一例肠道腺病毒41型感染与重症肺炎关系的临床分析

目的分析肠道腺病毒与呼吸系统疾病的关系，进一步提高婴幼儿重症肺炎诊治水平。方法对重症肺炎尸检脑、肝、心、肺、肠、脾组织进行腺病毒巢式PCR检测，对PCR产物进行克隆测序：同时用免疫组织化学方法检测肺组织中3型腺病毒、支原体、衣原体、呼吸道合胞病毒、A型流感病毒、B型流感病毒的分布情况。结果免疫组织化学结果表明3型腺病毒、支原体、衣原体、呼吸道合胞病毒、A型流感病毒、B型流感病毒都为阴性。肺和肠中腺病毒巢式PCR结果为阳性，测序结果显示都为腺病毒41型。结论肠道腺病毒41型感染可能是婴幼儿重症肺炎的重要病因之一。     

高分辨荧光熔解曲线法检测脊肌萎缩综合症SMNt基因7号外显子缺失

目的探讨高分辨荧光熔解曲线分析在SMNt基因7号外显子缺失检测中的应用。方法用高分辨荧光熔解曲线分析方法分析脊肌萎缩综合症SMNt基因7号外显子纯合缺失、SMNc基因7号外显子纯合缺失及未见SMNt、SMNc完全缺失三种情况。结果高分辨荧光熔解曲线分析方法能很好地区分SMNt基因7号外显子纯合缺失、SMNc基因7号外显子纯合缺失及未见SMNt、SMNc完全缺失三种基因型,与基因测序方法所得的结果完成一致。结论高分辨荧光熔解曲线法可用于脊肌萎缩综合症SMNt基因7号外显子缺失检测,具有快速、准确、可靠的特点。     

梅毒螺旋体的巢式PCR检测与基因分型

目的探讨广州地区梅毒螺旋体基因型分布,确定其分子流行病学特点。方法收集2002-2004年间连续就诊的疑似梅毒患者的生殖器溃疡标本,用暗视野显微镜和巢式PCR检测梅毒螺旋体,阳性者进行巢式PCR扩增酸性重复蛋白基因(arp)和苍白螺旋体重复基因族(tpr),凝胶电泳分析arp基因重复序列个数和tpr基因的MseⅠ酶切片段多态性。根据Pillay标准基因分型。结果共检测62例疑似硬下疳病例,33例(53．2％)暗视野镜检发现梅毒螺旋体；54例PCR检测阳性,阳性率为87.1％。47例arp基因分型以14型为主(36例占76.6％),49例tpr基因分型以d型为主(39例占79.6％),47例双重基因分型发现7个基因型,依次为14 d 31例占66.0％,13 d 5例占10.6％,14 b 4例占8.5％,12 b 3例占6.4％,12 d 2例占4.3％。15 d和14 i各1例占2.2％。结论巢式PCR法检测梅毒螺旋体具有较高的敏感性,广州地区梅毒螺旋体基因型以14 d型为优势型。梅毒的早期诊断和基因分型对于梅毒的防治有重要意义。     

综合性干预措施对呼吸机相关性肺炎的影响

目的观察综合性干预措施对呼吸机相关性肺炎的影响。方法将住院期间机械通气患者106例随机分为实验组和对照组。实验组通过人工鼻、密闭式吸痰、声门下吸引、优化营养供给、加强口腔护理等综合性干预措施预防呼吸机相关性肺炎。结果总VAP的发生率为34.9%,实验组(24.3%)低于对照组(75.7%),两组差异有统计学意义(P<0.05);总VAP患者病死率为43.2%,实验组为43.8%,对照组为56.2%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。实验组平均机械通气时间、平均住ICU时间短于对照组,死亡率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论呼吸机相关性肺炎是引起院内感染的主要原因之一,可通过使用人工鼻、密闭式吸痰、声门下吸引、优化营养供给、加强口腔护理等综合性干预措施降低其发生,提高医疗质量。     

脂蛋白肾病1例

患儿,女,11岁,因发现蛋白尿4个月,在当地医院诊断为肾病综合征予足量激素治疗3个月无效后于2011年4月20日入住我院。患者无兄弟姐妹,父亲5年前死于尿毒症,母亲离家无法联系,家族其他成员无肾脏病史。入院体格检查:血压145/100 mmHg,体重33.5 kg,激素(库兴氏)面容。腹部膨隆,肝、脾、双肾未触及,移动性浊音阳性。双下肢中度凹陷性水肿。实验室检查:尿常     

变应性鼻炎患者外周血T-bet的表达及其与IgE和嗜酸粒细胞阳离子蛋白的关系

目的探讨变应性鼻炎(ALLERGIC RHINITIS,AR)患者外周血单核细胞(PERIPHERAL BLOODMONOUCLEAR CELLS,PBMC)中转录因子T-BET MRNA的表达及其与血清总IGE(TIGE)、患者鼻过敏症状和嗜酸粒细胞阳离子蛋白(EOSINOPHILE CATIONIC PROTEIN,ECP)的关系。方法用UNICAP CAP系统检测血清变应原、TIGE和ECP的含量。取22例对尘螨过敏的AR患者和8例健康人静脉血,密度梯度离心分离PBMC,其中部分PBMC用50ΜG/ML螨变应原培养刺激,用逆转录-聚合酶链反应(REVERSETRANSCRIPTASE-POLYMERASE CHAIN REACTION,RT-PCR)检测T-BET MRNA的表达。结果①AR患者和正常人T-BET MRNA表达强度与参照物Β-ACTIN的比率(X-±S)分别是0·381±0·099和0·750±0·067,差异有统计学意义(P<0·01);②T-BET MRNA的表达强度分别与AR患者症状评分、ECP的水平没有相关性(R分别是0·187和-0·165,P值均>0·05);③而T-BET MRNA表达强度与患者血清TIGE水平呈负相关(R=-0·525,P<0·05);④变应原刺激前后T-BET MRNA表达强度分别是0·381±0·099和0·365±0·104,差异无统计学意义(P>0·05)。结论变应原为螨的AR患者PBMC中,T-BET MRNA表达较健康人低,T-BET MRNA低表达是AR发生TH1和TH2失衡机制中的重要环节之一。T-BET MRNA的下调表达程度与AR患者症状严重程度和ECP浓度无关。特异性变应原的刺激对AR患者PBMC中的T-BET表达没有影响。T-BET是间接影响IGE水平的因素之一。     

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测DNA甲基化方法的建立

近期，表观遗传学与肿瘤发生关系的研究日益增多。DNA甲基化是表观遗传学的重要组成部分，并已成为肿瘤早期诊断的研究热点。甲基化特异性PCR（MSP）是检测DNA甲基化的常用方法之一，该方法灵敏度和特异度高，但操作繁琐，难以自动化。TaqMan荧光定量PCR法，即Methylight在MSP的基础上设计1条TaqMan探针，该方法的准确性和检测的灵敏度都很高。然而，因需要设计合成特异的探针而使其的应用受限，而且TaqMan探针昂贵。本研究建立SYBRGreenⅠ荧光定量PCR（FQ—PCR）检测DNA甲基化的方法，通过临床标本检测和对比试验，以证明其与Methylight的检测效能，以便为DNA甲基化检测的临床应用提供工具。     

高分辨荧光熔解曲线法检测脊肌萎缩综合症SMNt基因7号外显子缺失

目的 探讨高分辨荧光熔解曲线分析在SMNt基因7号外显子缺失检测中的应用. 方法 用高分辨荧光熔解曲线分析方法分析脊肌萎缩综合症SMNt基因7号外显子纯合缺失、SMNc基因7号外显子纯合缺失及未见SMNt、SMNc完全缺失三种情况. 结果 高分辨荧光熔解曲线分析方法能很好地区分SMNt基因7号外显子纯合缺失...     

变应性鼻炎患者外周血T—bet及CD19／CD23对标准化变应原体内刺激的反应

目的探讨变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）患者经体内螨变应原刺激后T-bet和CD19／CD23的变化。方法采取15例健康人和60例接受标准化螨变应原疫苗的体内特异性免疫治疗（SIT）达1年的AR患者外周血,用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）分析SIT前后1年外周血单核细胞（PBMC）中的T—bet mRNA表达变化情况。另外用流式细胞术（FCM）检测患者CD19／CD23水平SIT前后1年变化情况。结果24例AR患者SIT前后PBMC中T—bet表达水平分别为（0．44±0．14）和（0．49±0．09）,差异有统计学意义（t=2．324,P〈0．05）。在对照组,该比值为（0．59±0．09）,显著高于AR患者（P〈0．01）。对照组和AR组CD19／CD23水平分别是（5．99±2．44）％和（13．53±5．41）％,P〈0．05。42例单纯AR患者和合并有哮喘的18例AR患者的T—bet表达水平分别是（0．49±0．12）和（0．33±0．09）,两组CD19／CD23水平分别是（12．32±5．71）％和（16．34±3．32）％,t值分别为5．411和3．407,P均〈0．01;T—bet与CD23存在负相关（r=-0．260,P〈0．05）。经SIT后,CD23水平显著下降（t=2．334,P〈0．05）。经SIT后,T—betmRNA表达显著上调（t=-2．324,P〈0．05）。结论T—bet在AR患者PBMC中的表达均下调;AR患者经SIT后,可以看到T—bet表达的上调和CD23水平的下降。T—bet对变应原体外反应低下,而对体内小剂量变应原刺激产生保护性的Th1型免疫反应。对变应性鼻炎SIT机理的新认识认为,转录因子水平是通过Th1优势来纠正Th1／Th2失衡,而这种方式是以Th1型特异性相关转录因子的上调表达介导的。     

2005—2007年广州地区腹泻儿童感染轮状病毒情况分析

目的了解近3年来广州地区儿童肠道轮状病毒感染情况。方法收集2005年1月至2007年12月收治的包括门诊和住院的急性腹泻患儿的大便标本,采用免疫胶体金技术对标本进行轮状病毒抗原检测。结果轮状病毒2005、2006和2007年平均感染率分别为44．70％、38．22％和39．99％;与2006、2007年相比,2005年轮状病毒感染高峰和波谷均向后推延1个月。抗原检测阳性例数在6～24个月婴幼儿最高,全年感染率在性别上差异无统计学意义。结论轮状病毒是引起婴幼儿病毒感染性腹泻的主要病原体,气候可能对广州地区轮状病毒感染有较大影响。