慢病毒载体有效转移并感染心肌成纤维细胞

背景:心肌成纤维细胞过度增殖、胶原合成增多是心肌纤维化的主要病理基础.慢病毒载体系统是一种新型的基因治疗转移系统,能够高效感染分裂期和非分裂期细胞.目的:建立慢病毒载体有效转移并表达于大鼠心肌成纤维细胞的方法,为利用慢病毒载体介导心肌成纤维细胞的基因靶向治疗奠定基础.设计、时间及地点:对比观察,实验予2008-08/10在华中科技大学同济医学院附属协和医院老年病及上海吉凯公司实验室完成.材料:新生1～3日的SD大鼠乳鼠30只;Lentivirus载体、Enhanced Infection Solution(ENi.S)、Polybrene均为上海占凯基因化学技术有限公司产品.方法:采用差速贴壁法培养乳鼠心肌成纤维细胞,在DMEM加入3个梯度Lentivirus感染细胞,将病毒复感染指数为200,20,2的3组细胞,每组分别加入①Lentivirus.②在细胞感染时添加polybrene提高感染效率.⑨在上述基础上加入具有促进病毒感染的细胞增强液(Enhanced Infection Solution(ENi.S)),感染4 d.主要观察指标:①心肌成纤维细胞形态特征.②倒置显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况及感染效率.结果:成功建立心肌成纤维细胞培养模型,当慢病毒对心肌成纤维细胞的复感染指数为20时,可以达到80%的感染效率,然而必须在培养基内加入多聚阳离子转染试剂Polybrene,以提高慢病毒载体的感染效率.结论:慢病毒载体较易感染心肌成纤维细胞,是具有发展潜力的心肌成纤维细胞基因靶向治疗的新载体.     

冠心病患者载脂蛋白E基因型与血脂、脂蛋白水平的相关性

目的 :探讨冠心病 (CHD)患者载脂蛋白E(apoE)基因型与血脂、脂蛋白水平的相关性。 方法 :应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性法 (PCR RFLP) ,检测 119例CHD患者和 112例正常人 (对照组 )的apoE基因型 ;按常规方法测定血脂及脂蛋白水平。结果 :CHD组及对照组共检出 6种基因型 ,分别为 :ε2 /2、ε2 /3、ε3/3、ε3/4、ε4/4、ε2 /4 ;CHD组ε3/4基因型及ε4等位基因频率均显著高于对照组 (分别为P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;CHD组ε2 /3、ε3/3、ε3/4基因型之间胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)水平差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :apoE3/4基因型明显升高CHD患者TC、LDL C水平 ;apoE基因多态性可能通过影响血脂水平而影响CHD的发生     

受体细胞参与移植动脉内膜增生的研究

目的研究大鼠移植动脉新生内膜细胞Sty基因的表达，探讨受体细胞在移植动脉内膜增生中的作用。方法建立大鼠腹主动脉移植模型，分为4组：雌雄同系移植组、雌性异系移植组、雄性异系移植组、雌雄异系移植组。移植术后10周时，取移植动脉标本，进行病理组织学观察，测量其内膜厚度和中膜厚度，分析移植动脉内膜增生情况；采用显微切割技术收集新生内膜细胞，用PCR方法检测Sry基因的表达。分析新生内膜细胞与受体细胞的关系。结果异系移植组移植动脉内膜显著增生，动脉壁内膜厚度及内膜／中膜厚度比均显著高于同系移植组（P〈0．01）；而同性或异性异系移植组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。PCR分析显示，雄性异系移植组和雌雄异系移植组在242bp处均有1条特异性扩增条带，而雌性异系移植组则无相应的核酸扩增条带。结论受体细胞作为移植物血管新生内膜细胞的来源，参与移植动脉内膜增生及移植物动脉硬化。     

福辛普利对X综合征患者冠脉血流储备的影响

目的应用彩色多普勒超声仪检测冠状动脉血流储备(coronary flow reserve,CFR),观察福辛普利对X综合征患者CFR的影响. 方法选取26例X综合征患者,比较福辛普利(5mg或10mg)治疗前后患者血压、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、内皮素(ET-1)、静息状态时患者冠状动脉的基础血流速度(bFV)、潘生丁注射后的最大血流速度(mFV)及冠状动脉血流储备(CFR)的变化. 结果福辛普利治疗6个月后,X综合征患者的SBP、DBP、TC、LDL-C、TG水平轻度下降(P＞0.05),ET-1水平显著下降,从(103.5±9.7)pg/ml到(77.5±12.0)Pg/ml(P＜0.05);患者的bFV改变不明显(P＞0.05),而mFV从治疗前的(57.2±8.4)cm/s上升到(72.1±7.6)cm/s(P＜0.05),CFR从治疗前的2.52±0.56上升到3.32±0.44(P＜0.01). 结论应用福辛普利治疗X综合征患者可有效改善患者的内皮功能和CFR.     

不稳定型心绞痛与稳定型心绞痛血浆组织因子途径变化的观察

目的　观察不稳定型心绞痛和稳定型心绞痛患者体内组织因子 (TF)途径的变化 ,反映不同程度冠心病血管内的促凝活性。方法　实验分 3组 ,不稳定型心绞痛 (n=19) ,稳定型心绞痛 (n=2 3)和对照组 (n=2 0 )。用双夹心EL ISA法分别测定其血浆 TF抗原水平。结果　不稳定型心绞痛 (UAP)组血浆 TF抗原水平高于稳定型心绞痛 (SAP)组和对照组 (35 .2 3± 12 .15 ,2 7.6 5± 10 .37,2 5 .36± 13.2 4 pg/ml,P<0 .0 1)。SAP组与对照组相比差异无显著意义。结论　血浆 TF抗原水平在 UAP患者中是增高的 ,血液呈现高凝状态。     

奥美沙坦酯与缬沙坦治疗中青年原发性高血压的对照研究

目的 比较奥美沙坦酯和缬沙坦治疗中青年原发性高血压的疗效和安全性.方法 90例中青年原发性高血压患者随机接受奥美沙坦酯20 mg或缬沙坦80 mg口服治疗,每日1次,总疗程8周.对其降压效果进行观察比较.结果 治疗过程中奥美沙坦酯组2例因头痛和咳嗽退出试验,缬沙坦组1例因头痛退出.治疗前与治疗2、4、6、8周组间SBP和DBP差异均无统计学意义(P均>0.05),治疗2、4、6、8周与组内治疗前比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).奥美沙坦酯组和缬沙坦组降压总有效率分别为86.0%(37/43)和84.1%(37/44),组间差异无统计学意义(χ2=0.065,P>0.05).结论 治疗中青年轻中度原发性高血压,奥美沙坦酯和缬沙坦疗效和不良反应均类似.     

奥美沙坦酯与缬沙坦治疗中青年原发性高血压的对照研究

目的 比较奥美沙坦酯和缬沙坦治疗中青年原发性高血压的疗效和安全性.方法 90例中青年原发性高血压患者随机接受奥美沙坦酯20 mg或缬沙坦80 mg口服治疗,每日1次,总疗程8周.对其降压效果进行观察比较.结果 治疗过程中奥美沙坦酯组2例因头痛和咳嗽退出试验,缬沙坦组1例因头痛退出.治疗前与治疗2、4、6、8周组间SBP和DBP差异均无统计学意义(P均>0.05),治疗2、4、6、8周与组内治疗前比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).奥美沙坦酯组和缬沙坦组降压总有效率分别为86.0%(37/43)和84.1%(37/44),组间差异无统计学意义(χ2=0.065,P>0.05).结论 治疗中青年轻中度原发性高血压,奥美沙坦酯和缬沙坦疗效和不良反应均类似.     

老年急性心肌梗死患者二级预防用药特点及原因分析

目的探讨老年急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者住院期间二级预防用药的特点及其原因。方法将2006年1～12月就诊的182例STEMI患者根据年龄分为老年组和非老年组,对比分析2组二级预防用药差异。结果老年组STEMI患者β受体阻断药和阿司匹林使用率（分别为51.43%和67.62%）明显低于非老年组（分别为72.73%,89.61%）;心功能（Killip分级）≥3级、消化系统合并症/并发症患者比例（分别为34.29%,25.71%）明显高于非老年组（分别为16.88%,12.99%）。结论老年STEMI患者β受体阻断药和阿司匹林使用率均低,心功能差是老年STEMI患者β受体阻断药应用受限的主要原因,消化系统合并症和并发症是老年STEMI患者阿司匹林应用受限的主要原因。     

阿仑膦酸钠对血管钙化干预的研究

目的:观察阿仑膦酸钠对钙化的大鼠主动脉组织中骨桥蛋白(OPN)表达的影响,并探讨相关机制。方法:通过给实验大鼠注射维生素D3和华法林建立主动脉钙化模型(钙化模型组),给予模型大鼠阿仑膦酸钠干预治疗(阿仑膦酸钠组),并设正常对照组。采用Von Kossa染色观察各组主动脉的钙化沉积;采用RT-PCR检测各组主动脉OPN mRNA表达;采用免疫组织化学染色检测OPN蛋白表达;采用SpectrAA-240FS原子吸收分光光度计测定各组主动脉钙含量。结果:Von Kossa染色,正常对照组未见黑色深染结构,钙化模型组主动脉中膜有片状黑色深染结构,阿仑膦酸钠组主动脉黑色深染结构明显减少。钙化模型组大鼠主动脉钙含量比正常对照组显著升高(P<0.05),OPN mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。阿仑膦酸钠组主动脉钙含量比钙化模型组明显降低(P<0.05),OPN mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:阿仑膦酸钠可能通过上调OPN表达来抑制大鼠主动脉血管钙化。     

老年急性心肌梗死患者血常规、生化特点分析

在我国,急性心肌梗死(AMI)的发病率不仅逐年增高,而且老年患者所占比例也逐年增加[1].老年AMI治疗棘手,病死率高,预后差.国外研究显示贫血、慢性肾脏疾病[2]、血小板[3]及白细胞值[4]与AMI患者的预后有关,而国内的研究[5]多集中在白细胞计数与预后方面.为探讨我国老年AMI患者贫血、慢性肾脏疾病及血小板计数等方面的特点以评估预后,本研究检测老年AMI患者血常规与生化指标,并与中青年患者进行对比,现将结果报道如下.