2F5）中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列。分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构建含有重组基因的pIRES表达质粒pIRES/h2F5。转染293T细胞并用抗性药物G418选择培养。采用流式细胞术,检测瞬时转染细胞后嵌合抗体的表达情况。结果抗人CD28鼠人嵌合抗体得到表达并能与CD28分子特异性结合。结论抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建和瞬时表达是成功的,为后续构建稳定分泌抗人CD28鼠-人嵌合抗体的CHO基因转染细胞株奠定了基础。