苦参碱诱导K562细胞磷脂酶A2活性与表达的改变

目的：研究磷脂酶A2在苦参碱促K562细胞分化的信号转导中的作用。方法：利用磷脂酶A2的水解作用，以掺入大肠杆菌膜的[^3H]标记的油酸为酶解底物，检测K562细胞内磷脂酶A2的活性。以半定量的RT-PCR方法检测K562细胞内磷脂酶A2的mRNA水平。结果：0．1mg/ml浓度的苦参碱作用K562细胞后，磷脂酶A2的活性与表达量的增高。结论：磷脂酶A2作为细胞内的重要信号分子，通过活性与表达量的改变参与苦参碱促K562细胞分化的信号转导。，     

细胞周期和胞内钙离子浓度在Ro13-7410作用HL-60细胞中的变化

本文用流式细胞术和Ｆｕｒａ－２测定胞内钙离子方法分别观察了Ｒｏ１３－７４１０作用人白血病ＨＬ－６０细胞不同时间的细胞周期分布以及细胞内钙离子浓度的变化。结果显示Ｒ０１３－７４１０将多数细胞阻止在Ｇｚ／Ｍ期，同时伴随了胞内钙离子的明显上升，且与Ｒｏ１３－７４１０对Ｈ１－６０细胞的诱导凋亡和分化作用有关。     

胶质细胞源性神经生长因子家族成员及其受体介导的胞内信号转导

GDNF家族成员是TGF－β生长因子超家族的一个亚家族，在神经元的存活，生长，分化，再生，抽突生长，神经损伤和神经退行性疾病中都有重要作用。神经细胞中存在GDNF的RFT依赖性和非RET依赖性两条信号转导途径。本文就GDNF家族成员及其受体介导的胞内信号转导机制研究的最新进展进行简述。     

苦参碱对白血病细胞癌基因和细胞周期调控蛋白表达的影响

目的：探讨在苦参碱诱导下,白血病细胞株K562增殖和分化时相关癌基因及细胞周期调控蛋白表达表达的改变及意义。方法：应用分子生物学Norhern Blot和DotBlot杂交技术检测人红白细胞病细胞株K562在苦参碱作用后的c-myc,N-ras及p53mRN表达;同时用Western BLotting-ECL分析苦参碱作用前、后24、48、72小时K562细胞Cyclin D1,CyclinE,Ddk2,Cdk5的不同表达水平。结果：在增殖的K562细胞（培养48小时）中,伴随着DNA合成增加,CyclinE和Cdk2保持高表达;而在苦参碱作用24小时分化启动的细胞中,随着DNA合成减少,N-ras,p53mRNA表达增强;c-myc mRNA表达明显受抑;同时CyclinD,Cdk5表达增强,结论：若参碱抑制K562细胞增殖并诱导分化可能与相关癌基因表达和CyclinD1/Cdk5,CyclinE/Cdk2不同表达有关。     

苦参碱作用K562细胞表面分化抗原表型的改变

近年来 ,肿瘤诱导分化剂的研究日渐增多 ,从中药和天然药物中寻找和提取诱导分化剂是一种新途径。苦参碱是传统中药苦参的有效成分 ,文献报道具有抗癌活性[1] ,对白血病细胞有抑制生长和诱导分化作用 [2 ]。本课题组在前期研究的基础上 [3,4 ]通过流式细胞仪检测进一步表明 :一定浓度的苦参碱可诱导 K5 62细胞向成熟方向分化 ,并具有多向诱导分化作用。1　材料与方法1 .1　苦参碱 :纯度 99% ,由实验室自备。1 .2　细胞培养 :K5 62细胞在含 1 0 %新生小牛血清的 RMPI- 1 640培养液中传代培养。1 .3　苦参碱对 K5 62细胞的作用 :收集对数生…     

苦参碱对人白血病K562细胞胞内酪氨酸蛋白磷酸化的影响

目的：观察苦参碱作用K562细胞后胞内酪氨酸蛋白磷酸化变化，探讨苦参碱抑制K562细胞增殖和诱导其分化的胞内信号传导机制。方法：采用抗磷酸化酪氨酸单克隆抗体PY20对不同浓度苦参碱作用K562细胞12小时的胞内酪氨酸蛋白磷酸化水平进行Western blot检测分析。结果：0．1mg／ml苦参碱作用K562细胞12小时后。western blot灰度扫描显示有6条带密度发生变化，提示此过程中至少6种酪氨酸蛋白磷酸化水平发生改变，其中上调4种，下调2种。随着苦参碱作用浓度的增加，上调的4种酪氨酸蛋白磷酸化水平均有下降。此结果表明细胞信号传导通路中胞内酪氨酸蛋白磷酸化在苦参碱诱导K562细胞分化中起重要作用。     

细胞周期和胞内钙离子浓度在Ro13—7410作用HL—60细胞中的 …

本文用流式细胞术和Ｆｕｒａ－２测定胞内钙离子方法分别观察了Ｒｏ１３－７４１０作用人白血病ＨＬ－６０细胞不同时间的细胞周期分布以及细胞内钙离子浓度的变化。结果显示Ｒｏ１３－７４１０将多数细胞阻止在Ｇ２／Ｍ期，同时伴随了胞内钙离子的明显上升，且与Ｒｏ１３－７４１０对Ｈ１－６０细胞的诱导凋亡和分化作用有关。     

未知KL基因cDNA片段的末端快速扩增

目的：为研究白血病K562细胞中未知KL基因的结构与功能，对其cDNA片段进行全长克隆。方法：采用3种RACE策略，对未知KL基因的cDNA片段进行末端的快速扩增：结果：网上LabOnWeb的instantRACE与传统的3’—RACE使未知KL基因的cDNA片段向5’末端与3’末端各自延伸了156bp与350bp。结论：通过末端快速扩增，表明白血病K562细胞中未知KL基因的全长cDNA大小约为1Kb，这为我们进行该基因的全长克隆，进而研究其结构与功能奠定了基础。