补肾生血方药对慢性肾功能不全性贫血大鼠红细胞生成素基因表达的影响

用腺嘌呤饲喂大鼠，建立慢性肾功能不全性贫血动物模型，观察肾功能损伤与网织红细胞、血红蛋白和红细胞生成素（ＥＰＯ）合成之间的关系，探讨补肾生血中药改善造血机能的作用机理。结果表明，中药可显著降低肾功能不全大鼠血清肌肝和血尿素氮，并通过促进ＥＰＯ基因表达来改善动物的贫血状况。     

β-淀粉样蛋白激发大鼠海马炎性反应及葛根素对其的抑制作用

目的 观察β-淀粉样蛋白(Aβ)注入大鼠海马后光镜和电镜下的炎性反应,检测炎性反应相关酶-环加氧酶-2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达变化,并研究葛根素对这些变化的影响.方法 取Wistar雄性大鼠24只,随机分为葛根素组、β-淀粉样蛋白组(Aβ组)、对照组,每组8只.葛根素组和Aβ组大鼠双侧海马注射Aβ25～35;对照组行假手术,双侧海马注射0.9%氯化钠溶液.葛根素组按150 mg·kg-1·d-1经腹腔注射葛根素治疗14 d;Aβ组和对照组给予3.75 ml·kg-1·d-1 0.9%氯化钠溶液假治疗14 d.用Morris水迷宫实验评测各组大鼠学习记忆能力后处死,取海马组织,进行光镜和电镜观察,并用Western blot分析和免疫组化两种方法 检测海马组织COX-2和iNOS蛋白的表达.结果 训练的第1、2、3天,对照组、葛根素组的平均逃避潜伏期(AEL)与Aβ组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);训练的第4、5天各组AEL比较,差异无统计学意义(P＞0.05).空间探索实验中,对照组、葛根素组大鼠跨平台次数与Aβ组比较差异有统计学意义(P＜0.05).光镜和电镜下观察到Aβ组大鼠海马神经元的炎性反应较对照组强烈,而葛根素组的炎性反应较Aβ组减弱.Western blot分析和免疫组化两种方法 均显示,iNOS、COX-2蛋白在Aβ组表达量与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);葛根素组与Aβ组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 Aβ可能通过激活COX-2、iNOS引发大鼠海马炎性反应,从而导致其神经元损伤、学习记忆能力下降,而葛根素可能通过抑制Aβ激活海马炎性反应的作用,改善大鼠学习记忆障碍.     

通心络超微粉抑制大鼠心肌梗死后转化生长因子-β_1的表达

目的探讨通心络超微粉对心肌梗死大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达作用。方法 130只SD大鼠随机选10只为假手术组(0.9%NaCl灌胃4w,n=10,至实验终点时剩有8只)4w后处死。120只SD大鼠结扎冠状动脉前降支,术后存活的38只大鼠随机分为:NaCl灌胃组(0.9%NaCl灌胃4w,n=9),通心络超微粉治疗组(1.0g.kg-1.d-1)10只、卡托普利治疗组(15mg.kg-1.d-1,n=10)10只,药物灌胃4w。用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)及免疫组化方法检测TGF-β1的mRNA和蛋白表达情况。结果与假手术组相比,心肌梗死模型组TGF-β1的mRNA和蛋白表达均明显升高(均P0.01)。与心肌梗死模型组相比,通心络超微粉治疗组和卡托普利治疗组TGF-β1的蛋白和mRNA表达均明显减低(P0.01)。结论大鼠心肌梗死后TGF-β1表达增加,提示TGF-β1在梗死后心室重构起重要作用。通心络超微粉抑制大鼠心肌梗死后TGF-β1表达基于通心络超微粉的抗氧化应激作用。通心络超微粉对心肌梗死后心室重构的保护作用是有益的。     

细胞间黏附分子1基因K469E多态性与冠心病的关系

目的 探讨中国河北地区人群中细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因第六外显子K469E多态性与冠心病(CHD)的关系.方法 CHD患者93例,同时选取心电图检查无异常或冠状动脉造影正常的101例健康体检者为对照组.所有CHD患者均经冠状动脉造影证实.采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法分析CHD患者和对照组的ICAM-1基因型是否有差别.结果 两组基因型频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡.CHD组与对照组ICAM-1基因K469E编码处等位基因频率及基因型频率的差异均无统计学意义.结论 中国河北地区人群中细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因K469E多态性与冠心病无相关.     

从琼脂糖凝胶中快速回收DNA片段的新方法

从琼脂糖凝胶中快速回收ＤＮＡ片段的新方法贾根深，温进坤（河北医科大学基础医学研究所生物化学室，石家庄０５００１７）在分子生物学实验技术中，从琼脂糖凝胶中回收所需的ＤＮＡ片段是探针制备过程中必不可少的实验步骤。目前实验室常采用＂电洗脱法＂、＂透析袋回收...     

大鼠自发性高血压和心肌肥厚时热休克蛋白70基因表达的研究

本工作采用热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）核酸分子杂交方法，检测了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）与其正常对照（ＷＫＹ）大鼠离体培养的主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）受热刺激后以及大鼠腹主动脉缩窄后心肌肥厚时左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的水平，并对ＳＨＲ和ＷＫＹ肝组织基因组ＤＮＡ进行了限制性酶切片断长度多态性（ＲＦＬＰ）分析。结果表明：ａ．３７℃培养的ＳＨＲＡＳＭＣ及整体ＳＨＲ肝组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的基础表达水平均低于ＷＫＹ大鼠，ＳＨＲＡＳＭＣ受热刺激（４２℃１５ｍｉｎ）后２ｈ，ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达增加的程度明显大于ＷＫＹ大鼠。ｂ．大鼠腹主动脉缩后造成左室压力超负荷，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ在压力超负荷４ｈ时已明显升高，１ｄ、２ｄ、１ｗ均维持在高水平，１ｗ后逐渐降低。ｃ．ＳＨＲ和ＷＫＹ鼠肝组织基因组ＤＮＡ经ＢａｍＨＩ酶切后，ＳＨＲＨＳＰ７０基因缺失一条约５．６ｋｂ的片段。提示：ＳＨＲＡＳＭＣ对热敏感性增加；压力负荷增加早期，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达明显增加；ＨＳＰ７０基因结构异常可能与高血压发生有关。     

心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅳ．外源基因的在体表达

将ｐＮ２－ＬａｃＺ和ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ质粒直接注射到Ｗｉｓｔａｒ大鼠股四头肌，可以在肌肉中检测到这两种基因的表达产物。注射ｐＮ２－ＬａｃＺ质粒后７天，β－半乳糖苷酶的表达量最高，可达２．４８×１０－４Ｕ／ｇ组织，并且可持续表达３周以上。组织化学染色表明部分肌细胞内有ＬａｃＺ基因表达。当用脂质体介导时，注射含３０μｇ质粒的脂质体─ＤＮＡ复合物，β－半乳糖苷酶的活性同直接注射８０μｇ质粒时的活性无差别，直接注射ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ质粒后７天，单链尿激酶原含量最高，可达５５０ｎｇ／ｇ组织。基因注射后３个月仍可检测到单链尿激酶原。     

黄芪、当归对血管平滑肌细胞粘着斑激酶表达和细胞凋亡的影响

目的：探讨黄芪,当归对体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）粘着斑激酶（FAK）表达和细胞凋亡的影响。方法：应用RT-PCR,Western blot检测黄芪,当归对FAK表达的影响;应用Greiss试剂检测VSMC培养液中NO2^-含量;应用流式细胞仪检测细胞凋亡及bcl-2和caspase-3表达活性。结果：黄芪,当归注射液可以显著抑制由碱性成纤维细胞生长因子所诱导的FAK表达。增加细胞培养液中的NO2^-含量,诱导cas-pase-3表达,下调bcl-2表达,促进体外培养的VSMC凋亡。结论：黄芪,当归诱导VSMC凋亡与其促进NO合成,抑制FAK表达,诱导促凋亡基因caspase-3表达及下调抗凋亡基因bcl-2表达有关。     

补肾生血方药对慢性肾功能不全性贫血大鼠红细胞生成素基…

用腺嘌呤饲喂大鼠，建立慢性肾功能不全性贫血动物模型，观察肾功能损伤与网织红细胞，血红蛋白和红细胞生成素合成之间的关系，探讨补肾生血中药改善造血机能的作用机理，结果表明，中药查显著降低肾功能不全大鼠血清肌酐和血尿素氮，并通过促进ＥＰＯ基因表达来改善动物的贫血状况。     

旋覆花内酯抑制AD模型大鼠海马环加氧酶2和核转录因子κB的表达

目的观察旋覆花内酯(l-O-acetylbritannilactone,ABL)对Aβ25~35海马内注射所致阿尔采末病(Alzheimers dis-ease,AD)模型大鼠海马环加氧酶2(COX-2),核转录因子κB(NF-κB)表达的影响,探讨其对AD大鼠的治疗作用及机制。方法30只SD大鼠随机分为对照组、模型组及药物处理组,Aβ25~35海马内注射制备AD大鼠模型,药物处理组给予ABL26mg·kg-1·d-1,模型组给予等量溶剂,分两次灌胃,共21d。用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力,免疫组化及Western blot测定大鼠海马COX-2,NF-κB蛋白表达。结果AD大鼠在定位航行试验中,逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,空间记忆力受损,与对照组及药物处理组大鼠比较差异有统计学意义(P<0·05);于试验d2、3、4药物处理组与对照组大鼠比较差异无统计学意义(P>0·05)。模型组海马COX-2、NF-κB表达升高(P<0·05),分别是对照组的2·8倍和1·6倍,药物处理组COX-2、NF-κB表达下降,与模型组比较差异有统计学意义(P<0·05)。结论ABL的抗炎作用可能是其改善AD大鼠学习记忆能力的作用机制之一。