cyclinD1、CDK4和Rb在大肠癌中的表达及其意义

目的探讨细胞周期调控因子在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法对70例大肠癌组织及距癌灶3cm以外的癌旁组织、10cm以外的正常组织中cy-clinD1、CDK4和Rb进行检测。结果cyclinD1和CDK4在大肠癌中过度表达,分别为36/70(51.4%)和28/70(40.0%),并与肿瘤的分化程度呈反比,有淋巴结转移的大肠癌,其cyclinD1和CDK4的阳性率分别为70.0%和60.0%,无淋巴结转移的大肠癌阳性率分别为44.0%和32.0%,两者相比差异有显著性(P<0.05)。Rb在大肠癌、癌旁及正常组织中的表达分别为65.7%、78.6%和85.7%。正常组织与癌组织中Rb的阳性率差异有显著性(P<0.01)。cyclinD1与CDK4呈正相关关系(P<0.05)。结论cy-clinD1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;大肠癌的发生机制涉及cyclinD1、CDK4和Rb调节环路中多个基因的异常。     

短发夹RNA对胰腺癌细胞PANC-1突变型K-ras基因表达的影响

目的:研究短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对人胰腺癌细胞PANC-1中突变型K-ras基因表达的抑制作用.方法:构建特异性针对胰腺癌PANC-1细胞突变型K-ras基因的重组质粒pGensil-1-P1,阴性对照质粒pGensil-1-HK并采用脂质体介导的方法转染胰腺癌细胞.应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)检测K-ras基因mRNA和蛋白的表达,CCK-8方法测量细胞生长曲线.并建立人胰腺癌细胞PANC-1裸鼠皮下移植瘤模型,分别注射Pgenesil-1-P1、Pgenesil-1-HK质粒,动态观察并处死裸鼠计算肿瘤体积.结果:测序证实质粒表达载体构建成功,短发夹RNA(shRNA)使胰腺癌细胞PANC-1突变型K-ras基因的mRNA较未治疗组、阴性对照组相比明显减少(P=0.01);未治疗组、阴性对照组及治疗组的K-ras蛋白表达率分别为100%,99.0%±0.73%,39.9%±2.1%,前两组K-ras蛋白表达差异无统计学意义,治疗组较未治疗组K-ras蛋白表达下调了约60.1%;细胞生长受到明显抑制(P=0.02);经重组质粒治疗14 d后,裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,相较于对照组瘤体明显缩小(P=0.03).结论:shRNA对特异性转染组的胰腺癌细胞的突变K-ras基因表达有抑制作用,使细胞以及裸鼠移植瘤的生长受到抑制.     

Oncol2012: 初始T细胞来源的效应细胞在荷B16黑色素瘤小鼠免疫治疗中的应用

背景：恶性肿瘤的过继性细胞移植免疫治疗已投入临床使用多年。如何提高效应细胞的杀伤能力,如肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),已经成为临床肿瘤免疫治疗的一个重要的努力方向。因此,我们探索了一种新的方法通过使用一定比例混合的CD4 、CD8 亚种群的初始T淋巴细胞来制备更有效的特异CTL并评价其肿瘤杀伤效率。 方法：实验使用荷B16恶性黑色素瘤的C57BL/6老鼠,并给予CTX腹腔注射进行预处理。分别评估CTX腹腔注射对肿瘤生长的影响情况及对肿瘤微环境的调节情况。应用磁珠分别阴性分选初始T细胞和总T细胞。在体外环境中检测并对比不同种T细胞的增殖能力以及细胞因子分泌水平。分别由初始T细胞（初始CD4 T：初始CD8 T=2:1）和总T细胞诱导分化得到肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞。经CTX预处理的实验小鼠给予肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞回输治疗,回输后检测效应细胞的归巢能力,检测肿瘤组织中IL-2、IFN-r、颗粒酶 B, 及穿孔素mRNA 水平,并测量肿瘤大小绘制生存曲线。 结果：CTX预处理组较对照组肿瘤生长情况无差异,但CTX预处理后较对照组可明显降低实验鼠脾脏中Treg细胞水平,以及血清中TGF-β1和IL-10 的水平（P＜0.05）。在体外初始T细胞较总T细胞表现出更强的增殖能力及细胞因子分泌能力（P＜0.05）。由初始T细胞诱导产生的效应细胞与由总T细胞诱导产生的效应细胞在归巢能力方面有显著差异（P＜0.05）,肿瘤组织中IL-2、IFN-r、颗粒酶 B 及穿孔素mRNA 水平存在显著差异（P＜0.05）。 结论：依据上述结果,我们认为由初始T细胞诱导产生的效应细胞拥有更强的增值能力、更强的归巢能力及细胞因子分泌水平,所以由初始T细胞诱导产生的效应细胞可以介导产生更强的抗肿瘤效应。     

中高位直肠癌合并急性肠梗阻的术式选择

目的 探讨中高位直肠癌合并急性肠梗阻的术式选择.方法 回顾性分析2000年7月～2007年7月收治的43例中高位直肠癌合并急性肠梗阻的临床资料.结果 一期切除吻合37例,Hartmann术式4例,姑息性结肠造口2例,无吻合口瘘发生.结论 中高位直肠癌合并急性肠梗阻应采取个体化手术治疗方案.适当选择适应证,注意术中操作细节,行一期切除吻合是安全可行的,不增加术后并发症发生率.     

聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子预防化疗后中性粒细胞减少症的多中心上市后临床研究

  目的  探究聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子（pegylated recombinant human granulocyte-colony stimulating factor,PEGrhG-CSF）在多个化疗周期中预防中性粒细胞减少症的有效性和安全性。  方法  本研究为多中心、前瞻性、开放性单臂临床试验,对需接受多周期化疗的肺癌、卵巢癌、结直肠癌等恶性实体瘤患者连续2~4个周期预防性给予PEG-rhG-CSF。  结果  PEG-rhGCSF初级预防给药后,4级中性粒细胞减少症的发生率从第1个化疗周期的4.76%（13/273）分别降至2~4个周期的1.83%（5/ 273）、1.15%（2/174）和2.08%（2/96）,3级中性粒细胞减少症的发生率从第1个化疗周期的11.36%（31/273）分别降至2~4个周期的6.23%（17/273）、2.87%（5/174）和3.13%（3/96）。第1次随访发热性中性粒细胞减少症（febrile neutropenia,FN）的发生率为0.73%（2/273）;FN持续时间中1例为2 d,1例为5 d;第2~4次随访的FN发生率均为0;次级预防给药后,4级中性粒细胞减少症的发生率从筛选期的25%（7/28）,分别降至后续1~3个周期的3.57%（1/28）、0（0/28）和6.67%（1/15）,3级中性粒细胞减少症的发生率则从71.43%（20/28）分别降至10.71%（3/28）、14.29%（4/28）和0（0/15）。研究中抗生素的使用率为10.48%（44/420）。  结论  每个化疗周期应用1次PEG-rhG-CSF可有效预防恶性实体瘤患者化疗后中性粒细胞减少症的发生,多个周期应用可以显示同样的疗效,且安全性良好。      

临床医学虚拟仿真实验教学项目的建设与应用探讨——以“生命支持综合实训系统”为例

吉林医药学院利用现代信息化技术结合急救医学教育的现状,以培养医学人才岗位胜任能力为目标,深入开展了"生命支持综合实训系统"虚拟仿真实验教学项目建设,构建了"三阶段、三层次"的教学体系,实现了生命支持实验教学"以实为主、虚实结合、能实不虚"。     

Rb、β及γ-catenin蛋白在进展期胃癌及转移淋巴结癌细胞中的表达及临床意义

目的 探讨Rb、β与γ-catenin在进展期胃癌及转移淋巴结癌细胞再表达情况及其与临床病理诸因素的关系.方法 应用免疫组织化学染色方法 检测Rb在肿瘤原发灶及β与γ-catenin在86例进展期胃癌原发灶及其转移淋巴结癌细胞的表达情况.结果 胃癌原发灶癌细胞中65.12％出现Rb阳性,38.37％转移淋巴结癌细胞出现β与γ-catenin再表达阳性,Rb与肿瘤分化程度密切相关(P<0.05),β与γ-catenin在转移淋巴结癌细胞再表达阳性与肿瘤分化程度密切相关(P<0.05),γ-catenin在转移淋巴结癌细胞再表达与肿瘤病理类型密切相关(P<0.05),β-catenin在转移淋巴结癌细胞再表达与肿瘤病理类型无关(P>0.05),Rb表达与β-catenin在转移淋巴结癌细胞中再表达情况相关,与肿瘤病理类型、大小、浸润程度等因素无关(P>0.05).γ与β-catenin在转移淋巴结癌细胞再表达相关(P<0.05),Rb在肿瘤原发灶癌细胞表达和β与γ-catenin在转移淋巴结癌细胞再表达无关(P>0.05).β与γ-catenin再表达阳性者3年生存率与再表达阴性者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 Rb表达与进展期胃癌发展过程密切相关,与β-catenin在转移淋巴结癌细胞再表达有关,β与γ-catenin在转移淋巴结癌细胞再表达是进展期胃癌发生过程中的重要事件,二者协同发挥作用,并对癌细胞在转移灶中聚集生长起重要作用,联合评价其功能具有重要临床意义.     

胃肠道平滑肌肿瘤突变型p53基因产物的表达及其与临床病理的关系

应用细胞免疫荧光染色技术及流式细胞术，对５５例胃肠道平滑肌肿瘤石蜡组织块的ｐ５３表达进行定量分析。结果表明，正常胃肠道平滑肌组织ｐ５３表达均为阴性。１４例平滑肌瘤，仅有２例出现过度表达（１４％）；潜在恶性平滑肌肿瘤１２例，多数为过度表达（７５％）：平滑肌肉瘤２９例中，则有２６例（９０％）出现过度表达（Ｐ＜０．００５）。从平滑肌瘤、潜在恶性平滑肌肿瘤到平滑肌肉瘤Ⅰ、Ⅱ级，ｎ５３表达量显著递增（Ｐ＜０．００５）。ｐ５３表达量随肿瘤细胞分裂相、异形性、密度的增高也有明显增高（Ｐ＜０．００５）。ｐ５３低表达者５年生存率为８５％，而过度表达者为４８．５％。提示，胃肠道平滑肌肿瘤一旦出现ｐ５３过度表达应考虑为恶性；ｐ５３表达可能和平滑肌瘤向平滑肌肉瘤的转化密切相关；ｐ５３表达可作为判断病人预后的一项客观指标。     

胸部火器伤瞬时及早期心血管效应的神经机制研究

笔者曾对胸部枪伤的心血管效应做了初步研究 ,发现胸部火器伤后瞬时的心血管效应可能与神经反射有关[1] 。本实验用预扎肋间动脉实验模型及切断迷走神经、减压神经的方法进一步研究胸部火器伤瞬时及早期心血管效应的神经机制。一、材料与方法1.动物及分组处理 :健康家兔 18只 ,雌雄不拘 ,体重 (2 .75± 0 .2 5 )ｋｇ ,随机分为Ａ组 :胸部贯通伤组 (模型组 ) ,Ｂ组 :迷走神经切断致伤组 ,Ｃ组 :减压神经切断致伤组。静脉麻醉后 ,行左心室、颈外静脉、股动脉插管 ,置心电图导线 ,连接八道生理记录仪连续监测。家兔左侧卧位 ,用 5 .5 6ｍｍ小口…