前炎症细胞因子对不同年龄小鼠脑室周带神经元存活的影响

探讨前炎症细胞因子(PIC)丙种干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的混合物对不同年龄小鼠脑神经元存活的影响及神经元和神经胶质细胞在对抗炎症反应时的相互关系。采用抗凋亡蛋白Bcl-2免疫组织化学染色以及GFAP/Bcl-2免疫荧光双重标记技术,观察了小鼠单次注射联合细胞因子入侧脑室后,Bcl-2阳性神经元在脑内的分布、神经元Bcl-2的表达和时程变化以及GFAP阳性星形胶质细胞与Bcl-2阳性神经元之间的关系。结果表明,Bcl-2阳性神经元主要分布在第一、二运动皮质第ⅴ层、躯体感觉皮质、隔核、斜角带核、海马和中脑红核等结构。Bcl-2阳性产物位于胞质及突起内,呈棕色,胞核不显色。对照组中Bcl-2阳性神经元在PBS注射2d后,老龄动物脑皮质及海马内Bcl-2表达上调,与青年动物相比有显著性差异(P<0.01)。实验组中细胞因子注射2d后,每个年龄组动物皮质及海马内Bcl-2表达均上调,胞质及突起内Bcl-2阳性产物着色加深,持续到注射后4d,与对照组比较存在显著性差异。与青年组动物比较,老龄动物脑皮质和海马内Bcl-2阳性细胞数目和光密度在PIC注射两天后明显增加,存在显著性差异(P<0.01)。此外,GFAP/Bcl-2染色结果显示皮质、海马和胼胝体内激活的星形胶质细胞表达Bcl-2,部分Bcl-2阳性神经元周围被星形胶质细胞的突起包绕或接触。以上结果提示老龄动物脑的神经元对于炎症刺激的易感性增强。表达Bcl-2的星形胶质细胞可能参与了自身保护机制的调节,且神经元和星形胶质细胞在参与脑内的免疫调节和保护性反应中存在相互作用。     

神经支配对兔后肢缺血诱导侧支血管生长过程中巨噬细胞标记物、细胞间黏附分子和血管细胞黏附分子表达的影响

目的:通过比较去除支配血管壁的神经,观察神经支配对侧支血管巨噬细胞标记物(RAM11)、细胞间黏附分子(ICAM)和血管细胞黏附分子(VCAM)表达的影响.方法:20只新西兰大白兔,左侧行股动脉结扎,右侧行股动脉结扎加坐骨神经和股神经切除,7 d后将动物处死,应用免疫荧光组织化学技术,观察单纯结扎和结扎加去神经侧RAM11、 ICAM和VCAM在侧支血管的表达变化,兔前肢大小相似的正常血管用作正常对照.结果:正常血管ICAM和VCAM的表达非常低,外膜中可见数目很少的RAM11阳性细胞;股动脉结扎侧,侧支血管ICAM、VCAM和RAM11的表达均明显上调,RAM11阳性细胞主要在外膜聚集,在中膜也可见,ICAM表达主要在血管内皮细胞,而VCAM除了在血管内皮细胞有表达外,在外膜也有表达;股动脉结扎加去神经侧,ICAM、 VCAM和RAM11的表达比股动脉结扎侧有所下调,其荧光强度的比较有统计学意义.结论:在缺血诱导的兔后肢侧支血管生长模型中,去除血管壁的神经导致了炎症分子ICAM、 VCAM和RAM11的阳性细胞减少,表明血管壁神经对RAM11、 ICAM和VCAM的表达调节有重要影响.     

胎儿左心室壁内微血管特征

用血管铸型扫描电镜法观察胎儿左心室壁内各级微血管,发现心肌不同层次内的毛细血管口径、间距有差异。讨论了微血管结构特征与功能之间的关系。     

大鼠脊髓全横断后脑源性神经营养因子及其高亲和力受体在运动皮质表达的变化

目的：研究大鼠脊髓全横断后脑源性神经营养因子（BDNF）及其高亲和力受体（TrkB）在运动皮质表达的变化，为进一步探索脊髓损伤后再生修复机制和神经营养因子治疗脊髓损伤提供实验依据。方法：雄性SD大鼠42只随机分为3组：1.脊髓横断组：动物脊髓在胸9节段完全横断，按存活时间不同分为术后3、7、14、21及28d组；2.假手术组（只行椎板切除术）；3.正常对照组。动物到达存活时间点后，应用免疫组织化学ABC方法和图像分析技术检测TrkB及BDNF在运动皮质的表达和分布。结果：对照组和实验组运动皮质TrkB和BDNF阳性细胞主要分布在第5层，第3、4、6层也有少量阳性细胞。脊髓全横断后TrkB和BDNF的表达逐渐增高，于术后21d达高峰，28d回到正常水平，且TrkB表达上调早于BDNF。结论：脊髓全横断后运动皮质对BDNF的需求增加，内源性BDNF的增加可能有利于受损的皮质脊髓束神经元的存活与再生；在损伤早期给予外源性BDNF可能更有利于受损的皮质脊髓束神经元。     

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠后肢动脉生成过程中eNOS、Ki67及CD11b表达的影响

目的:探讨大鼠后肢动脉生成过程中eNOS、Ki67和CD11b的表达及N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对eNOS、Ki67、CD11b表达的影响.方法:18只健康SD大鼠,雌雄性各半,随机分为假手术组、模型组及L-NAME组.模型组采用大鼠股动脉结扎诱导动脉生成动物模型;L-NAME组在建立动物模型的基础上,腹腔注射L-NAME干预;假手术组除不结扎股动脉外,其他步骤与模型组相同.采用免疫荧光组织化学显色法检测血管eNOS、Ki67、CD11b等蛋白的表达.结果:eNOS主要表达于血管内皮细胞,Ki67、CD11b可表达于血管壁各层,模型组eNOS、Ki67、CD11b免疫荧光强度较假手术组强,L-NAME组eNOS、Ki67、CD11b免疫荧光强度较模型组弱.结论:在大鼠后肢动脉生成过程中,eNOS、Ki67和CD11b蛋白在血管大量表达,L-NAME可下调eNOS的表达并抑制血管增殖及巨噬细胞的浸润.     

八年制医学生主动参与式组胚实验教学初探

目的培养八年制医学生自主学习能力,提高创新思维和科研实践能力。方法自主选择学习组织切片、自制切片和血涂片及采集胎鼠标本一系列的组织胚胎学实验。结果通过参与组织切片、血涂片的制作学习及胎鼠采集,所有学生都熟悉了切片、血涂片制作及胎鼠采集的基本步骤和操作技术,并制作出效果良好的教学片。结论显著提高了学生的自主学习能力和科研创新素质。     

神经与血管重塑

神经和血管有着非常密切的关系,其发生有着共同的机制,两者之间互为调控.Carmeliet等[1]的研究表明在神经和血管发生的过程中,血管和周围神经紧密缠绕,神经指导动脉像树一样生长,而动脉供应神经氧和血液.在胚胎的发育过程中神经和血管相伴相生,神经的生长发育需要血管来提供营养物质,如果血管发生病变可能会影响到神经的功能和相应神经因子的分泌与表达;同时血管生理功能的完成需要神经的参与[2].     

基于解剖分析的梨状窝瘘微创手术方法探讨

目的　探讨儿童梨状窝瘘解剖学特征,比较在此基础上设计的改良手术方法与传统手术的疗效。 方法　回顾分析2012年7月~2018年7月诊断为梨状窝瘘的54例患儿,手术入路为甲状腺或外瘘口平面34例（传统组）,手术入路为甲状软骨下角平面20例（改良组）,研究改良组术中梨状窝瘘管解剖特点。比较两组手术切口长度、手术时间、术中出血量、住院时间、根治率,并发症发生率及术后复发率。 结果　梨状窝瘘管分为漏斗部和移行部,漏斗部固定位于甲状软骨下角后或侧方,瘘管走行有3种类型：终止于甲状腺上极、经甲状腺旁到达皮肤、直接到达皮肤形成外瘘口。改良组切口长度、手术时间、术中出血及住院时间、术后复发率均小于传统组（P＜0.01）。术后随访6~18月,传统组复发率29.4%,改良组未见复发。 结论　经甲状软骨下角入路的梨状窝瘘管切除术,具有手术路径短、瘘管易寻、术后恢复快,切口美观,复发率低等优点,是可以借鉴的一种梨状窝瘘根治手术方法。     

脑源性神经营养因子及其受体TrkB在大鼠脊髓中间带外侧核的定位

为了研究脑源性神经营养因子(BDNF)及其特异性受体TrkB在脊髓中间带外侧核的分布,从形态学上探讨BDNF在交感神经通路中发挥调质作用的神经结构基础。本实验中注射逆行示踪剂快蓝至单侧颈上节,然后对脊髓中间带外侧核进行BDNF和TrkB的免疫荧光染色。结果(1)逆行标记细胞广泛分布于注射侧第8颈髓至第5胸髓(C8～T5)的中间带外侧核,其中在T1T3分布相对较集中,成簇排列;(2)部分逆行标记的交感节前神经元胞体和树突周围可见BDNF免疫阳性(BDNFir)终扣,呈点状或串珠状排列;(3)大多数交感节前神经元为TrkB免疫阳性。以上结果提示,BDNF可能作为神经递质样物质或调质在交感神经通路中通过作用节前交感神经元发挥作用     

不同年龄大鼠骨髓基质干细胞的增殖特性

为了探讨年龄差异是否对大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的增殖有影响。本研究采用免疫组织化学和苏木素染色检测体外培养的不同年龄大鼠BMSCs增殖能力的变化。结果显示:在培养的第5d,新生组增殖率为(78.7±5.3)%,成年组为(72.0±3.3)%,老年组为(65.4±3.9)%;在第7d增殖率分别是(78.3±3.2)%、(67.3±3.9)%和(52.6±6.0)%;在第9d,分别是(66.9±3.3)%、(46.4±3.9)%和(39.1±2.2)%。统计分析表明,在培养的第5、7、9d三个年龄组BMSCs的增殖率均有显著性差异(P<0.05)。结果提示:不同年龄的骨髓基质干细胞在体外均能快速增殖,但随着年龄的增大,其增殖能力明显下降。