2005—2007年广州地区腹泻儿童感染轮状病毒情况分析

目的了解近3年来广州地区儿童肠道轮状病毒感染情况。方法收集2005年1月至2007年12月收治的包括门诊和住院的急性腹泻患儿的大便标本,采用免疫胶体金技术对标本进行轮状病毒抗原检测。结果轮状病毒2005、2006和2007年平均感染率分别为44．70％、38．22％和39．99％;与2006、2007年相比,2005年轮状病毒感染高峰和波谷均向后推延1个月。抗原检测阳性例数在6～24个月婴幼儿最高,全年感染率在性别上差异无统计学意义。结论轮状病毒是引起婴幼儿病毒感染性腹泻的主要病原体,气候可能对广州地区轮状病毒感染有较大影响。     

白三烯受体拮抗剂和吸入性皮质激素在变应性鼻炎中的应用

目的:探讨吸入性皮质激素(ICS)与白三烯受体拮抗剂(LTRAs)联合应用对变应性鼻炎(AR)的影响。方法:将对ICS无反应的47例患者用LTRAs孟鲁斯特治疗2周,其中单独应用孟鲁斯特26例(B组),与糠酸莫米松合用21例(C组),用生理盐水滴鼻和口服维生素C的10例AR患者为对照组(A组),治疗前后对患者症状进行评分,对各组间症状进行评分。结果:在AR患者中有少部分患者对激素不敏感;且出现的比例在并发有哮喘症状的AR患者中较其他无并发症状的患者要高,差异有统计学意义(P<0.05);与A组患者相比,B组患者症状有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);C组患者的症状控制更为有效,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对ICS不敏感的AR患者可以选择LTRAs辅助治疗;并可同时用ICS和LTRAs控制AR的症状。     

重组人TRAIL蛋白联合顺铂对人卵巢癌细胞生长及凋亡的影响

背景与目的：研究发现肿瘤坏死因子的相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)可以增强化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用。本研究旨在探讨TRAIL与顺铂联合应用对体外培养的卵巢癌细胞SKOV3和OVCAR3生长凋亡的影响及可能的诱导机制。方法：利用MTT法和流式细胞仪检测在顺铂和重组人TRAIL蛋白共同作用下,SKOV3和OVCAR3细胞的增殖抑制效应及细胞凋亡程度;并应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测药物处理后TRAIL死亡受体DR4、DR5的mRNA表达水平;同时用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测DR4、DR5的蛋白表达水平。结果：SKOV3和OVCAR3细胞均对TRAIL蛋白敏感,随着TRAIL蛋白浓度的升高,细胞的生长抑制率可达64%;而TRAIL与顺铂联合用药对两种细胞的抑制率均达到92%以上,对细胞的增殖抑制呈现高效协同作用,与单独用药组比较差异有统计学意义(P<0.05);TRAIL和顺铂联合组两种细胞凋亡率分别为(31.50±0.79)%和(36.60±1.31)%,显著高于单独用药组;RTFQ-PCR和Western blot检测结果显示,SKOV3和OVCAR3细胞在TRAIL与顺铂联合用药后,死亡受体DR4、DR5表达水平均显著上调。结论：在体外,TRAIL与化疗药物顺铂联用能明显抑制卵巢癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。TRAIL能明显增强顺铂对卵巢癌细胞的敏感性,其诱导机制可能与死亡受体DR4、DR5表达水平上调有关。     

与肺发育相关的microRNA

microRNAs（miRNAs）是指一类短链非编码的RNA分子,起着负调控基因表达的作用。他们参与着重要的细胞生理生化过程,包括调控机体生长、发育、分化及代谢等。进一步了解miRNAs的作用及其机制,对疾病的诊断及治疗都可能提供一个新的方向。本文讨论与肺发育相关的miRNAs．将阐明microRNA在肺发育中的作用,为临床提供新的预防及治疗思路。     

B型流感病毒广州株的分离及血凝素基因进化分析

[摘要] 目的 了解B型流感病毒广州分离株的分子流行病学背景和中国大陆地区该病毒的流行情况。方法 从疑似流感患儿身上取样,经荧光定量RT-PCR检测证实为B型流感病毒;应用RT-PCR方法扩增出该株病毒的HA片段,将该片段克隆到T克隆载体测序后进行序列分析;从Genbank中提取中国内地不同时间的HA基因序列和国际代表株序列,应用系统发育分析软件建立HA基因的系统发育树并进行进化分析。结果 软件分析表明广州株HA片段长1 882bp,编码584个氨基酸,新分离的B型流感病毒广州株在分类上属于Yamagata系;从80年代末期开始,中国内地流行的B型流感病毒分别属于Victoria系或者Yamagata系,90年代和00年代同时存在Victoria系和Yamagata系的流行。结论 广州地区07年存在B型流感病毒Yamagata系的流行,中国大陆地区90年代和00年代Victoria系和Yamagata系B型流感病毒的流行比例相当,时间规律不明显。     

变应性鼻炎患者外周血中T-bet的表达及其与血清IgE的关系

目的 探讨变应性鼻炎患者中外周血单核细胞(PBMC)中T-bet mRNA的表达及其与特异性IgE(SIgE)、患者症状和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)的关系.方法 用Unicap CAP系统检测变应性鼻炎患者变应原,检测血清SIgE的和ECP含量.抽取其中35例对尘螨过敏的变应性鼻炎患者和15例正常人静脉血,密度梯度离心分离PBMC,其中部分PBMC用质量浓度为50μg/mL的螨变应原培养刺激,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测T-bet mRNA表达.结果 变应性鼻炎患者和正常患者T-bet mRNA表达强度与参照物β-actin的比率分别是0.418±0.101和0.706±0.091,两者比较差异有非常显著性意义(P＜0.01).T-bet mRNA的表达强度分别与变应性鼻炎患者症状评分、ECP的浓度没有相关性(r=-0.227;-0.033,P＞0.05).然而,T-bet mRNA表达强度和SIgE存在负相关关系(r=-0.375,P＜0.05),SIgE水平与过敏症状成正相关(r=0.426,P＜0.05).变应原刺激前后T-bet mRNA表达强度、ECP和SIgE变化差异没有显著性(P＞0.05).结论 变应原为螨的变应性鼻炎患者中,T-bet mRNA表达较正常人低,变应性鼻炎患者T-bet mRNA低表达是变应性鼻炎Th1/Th2失衡机制中的重要环节之一.T-bet mRNA的下调表达与变应性鼻炎患者症状严重程度和ECP浓度无关.在体外,特异性变应原的刺激对儿童和成人的T-bet表达、ECP和SIgE没有影响.T-bet是间接影响IgE水平的因素之一.SIgE水平客观直接地反应过敏的严重程度,但T-bet没有,它只是可能影响IgE水平的间接因素之一.     

Pokemon在肝细胞癌及癌旁、癌以远组织、肝硬化组织及正常肝组织中的表达

目的检测和分析Pokemon在肝细胞癌及癌旁组织、癌以远组织、肝硬化组织及正常肝组织中的表达。方法40例肝癌组织、距癌组织1cm以上的癌旁组织、距癌组织5 cm以上癌以远组织取自肝细胞癌合并乙型肝炎后肝硬化行肝移植患者切除病肝。20例肝硬化组织取自肝硬化行断流手术患者。20例正常肝组织取自健康供体标本。用real-time PCR(实时定量PCR,RT- PCR)法检测Pokemon蛋白mRNA在这些组织中的表达。结果肝癌组织、癌旁组织的Pokemon蛋白tuRNA的表达水平显著高于癌以远组织、肝硬化组织、正常肝组织(P<0.05)。肝癌组织与癌旁组织则差异无统计学意义(P>0.05)。癌以远组织、肝硬化组织及正常肝组织之间差异也无统计学意义(P>0.05)。结论Pokemon在肝细胞癌中存在异常高表达。癌旁组织可能存在着亦有Poke- mon蛋白mRNA高表达的的癌前病变。癌以远组织、肝硬化组织Pokemon蛋白mRNA表达水平与正常肝组织差异无统计学意义。     

PCR-反向斑点杂交法检测HBV YMDD模序混合感染

目的为HBV感染临床个体化治疗、指导临床用药寻找一种能更好地检测HBV YMDD模序混合感染的方法。方法28份已知乙肝病人血清,其中10份为HBV YMDD模序感染,5份为HBV YIDD模序感染,5份为HBV YVDD模序感染,2份为HBV YMDD和YIDD模序混合感染,2份为HBV YMDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YIDD和YVDD模序混合感染,2份为HBV YMDD、YIDD和YVDD模序混合感染,都用PCR产物直接测序和PCR-流过式反向斑点杂交(Flowthrough-RDB)方法检测。结果HBV YMDD模序单一感染标本用两种方法检测准确性都达到100%,对混合感染标本PCR-流过式反向斑点杂交方法检测准确性也可达100%,然而用PCR产物直接测序方法只能检测其中一种或两种型别。结论PCR-流过式反向斑点杂交方法是一种敏感、特异和快速的检测HBV YMDD野生型及其突变型模序单一感染和混合感染的有效方法,比PCR产物直接测序更优越,更有利于实现临床个体化治疗和指导临床用药。     

PCOS患者胰岛素抵抗与INSR基因甲基化状态的关系

摘要：目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗与INSR基因甲基化状态之间的关系。方法PCOS患者35例,
根据HOMA指数诊断胰岛素抵抗（IR）分为胰岛素抵抗组（IR组）17例和非IR组18例。对比两组之间的年龄、体质量指数
(BMI)和腰臀比(WHR)、基础性激素睾酮（T）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）及催乳素（PRL）,空腹胰
岛素(FINS)和空腹血糖(FBG)和HOMA指数,利用甲基化特异性PCR技术检测两组患者子宫内膜INSR基因的DNA甲基
化状态,并进行统计分析。结果两组患者之间BMI、WHR、FINS、FBG、HOMA指数的比较差异有统计学意义（P<
0.05）,IR组的空腹胰岛素、BMI和WHR显著高于非IR组;两组患者之间年龄、FSH、LH、E2、T的比较差异无统计学意义
（P>0.05）。两组患者子宫内膜细胞提取的INSR基因经甲基化特异性PCR后,所有病例均未检出完全甲基化状态的特征
条带, 24例显示部分甲基化状态的特征条带,其中PCOS-IR组13例,PCOS-非IR组11例;11例显示非甲基化状态,其中
PCOS-IR组4例,PCOS-非IR组7例。比较了IR组与非IR组基因部分甲基化状态发生率, 未见统计学差异（P>0.05）。结
论PCOS患者存在子宫内膜INSR基因的部分甲基化改变,目前还不能证实IR引起子宫内膜局部INSR基因的甲基化模
式改变。     

HBV YMDD模序突变及其与肝癌发生的关系

目的 探讨肝癌病人HBV YMDD模序突变及其与肝癌发生的关系.方法 用流过式反向斑点杂交结合血清生化指标分析慢乙肝组(CHB)、肝硬化组(LC)和肝癌组(HCC)中HBV YMDD模序突变情况.结果 HCC组、LC组、CHB组HBV YMDD模序突变率分别为1.67%(1/60)、4.44%(2/45)和63.82%(30/47).HCC组、LC组及CHB组中ALT(谷丙转氨酶)活性分别为(66±25)、(66.98±113)、(105土170)U/L,而AST(谷草转氨酶)活性分别为(152±108)、(74.13±58)和(57.2±56.6)U/L.HBV YMDD模序突变的产生与用药时间长短显著相关, HBV YMDD模序突变与ALT升高相关性不显著,但与AST升高显著相关.60例肝癌中有HBV YMDD模序突变的只有1例,突变率为1.67%.结论 HBV YMDD模序突变的发生与肝癌发生不存在明显相关性,仅与拉米夫定用药时间长短显著相关.同ALT相比, AST更好地反映了HBV引起的肝病肝脏损坏的严重程度.ALT是拉米夫定用药过程中与HBV YMDD突变有关的较为敏感的肝功能生化诊断和病情监测指标.