孕酮对正常生育和不明原因不育男性精子细胞内游离Ca~(2+)浓度的影响

目的:比较正常生育男性和不明原因不育男性患者精子细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)对孕酮(P)的反应性。方法:选择10例不明原因不育男性患者和9例正常生育男性,用上游法分离活力良好的精子并于体外获能2 h,将获能后精子与8.85μmol/L钙荧光探针Fluo-3/AM避光孵育40 min负载,将负载后的精子悬液与等量20%明胶混匀以制动精子,然后在激光扫描共聚焦显微镜下动态观察单个精子头部的[Ca2+]i基础水平以及10μmol/L P刺激对[Ca2+]i的影响。结果:不育组获能2 h后精子的[Ca2+]i基础水平显著低于生育组(P<0.01)。生育组精子经10μmol/L P刺激后,产生快速而短暂的[Ca2+]i升高,[Ca2+]i峰值水平显著高于其基础水平(P<0.05);而不育组精子经P刺激后,[Ca2+]i仅有微弱增加,其峰值水平与基础水平相比无统计学差异(P>0.05)。生育组由P激发的精子[Ca2+]i峰值水平以及[Ca2+]i升高幅度(峰值水平与基础水平之差)均显著高于不育组(P<0.01)。结论:不明原因不育男性患者精子[Ca2+]i对P的反应性降低,提示这些患者精子膜上负责Ca2+内流的非基因型孕激素受体可能存在功能障碍。     

青春期前苯甲酸雌二醇暴露对SD大鼠睾丸发育及功能的影响

目的 研究青春期前苯甲酸雌二醇(EB)暴露对SD大鼠睾丸发育及功能的影响.方法 21 d龄雄性SD大鼠,随机分为EB 0.1、100.0 μg/(kg·d)2个实验组(Aea和Aeb组)和1个对照组(AC组),于青春期前,即出生后第22 d(PND 22)实验组每日皮下注射相应剂量的EB,共14 d,对照组仅注射溶媒(玉米油).观察各组大鼠睾丸下降时间.于青春期晚期(PND 50)、性成熟后(PND 64)和成年期(PND 130)分批处死各组大鼠,称量睾丸质量,测定大鼠血清睾酮浓度,观察睾丸形态学改变以及PND 130大鼠附睾尾精子质量.结果 AC、Aea和Aeb组睾丸下降时间分别为出生后(27.00±0.89)d、(27.50±1.05)d和(43.17±1.72)d,其中Aeb组较AC组明显延迟(P<0.01).PND 50时,与AC组比较,Aeb组血清睾酮浓度明显降低(P<0.05),单侧睾丸质量减轻(P<0.01),生精小管发育较差、生精上皮中细胞数目减少、精子发生阻滞、间质细胞发育幼稚.PND 64时,与AC组比较,Aeb组单侧皋丸质量和睾丸组织形态学改变与PND 50时类似,但总体较PND 50时有所改善.PND 130时,与AC组比较,各实验组与对照组比较,单侧睾丸质量和睾丸组织形态学改变无明显差异,但Aeb组精子密度和精子活动率下降(P<0.05),a+b级精子比例降低(P<0.01).结论 青春期前小剂量EB暴露对SD大鼠睾丸发育及功能无明显影响,大剂量EB(100.0 μg/(kg·d)×14 d]暴露对大鼠睾丸发育及功能有明显的近期(PND 50和PND 64)和较远期(PND 130)毒性作用,该毒性作用随鼠龄增长而逐渐减退,其机制可能与间质细胞和支持细胞的发育及功能受损相关.     

脑胶质细胞瘤病人IL-2和sIL-2R表达及细胞免疫功能变化的意义

目的 研究脑胶质细胞瘤病人外周血中自细胞介素2（IL-2）、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）的表达以及红细胞免疫和T淋巴细胞亚群的变化规律．探讨它们之间的相互关系。方法 对55例脑胶质瘤病人及55例健康献血员．采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清IL-2、sIL-2R含量，免疫黏附法测定红细胞免疫活性及其调节功能，链亲和素一过氧化物酶（SP）一步法测定CD3、CD4、CD8细胞数。结果 脑胶质细胞瘤组IL-2含量较对照组显著性降低（P〈0.01），sIL-2R则显著性升高（P〈0．01）；红细胞C3b受体（RBC-C3bR）、红细胞免疫调节促进因子（RFER）亦显著性降低（P〈0．01），而红细胞免疫复合物（RBC-ICR）、红细胞免疫调节抑制因子（RFm）则显著性升高（P〈0．01）；CD3、CD4细胞数显著性降低（P〈0．001），而CD8无显著性差异（P〉0．05）。结论 脑胶质细胞瘤病人存在免疫功能低下；检测血清IL-2和sIL-2R含量、红细胞免疫功能及T细胞亚群活性，对脑胶质细胞瘤病人的免疫机制研究具有重要意义。     

黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响

目的：研究黄芪多糖对1型糖尿病小鼠胰腺β细胞总质量的影响。方法： 以低剂量链脲菌素(STZ)多次腹腔注射,建立1型糖尿病小鼠模型,每天分别用黄芪多糖(APS)100,200,400 mg·kg^-1或生理盐水腹腔注射,15,30 d时将小鼠处死。以免疫组织化学染色并复染观察胰岛炎性细胞浸润,以间接荧光免疫双标法检测Insulin/Ki67(Hoechst33258复染)、Insulin/Cleaved caspase-3的表达,观察胰腺细胞(包括β细胞)增生、β细胞新生、β细胞凋亡和β细胞总质量的变化,以半定量RT-PCR检验胰腺再生蛋白1 mRNA的表达水平,以ELISA法检测脾细胞IFN-γ和IL-4的分泌。结果：与对照组比较,APS处理组胰岛炎症减轻、β细胞总质量增加、新生胰岛增多、β细胞凋亡减少、Th1/Th2分泌因子比值下调,所有这些均与APS的剂量和使用持续时间密切相关。但关于胰腺的细胞增殖和β细胞增殖,APS处理组与对照组没有明显差别。结论：APS通过改善1型糖尿病小鼠的免疫功能增加胰腺β细胞总质量。     

精索静脉曲张不育患者的精液常规、精子动态参数和精浆生化指标分析

目的观察精索静脉曲张（VC）伴不育患者的精液质量和精浆生化水平的变化。方法利用计算机辅助精液分析系统（CASA）及酶免法分别检测52例VC不育患者、85例非精索静脉曲张不育患者和21例正常生育男性的精液常规、精子动态参数以及精浆酸性磷酸酶、精浆锌（Zn）、果糖、α-糖苷酶的含量。结果与对照组相比,VC组患者A级精子率、（A＋B）级精子率、精子直线速度（VSL）、直线性（LIN）、侧摆幅度（ALH）、精浆锌含量、α-糖苷酶的含量与对照组相比显著下降（P〈0.05）。与非VC不育组相比,VC不育组（A＋B）级精子率、精子直线速度（VSL）、侧摆幅度（ALH）、精浆锌含量、α-糖苷酶的含量也明显降低（P〈0.05）。并且随着精索静脉曲张程度的增加,VC患者A级精子率、（A＋B）级精子率、精子曲线速度VCL、直线速度VSL、直线性LIN、平均路径速度VAP、前向性STR、侧摆幅度ALH、精浆中锌含量、α-糖苷酶的含量有下降趋势。结论 VC能够降低精子活动率、精子动态活动能力以及改变了精浆微环境,从而导致男性生育力下降。     

孕酮对正常生育男性精子头部胞浆内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）的影响

目的：定量分析生育男性获能后单个精子的[Ca^2 ]i基础水平以及10μM孕酮刺激后的[Ca^2 ]i动态改变。方法：生育健康男子10例，手淫法留取精液。精液液化后，应用上游技术分离活动良好的精子，之后将精子悬液置于3‘70C培养2h使之获能。获能后精子移人Petri培养皿，每皿加入终浓度为8．85μmoL／L的钙荧光探针Fluo-3／AM，370C避光孵育40min。     

脊椎血管瘤综合治疗疗效评价

目的　评价放射治疗和综合治疗在椎体血管瘤治疗中的地位和作用。方法　回顾性分析 2 2例有症状椎体血管瘤临床症状、影像学表现、治疗方法以及治疗后随访情况。结果　本组 2 2例单纯放疗 10例 ,综合治疗 12例 ,治疗后 19例症状完全缓解 ,3例部分缓解 ,无明显并发症及恶性变 ,无治疗后复发。结论　对脊椎血管瘤采用术前介入法栓塞供血动脉并椎体减压术结合术后放疗的综合治疗方法具有快速缓解压迫、减少术中出血、疗效确切的优势。     

人降钙素基因相关肽重组腺相关病毒在原代培养大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞中的表达及其作用

目的:观察腺相关病毒载体介导的人降钙素基因相关肽(hCGRP)基因在原代培养的大鼠阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞的表达及其作用,探讨其应用于勃起功能障碍(ED)基因治疗的可行性。方法:原代培养的SD大鼠CCSM细胞随机分为4组:实验组、空病毒组、示踪剂组和对照组,分别以可分泌表达hCGRP重组腺相关病毒VssH-GCMV-hCGRP、空病毒VssHGCMV和表达绿色荧光蛋白(GFP)重组腺相关病毒VssCMV-GFP进行体外转染或不予任何处理。采用斑点印迹试验检测培养液中的hCGRP和放射免疫法检测转染细胞中的环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)水平,观察hCGRP和示踪剂GFP的表达及其对CCSM细胞的影响。结果:重组腺相关病毒载体能有效地将外源基因hCGRP导入大鼠CCSM细胞并稳定表达,与空病毒组和对照组相比,该病毒明显刺激大鼠CCSM细胞中cAMP水平升高[(48.7±1.1)nmol/L对(12.3±1.2)nmol/L和(7.8±1.4)nmol/L,P均<0.01],培养液中可检测到免疫反应性hCGRP。结论:可分泌表达生物活性肽重组腺相关病毒基因转移系统可有效进行多肽类在CCSM细胞过表达,并影响该细胞的cAMP水平,可被应用于ED的基因治疗。     

胰岛α细胞量在糖尿病发展过程中的变化及其机制

目的 探讨胰岛α细胞量随糖尿病发展的变化及其机制。方法 以多次低剂量链脲菌素诱导形成糖尿病小鼠,在糖尿病第4、12、20周时将其放血处死,并设同龄正常对照组。以Glucagon与Ki67,或BrdU、或Cleaved-Caspase 3、或TUNEL的免疫荧光双标检测胰岛α细胞量的变化、α细胞的增生和凋亡;以Glucagon、Neurogenin 3与MafA免疫荧光三标及Western blot检测胰岛α细胞的新生。结果 糖尿病发展期间胰岛α细胞量逐渐增加,与正常对照比较差异有统计学意义 （P<0.05）;期间胰岛α细胞并未发生明显增生和凋亡,但胰岛内出现了许多Neurogenin 3阳性细胞及Glucagon、Neurogenin 3、MafA共阳性细胞。结论 在糖尿病发展过程中胰岛α细胞量不断增加,其机制与α细胞新生密切相关。