旋覆花素抑制阿尔茨海默病模型大鼠脑海马组织COX-2和iNOS基因表达

目的:观察旋覆花素对Aa25～35海马内注射诱导Alzheimer病(AD)模型大鼠海马环加氧酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨其对AD大鼠的治疗作用及机制.方法:SD大鼠海马内注射Aa25～35制备AD大鼠模型,在造模前3 d和造模后18 d灌胃旋覆花素26 mg·kg-1·d-1,bid,共21 d.用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力,免疫组化及Western blot测定大鼠海马 COX-2和iNOS蛋白表达.结果:AD大鼠在定位航行实验中,逃避潜伏期延长,单位时间内跨越原平台次数减少,空间记忆力受损,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05);实验d2,d3,d4给药组的逃避潜伏期较模型组均显著缩短,与正常对照组接近(P>0.05).模型组海马COX-2和iNOS基因表达较正常对照组显著升高,给药组COX-2和iNOS基因表达较模型组显著下降(P<0.05).结论:旋覆花素的抗炎作用可能是其改善AD大鼠学习记忆能力的作用机制之一.     

氧化应激反应在过度训练致急性肾损伤中的作用及山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子的影响

目的:过度训练可引起急性肾损伤(OTIAKI),为了解氧化应激反应在过度训练致急性肾损伤中的作用,本文研究了过度训练大鼠血清及肾组织SOD和MDA的改变,观察了山莨菪碱、旋覆花素、苦碟子对上述变化的影响.方法:将80只雄性Wistar大鼠随机分为安静对照组(CN)、力竭运动组(ES)、山莨菪碱干预组(AD)、旋覆花素干预组(IB)、苦碟子干预组(IS).采用大鼠游泳至力竭建立过度训练致急性肾损伤模型.采用黄嘌呤氧化酶法检测血清和.肾组织SOD和MDA的改变.结果:力竭后即刻和力竭后6h大鼠血清和肾组织SOD明显降低(P<0.05),MDA明显升高(P<0.05);血清SOD和MDA两个指标于力竭后24h恢复达到对照组水平,肾组织SOD和MDA与力竭后6h比较均有所恢复,但未达到对照组水平.于力竭后6h,山莨菪碱、旋覆花素及苦碟子三种药物对过度训练引起的大鼠血清和肾组织SOD活性的降低和MDA含量的增高均具有不同程度的逆转作用;于力竭后24h,三种药物组大鼠血清和肾组织SOD和MDA均恢复到对照组水平.结论:氧化应激反应主要参与力竭后早期引起的肾损伤过程,山莨菪碱、旋覆花素及苦碟子在OTIAKI早期可通过抗氧化应激反应来发挥肾脏保护作用.     

旋覆花素抑制内皮剥脱诱导血管炎症反应的研究

目的探讨旋覆花素抑制血管内膜增生的药理学机制。方法SD大鼠灌胃服用旋覆花素溶液,3d后行球囊内皮剥脱术,术后继续给药,于不同时间处死大鼠后检测各指标变化。结果和对照组相比,旋覆花素能显著抑制内皮剥脱术后血管新生内膜的增生,降低内皮剥脱术引起的血清C-反应蛋白（CRP）、前列腺素E2（PGE2）、丙二醛（MDA）水平的升高（P〈0.05）,同时增加总抗氧化能力（TAOC）（P〈0.05）。结论旋覆花素通过发挥抗氧化与抗炎作用,减缓了内皮剥脱后血管新生内膜的增厚。     

碱性纤维母细胞生长因子对血管平滑肌细胞增殖的影响

应用＾３Ｈ－ＲｄＲ掺入实验，ＲＮＡ印迹分析和反转录－多降酶链反应等方法观察碱性纤维母细胞生长因子对大鼠血管平滑肌细胞ＤＮＡ合成及细胞增殖相关基因表达的影响，结果发现，碱性纤维母细胞增殖相关基因表达的影响，结果发现，碱性纤维母细胞生长因子作用于血管平滑肌细胞６ｈ后，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入开始增加，２４ｈ达到高峰，在一定浓度范围内，碱性纤维母细胞生长因子以血管平滑肌细胞的促增殖效应与浓度呈正相关。碱性纤维     

MMP-2 基因启动子区-735C→T多态性与冠状动脉粥样硬化的相关性研究

目的: 研究中国汉族人群基质金属蛋白酶2( MMP-2 )基因启动子区-735C→T多态性与冠状动脉粥样硬化(CAS)的相关性。方法: 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法,以309例经冠状动脉造影确诊为冠状动脉粥样硬化的患者为研究对象,检测 MMP-2 基因启动子区-735C→T多态性,以311例同期体检的正常人为对照组,比较两组间 MMP-2 基因多态性频率分布的差异,并结合冠脉造影情况,探讨 MMP-2 基因多态性与CAS发病及冠状动脉狭窄程度的关系。结果: CAS组CC基因型频率(86.1%)明显高于对照组(79.7%),而CT+TT基因型频率(13.9%)明显低于对照组(20.3%),两组之间的差异显著(P<0.05); CAS组C等位基因频率(92.6%)高于对照组(89.1%),T等位基因频率(7.4%)低于对照组(10.9%),两组差异显著(P<0.05)。 MMP-2 基因-735C→T多态性与冠状动脉狭窄程度无关(P>0.05)。结论: MMP-2 基因-735C→T多态性可能与中国汉族人群CAS有关, MMP-2 基因CC基因型和C等位基因可能是CAS遗传易感性的基因标记之一。     

自发性高血压大鼠内皮素A型受体基因的表达

应用反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定大鼠ＥＴ－Ａ型受体（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎＡｒｅｃｅｐｔｏｒＥＴＡ－Ｒ）ｍＲＮＡ在体内的分布，证明ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ不仅存在于血管平滑肌细胞，亦存在于内皮细胞中；而且广泛分布于脑、心、肾、肺等组织内。首次发现，在ＳＨＲ大鼠的脑、心、肾组织中，ＥＴＡ－ＲｍＲＮＡ水平明显升高，提示ＥＴＡ－Ｒ基因表达增加，亦可能是高血压发病的一个重要因素。     

一种骨桥蛋白小分子肽的原核表达与生物学活性鉴定

目的： 用大肠杆菌（E.coli）表达骨桥蛋白13肽(OPN 13),经亲和层析纯化后检测其生物学活性。方法：运用基因重组技术,将骨桥蛋白分子中含黏附序列的13肽cDNA片段与携带His编码序列的原核表达载体连接构建融合蛋白表达质粒pET-32c-OPN13。将重组质粒转化E.coli DH 5α宿主菌后,对诱导融合蛋白表达的条件进行优化。表达产物His-OPN13经Ni-NTA His Bind Resin金属离子螯合层析纯化后,分别检测其对骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞黏附和迁移的影响。结果：所表达的His-OPN13融合蛋白在宿主菌中以胞浆可溶性的形式存在。经亲和层析可得到高纯度的His-OPN13融合蛋白。产物活性分析表明,His-OPN13融合蛋白能特异性地抑制骨桥蛋白诱导的血管平滑肌细胞的黏附和迁移。结论：OPN13肽可在大肠杆菌中高效表达,并可剂量依赖性地抑制血管平滑肌细胞黏附和迁移活性。     

脂多糖对大鼠不同组织中一氧化氮合成酶基因表达的影响

通过Northernblot和NADPH－心肌黄酶染色显示一氧化氮合成酶活性的组织化学分析方法，观察了脂多糖对大氧心脏、主动脉和肾组织中诱导型一氧化氮合成酶基因表达的影响及诱导型一氧化氮合成酶被脂多糖诱导表达的动力学。结果表明，未经脂多糖处理的大鼠诱导型一氧化氮合成酶基因在所检测的三种组织中表达活性很低，脂多糖作用于大鼠2h，心、肾和主动脉中的诱导型一氧化氮合成酶mRNA开始增加，6h达到峰值，此后，逐渐下降，24h回复到对照水平。一氧化氮合成酶组织化学染色显示，对照大鼠的组织细胞内存在较低的组成型一氧化氮合成酶活性，被脂多糖处理不同时间后，三种组织中的一氧化氮合成酶活性均显著升高，到24h仍维持在较高水平，提示诱导型一氧化氮合成酶被合成后，在组织细胞内较为稳定。     

论中医临床医学现代化发展战略

中医临床医学现代化,是整个中医现代化进程中的关键步骤,也是检验中医学是否走向现代化的标志之一。中医临床医学现代化的发展战略,应着重于传病微观辩证,增强理论的自然科学属性,提高诊疗手段的科技含量和临床疗效的飞跃等方面,正确把握中医临床医学现代化的发展战略,对于中医学的发展将起到积极的推进作用。     

旋覆花素及苦碟子对过度训练大鼠肾组织细胞凋亡调控基因的影响

目的：观察旋覆花素及苦碟子对过度训练大鼠肾组织细胞Bax和Bcl-2的表达以及Bax/Bcl-2比值变化的影响,探讨上述二种药物抗肾组织细胞凋亡的分子机制。方法：采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型,将大鼠随机分为安静对照组、力竭运动组（力竭6h、力竭24h）、旋覆花素防治组（旋覆花素6h、旋覆花素24h）,苦碟子防治组（苦碟子6h、苦碟子24h）。采用免疫组织化学方法检测大鼠肾组织Bax、Bcl-2蛋白的表达;采用CMIAS病理图像分析仪测量Bax、Bcl-2蛋白表达的平均光密度。结果：力竭后6h及24h大鼠肾组织Bax的表达增强（P〈0.05）,Bcl-2的表达减弱（P〈0.05）,Bax/Bcl-2比值明显增高（P〈0.05）;旋覆花素和苦碟子6h及24h组大鼠与同期力竭组比较,Bax的表达减弱（P〈0.05）,Bcl-2的表达增高（P〈0.05）,Bax/Bcl-2比值降低（P〈0.05）。结论：旋覆花素和苦碟子均可通过调节Bax、Bcl-2及Bax/Bcl-2比值而起到抗过度训练大鼠肾组织细胞凋亡的作用。