重组组织型纤溶酶原激活剂静脉溶栓治疗对伴或不伴心房纤颤的急性脑梗死患者的疗效

目的 观察重组组织型纤溶酶原激活剂( rt-PA)静脉溶栓治疗对伴或不伴心房纤颤(房颤)的急性脑梗死患者的疗效.方法 应用rt-PA对病程＜6h的66例无房颤的急性脑梗死患者(非房颤组)和21例伴房颤急性脑梗死患者(房颤组)进行静脉溶栓治疗;观察溶栓后两组脑出血的发生率、死亡率;采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)在溶栓前及溶栓后24h、7d对患者进行神经功能缺损程度评分;溶栓后90d使用改良Rankin( mRN)量表评估其综合生活能力.结果 两组治疗后24 h及7d的NIHSS评分均较治疗前显著降低(均P＜0.01),两组治疗后各时间点NIHSS及mRN评分差异无统计学意义.房颤组脑出血发生率(28.6％)高于与非房颤组(16.7％),但差异无统计学意义;死亡率(19.0％)显著高于非房颤组(1.5％)(P＜0.05).结论 伴房颤的急性脑梗患者rt-PA静脉溶栓治疗有效,但溶栓后脑出血发生率及死亡率高于不伴房颤的急性脑梗死患者.     

自动化酸碱平衡图在急诊社区获得性肺炎诊治中的应用

目的 探讨自动化酸碱平衡图在急诊科社区获得性肺炎(CAP)患者诊断中的价值.方法 根据病史、肺功能测定结果、慢性阻塞性肺疾病(COPD)诊断标准,将111例CAP患者分为单纯CAP组(56例)和COPD合并CAP组[即慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)组,55例].询问患者病史后即刻抽取动脉血测血气并进行自动化酸碱平衡图分析.结果 血气分析结果显示,AECOPD组动脉血二氧化碳分压(PaCO2,kPa)、HCO3- (mmol/L)、剩余碱(BE,mmol/L)均显著高于CAP组(PaCO2:7.714±2.414比5.896±1.308,HCO3-:30.767±7.185比25.014±3.043,BE:4.345±5.371比-0.354±3.180,均P＜0.01).自动化酸碱平衡图分析结果显示,AECOPD组患者酸碱平衡紊乱高达89.1％,CAP组为66.1％.将AECOPD组和CAP组患者中正常(10.9％、33.9％)、急性呼吸性酸中毒(急性呼酸,12.7％、14.3％)、慢性呼吸性酸中毒(慢性呼酸,49.1％、10.7％)、呼吸性碱中毒(呼碱,7.3％、14.3％)、代谢性酸中毒(代酸,12.7％、17.9％)、代谢性碱中毒(代碱,12.7％、8.9％)综合进行x2分析,差异有统计学意义(x2=24.421,P=0.001),而将正常、急性呼酸、呼碱、代酸及代碱进行x2分析,差异无统计学意义(x2=5.280,P=0.260),提示AECOPD患者慢性呼酸的发生率较单纯CAP患者显著增加.结论 自动化酸碱平衡图能帮助急诊科医师快速识别CAP患者是否存在多重酸碱平衡紊乱,并可快速识别急、慢性呼吸系统疾病.     

DAG方案对HL-60细胞株作用机制的体外研究

目的：从细胞水平探讨柔红霉素（DNR）和阿糖胞苷（Ara-C）联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）（DAG方案）能否提高抗肿瘤效果,并研究相应的作用机制。方法：以白血病细胞株HL-60为实验对象,分为DA方案组、DAG方案组和对照组3组。对照组不加任何药物;DA方案组为DNR加Ara-C;DAG方案组为DNR加Ara-C和G-CSF（G-CSF先于化疗药物前24h加入）。药物作用24、48h后收集细胞,对各组分别进行细胞计数、细胞形态观察,并采用MTT法检测不同组别细胞株的生长抑制率,采用流式细胞仪检测细胞早期凋亡比例、细胞坏死比例。另对HL-60细胞单用G-CSF作用24h后进行细胞周期分析,并行实时定量PCR以检测细胞内Ara-C相关代谢酶基因表达情况的变化。结果：化疗药物作用后,相对于对照组,DAG方案组与DA方案组细胞数量明显减少,形态显示有明显细胞核固缩现象,且可见凋亡小体形成。DAG方案组与DA方案组相比,前者细胞生长抑制率更高（作用48h,为78.3%比72.1%）（P〈0.01）。细胞凋亡分析显示,与DA方案组相比,DAG作用24h后早期凋亡百分率增高（9.43%比7.52%）,且差异有统计学意义（P〈0.05）;作用48h后,2组早期凋亡比例均下降。与对照组相比,DAG方案组与DA方案组细胞坏死百分率在药物作用24h和48h后均显著增高（DAG方案组分别为44.16%和57.59%;DA方案组分别为41.54%和58.22%）,但2组间差异无统计学意义。相对于作用前,G-CSF单独作用HL-6024h,细胞周期分析显示,S期细胞比例增高[（39.91±1.16）%比（31.42±1.47）%]（P〈0.05）;实时定量PCR检测,细胞内Ara-C代谢酶中脱氧胞苷激酶（DCK）的基因表达增高,5′-核苷酸酶（5′-NT）基因表达减少,差异有统计学意义（P〈0.05）,而CDD的基因表达差异无统计学意义。结论：G-CSF联合DA方案能显著提高对HL-60细胞株生长的抑制率,其作用机制主要为促肿瘤细胞坏死,轻度促细胞凋?     

凋亡相关基因PNAS-2 siRNA质粒表达载体的构建、鉴定及转染后筛选方法的选择

硫化砷作用后急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞凋亡相关基因PNAS-2（apoptosis—related protein）表达显著降低。Busch等认为PANS-2基因与细胞增殖有关。我们前期的研究发现硫化砷作用后的急性早幼粒细胞白血病（APL）患者白血病细胞及NB4细胞PNAS-2基因表达特异性下调，且呈时间依赖性而K562和U937细胞则无此较应。为了进一步研究封闭该基因后对细胞凋亡的影响，我们扩增其5’端未知序列，构建了PNAS-2 siRNA质粒表达载体并转染U937细胞，筛选、纯化转染细胞后检测U937细胞凋亡的变化以初步了解PNAS-2的作用。     

腹内高压与全身炎症反应综合征的相关性研究

正常情况下腹腔内压力（intra-abdominal pressure，IAP）仅略高于大气压。但IAP轻微升高就会对脏器功能造成不良影响。IAP〉10cm H2O称腹腔内高压（intra-abdominalhypertension，IAH），可见于多种疾病。IAP增高并发脏器功能障碍时称为腹腔间隔综合征（abdominal compartment syndrome，ACS），     

细胞膜上平衡型核苷转运体基因表达与阿糖胞苷敏感性的关系

目的 探讨细胞膜上平衡型核苷转运体基因表达与阿糖胞苷(Ara-C)敏感性的关系.方法 采用实时荧光定量PCR法检测血液病细胞系中平衡型核苷转运体(hENT)四种亚型基因(HL-60、NIM、U937、MOLT4、JURKAT)的表达,并观察髓系细胞株HL-60和NIM经Ara-C处理后hENT1表达的变化.以未加药处理细胞株作为对照组.结果 四类亚型hENT中仅hENT1基因表达与Ara-C的敏感性相关(r=0.939,P=0.018),且hENT1基因在髓系细胞膜上的表达高于它在淋系细胞膜上的表达.经Ara-c作用4 h内,髓系细胞株hENT1基因表达均下调(P＜0.05或P＜0.01),而8 h后HL-60细胞膜上hENT1的基因表达又上调达对照组水平(P＞0.05).结论 介导Ara-C转运的hENT1参与了细胞株对药物的敏感性,其基因表达的变化是Ara-C耐药的重要原因之一.     

黄芪及其与柔红霉素联用对白血病NB4细胞株增殖的影响

背景与目的蒽环类药物对心脏的毒性不同程度的限制了其临床应用,中药黄芪对心肌细胞有一定的保护作用,而黄芪对白血病细胞的干预情况了解甚少。本实验旨在了解黄芪以及与柔红霉素(DNR)联合应用时对培养的人白血病细胞株NB4增殖的影响。方法以NB4细胞株为实验模型,实验细胞分为4组空白对照组(不加任何药物)、黄芪组、DNR组及黄芪+DNR组。分别于24、48和72h3个时相收集细胞分析,应用Annexin V+碘化丙锭双染色法观察细胞凋亡情况,以及激光共聚焦显微镜(LSCM)对细胞内DNR蓄积情况进行定性和定量分析检测。结果3个时相收集细胞,黄芪组细胞凋亡率分别为(4.11±0.45)%、(4.68±0.59)%和(6.76±0.85)%,空白对照组为(3.58±0.48)%、(4.81±0.62)%和(5.88±0.82)%,两组差异无显著性(P>0.05);DNR组为(24.31±4.21)%、(39.74±5.26)%和(53.99±7.20)%,黄芪+DNR组为(25.13±4.82)%、(38.92±5.40)%和(60.48±7.89)%,两组差异无显著性(P>0.05)。LSCM检测DNR在细胞内的蓄积情况显示,3个时相DNR组荧光强度分别为112.87±31.68、173.54±38.15和179.33±40.95,黄芪+DNR组为146.67±42.47、148.87±50.28和157.04±43.67,两组差异无显著性(P>0.05)。而DNR组、黄芪+DNR组与空白对照组相比,差异均有显著性(P<0.05)。结论黄芪对NB4细胞的增殖无明显促进或抑制,与DNR联用时,不会影响DNR对白血病细胞的抑制作用。     

β-羟基异戊酰紫草素二甲醚衍生物对白血病细胞株THP-1的作用

 目的　选用人类单核细胞白血病细胞株THP-1,体外加入紫草素二甲醚衍生物5,8-二甲基-2-β-羟基异戊酰紫草素（SK36）,研究其在THP-1细胞株增殖和凋亡中的作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法　CCK法检测SK36对THP-1细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测细胞早期凋亡标记Annexin V／ PI及细胞凋亡通路Caspase活性;激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡和坏死。结果　流式细胞术检测结果显示,1.02 μg／ml SK36作用24、48 h后的细胞凋亡率分别为（40.61±2.13）% 和 （67.40±9.15）%,明显高于对照组的（16.97±0.61）%,差异有统计学意义（t＝18.444,t＝9.528,P＜0.01）;SK36诱导THP-1细胞凋亡且经历了Caspase-3的激活（F＝323.61,P＜0.01）。结论　紫草素二甲醚衍生物SK36能有效地诱导THP-1细胞凋亡,其作用机制主要是激活Caspase-3。     

抗PNAS-2单链抗体对白血病U937细胞凋亡的影响

目的 观察抗PNAS-2单链抗体与PNAS-2抗原特异性结合的能力,并在此基础上探究其对急性单核细胞白血病U937细胞凋亡的影响.方法 运用反转录病毒转染法将抗PNAS-2单链抗体表达载体pMIG-PNAS-2ScFv转入U937细胞(pMIG-PNAS-2ScFv组),同时设转染pMIG空载体(NC组)及未转染载体的U937细胞(U937组)为对照.流式细胞仪检测转染效率;激光共聚焦显微镜观察单链抗体表达情况及与靶抗原特异性结合的能力;流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡;Western blotting观察PNAS-2表达及促凋亡因子caspase-3激活情况.结果 成功将抗PNAS-2单链抗体编码序列转入U937细胞,所表达的单链抗体能与PNAS-2抗原特异性结合.与NC组和U937组相比,pMIG-PNAS-2ScFv组细胞凋亡率明显上升(P<0.05),活化型caspase-3表达增加,但PNAS-2含量并无变化.结论 抗PNAS-2单链抗体能有效结合U937细胞内的PNAS-2抗原并有促进U937细胞凋亡的作用,其促凋亡机制可能与PNAS-2功能位点被封闭后功能失活而无法发挥抑凋亡作用有关.     

胸痛临床评估与诊断流程在急诊胸痛患者临床诊断中的价值

目的 研究胸痛临床评估和诊断流程在急诊胸痛患者临床当中的诊断价值.方法 选择80例内科急诊就诊后收治的患者作为观察组,同时选择80例患者作为对照组,两组患者的主治医师对患者的处理方式不相同.观察组主要以胸痛规范化评估和诊断中国专家共识为基础,采用胸痛临床评估和诊断流程对患者进行诊断,对照组患者根据临床症状进行处理,对两组患者的诊断情况进行评估.结果 对照组当中将无随访患者剔除,最终纳入68例,观察组剔除无随访患者8例,最终纳入72例.对两组患者的接诊医生的专业技术和职称情况进行比较,差异无统计学意义(P>0.05);对两组患者就诊确诊时间进行比较,观察组短于对照组,比较两组患者的重复抽血情况,观察组的重复抽血次数少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 临床上对于急诊胸痛患者,采用胸痛临床评估和诊断流程进行对患者的诊断,能够更好地评价患者的病情,可以更快地对患者病情进行确诊,减少重复抽血率,值得在临床上推广使用.