美伐他汀诱导人非小细胞肺癌细胞凋亡及其分子机制的研究

目的:研究美伐他汀对非小细胞肺癌细胞(nod-small-cell lung cancer,NSCLC)诱导凋亡及其分子机制。方法:应用MTT法检测美伐他汀对A549、NCI-H520细胞株的体外增殖作用,应用流式细胞仪,透射电镜,研究美伐他汀对A549、NCI-H520细胞株的细胞周期阻滞和诱导调亡的作用,应用流式细胞术和RT-PCR检测P21蛋白、P21 mRNA、XIAP mRNA的表达,以研究细胞周期阻滞和诱导调亡的机制。结果:MTT试验表明:美伐他汀对A549、NCI-H520增殖有明显的抑制作用,且表现为剂量依赖性和时间依赖性;流式细胞学显示:美伐他汀诱导A549、NCI-H520细胞G0／G1期阻滞;Annexin V结果证实美伐他汀可诱导A549、NCI-H520细胞凋亡,而且凋亡率随剂量的增加而增加。美伐他汀对A549、NCI-H520细胞P21 mRNA及P21总蛋白的表达无影响,但可使P21细胞膜蛋白的表达下降。美伐他汀作用后XIAP mRNA的表达下降,加入外源性甲羟戊酸可完全逆转美伐他汀的上述作用。结论:美伐他汀通过抑制甲羟戊酸合成途径诱导NSCLC细胞G0／G1阻滞,抑制增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制P21蛋白异戊二烯化和下调XIAP mRNA的表达有关。     

重组变构人TNF相关促凋亡配体联合三氧化二砷诱导白血病耐药细胞株凋亡

本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体（recombinant mutant human TNF—related apoptosis—inducing ligand，rmhTRAIL）联合三氧化二砷（As2O3）对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562／AO2（mdr-1^＋）的促凋亡作用，以亲本阿霉素敏感细胞株K562（mdr-1^-）为对照，观察rmhTRAIL作用后细胞形态变化，采用MTT法测定rmhTRAIL、As2O3单药及联合作用后细胞增殖抑制率；碘化丙锭染色的流式细胞术（FACSCalibur）定量检测rmhTRAILL、As2O3单药及联合作用后sub—G1峰占检测细胞的百分比（sub—G1％）。结果表明：rmhTRAIL联合As2O3对K562／AO2和K562增殖的抑制作用优于单药，采用国内金（正均）氏公式判断rmhTRAIL和As2O3联合作用具有协同作用；流式细胞术定量检测sub—G1％显示，rmhTRAIL 2000ng／ml与As2O3 2μmoL／L单独作用下K562／AO2组与K562组凋亡率分别为（34．93±0．10）％、（10．53±0．16）％（P〈0．01）；（5．95±0．07）％、（3．50±0．01）％（P〈0．05），联合作用下细胞凋亡率分别为（50．95±0，91）％、（20．75±0．95）％（P〈0．05），K562／AO2组凋亡效应强于K562组．结论：rmhTRAIL可诱导K562、K562／AO2细胞凋亡；rmhTRAIL联合凋亡诱导剂As2O3对白血病耐药细胞株K562／AO2和K562细胞株的凋亡具有协同作用；rmhTRAIL、As2O3对K562／AO2的促凋亡作用优于其亲本K562细胞．     

多发性硬化症的观察护理

多发性硬化症的观察护理〔英〕／ＦｒｏｚｅｎａＣ／／ＡｍＪＮｕｒｓ．－１９９７，９７（１１）．－４８多发性硬化症（简称ＭＳ）是一种逐渐发展的退行性病变。其特征是中枢神经系统白质（偶而也有灰质）部分神经髓鞘的破坏（即脱髓鞘）导致神经传导异常。其病因未明，...     

β-榄香烯抑制人骨髓瘤细胞增殖

目的:研究从温郁金中提取的β-榄香烯对人骨髓瘤RPMI-8226细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测细胞增殖;AnnexinV/PI双标流式术检测细胞周期、细胞凋亡;Hoechst33342/PI双染荧光显微镜观察β-榄香烯处理后骨髓瘤RPMI-8226细胞形态学变化。结果:β-榄香烯对RPMI-8226骨髓瘤细胞生长具有显著抑制作用,呈浓度和时间依赖性。与对照组相比G0/G1细胞比例显著升高,而S、G2/M细胞比例降低。β-榄香烯作用48h可诱导骨髓瘤细胞凋亡,凋亡率随药物浓度而递增。结论:β-榄香烯可有效抑制人骨髓瘤细胞增殖;其抑制作用与细胞周期阻滞和细胞凋亡激活有关。     

沙利度胺对胶原诱导性关节炎大鼠骨髓红系祖细胞的影响及可能机制

目的探讨沙利度胺对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)大鼠红系祖细胞的影响机制。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、高、低剂量沙利度胺组和甲氨喋呤组,制定CIA大鼠模型,于初次免疫后第12 d给药,第21 d及第60 d处死大鼠,测定甲基纤维素半固体培养基中大鼠骨髓红系集落数目;流式细胞术测定骨髓单个核细胞中的CD34 /CD71 细胞数目并应用7-氨基放线菌D(7-amino-actinomycin D,7AAD)染色检测其凋亡率;ELISA法测定大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的浓度。结果模型组大鼠骨髓红系形成集落的能力明显下降(P<0.05);骨髓CD34 /CD71 细胞数目减少(P<0.05),且凋亡率明显增加(P<0.05);血清中TNF-α浓度明显增加(P<0.05)。沙利度胺可以提高模型组大鼠骨髓红系集落及CD34 /CD71 细胞的数目(P<0.05),降低后者的凋亡率及血清TNF-α水平(P<0.05)。结论胶原诱导性关节炎大鼠骨髓红系祖细胞的凋亡明显增加,沙利度胺可以减少凋亡率,增加骨髓红系造血。     

腹腔镜与开腹脾切除术对小儿机体早期免疫功能影响的比较

临床上许多小儿难治性血液病最终都需要脾脏切除才能够缓解.但是作为机体一个重要的免疫器官,脾脏切除会对机体免疫功能产生重要影响.因此,如何减轻脾切除患儿创伤,维护其免疫功能至关重要.     

TRAIL对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226黏附和凋亡的影响及其作用机制的初步探讨

本研究探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL对人多发性骨髓瘤细胞系RMPI8226的生长抑制作用,对细胞黏附和凋亡的影响及其作用机制。用MTT法检测TRALL对RPMI8226黏附功能和生长的影响;用AnnexinⅤ/PI检测细胞凋亡;流式细胞学检测细胞表面黏附分子的表达;RT-PCR法测定凋亡相关基因表达水平和Western blot法检测凋亡相关蛋白表达。结果表明:TRAIL抑制RPMI8226细胞生长;可诱导RPMI8226细胞凋亡,并伴有抗凋亡基因Mcl-1、XIAP、cFLIP、CARP1、CARP2和Bcl-2mRNA表达水平下降,促凋亡基因Bax mRNA表达水平升高;RPMI8226细胞内的凋亡执行蛋白caspase-3和NF-κB P65(RelA)表达水平随TRAIL浓度的增加而下降。此外,TRAIL明显上调了RPMI8226细胞表面黏附分子CXCR4的表达。结论TRAIL上调人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞表面的黏附分子CXCR4表达水平。TRAIL可诱导人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡。在一定的浓度范围内,TRAIL对人骨髓瘤细胞株RPMI8226的生长抑制呈时间-剂量依赖性。     

沙利度胺对实验性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响

目的 研究不同浓度沙利度胺对体外培养成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)凋亡的影响.方法 体外培养及纯化FLS,分为6组:对照组,脂多糖(LPS)组,LPS+高剂量沙利度胺(50 mg/L)组,LPS+中剂量沙利度胺(5 mg/L)组,LPS+低剂量沙利度胺(0.5 mg/L)组,LPS+甲氨蝶呤(MTX)组.48小时后显微镜及电镜观察不同处理组FLS形态,膜黏连蛋白-5/碘化丙啶(Annexin- V/PI)联合标记法测定FLS凋亡率及坏死率.结果 ①原代滑膜细胞培养3代后以梭形且呈极向排列FLS为主;②沙利度胺及MTX处理后FLS渐呈不规则形,细胞变圆缩小,透射电镜下可见典型细胞凋亡.③中、高剂量沙利度胺及MTX组凋亡率和坏死率均高于对照组、LPS组及低剂量沙利度胺组,凋亡率分别为(5.72±1.42)％、(8.07±1.45)％、(11.28±2.48)％vs (0.30±0.09)％、(0.24±0.05)％、(0.40±0.04)％(P＜0.05),坏死率分别为(12.96±4.32)％、(20.34±4.43)％、(18.11±1.17)％ vs (0.22±0.08)％、(0.13±o.09)％、(1.94±1.16)％(P＜o.05);低、中、高剂量沙利度胺及MTX组凋亡率均依次升高(P＜0.05);低、中、高剂量沙利度胺组及MTX组坏死率均依次升高(P＜0.05);高剂量沙利度胺组与MTX组坏死率之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 沙利度胺能够诱导FLS凋亡,在一定浓度范围内该作用呈剂量依赖性.沙利度胺对FLS早期凋亡作用弱于MTX,对晚期凋亡作用与MTX相同.     

急性移植物抗宿主病中Ly49A+T淋巴细胞的分布及其调节

目的 :探讨急性GVHD模型中小鼠杀伤性细胞抑制性受体Ly4 9A在造血系统T淋巴细胞亚群的表达及CsA、IL 4、IL 15对Ly4 9A表达的调节 ;方法 :BALB c、C5 7BL 6、CB6F1间脾细胞和骨髓细胞混合移植 ,建立急性GVHD模型 ,利用FCM双色免疫荧光检测 ,动态观察植入后不同时间造血器官T淋巴细胞亚群中Ly4 9A表达情况 ;体外T淋巴细胞培养观察IL 4、IL 15对Ly4 9A表达的调节 ;结果 :①Ly4 9AB6 在B6、F1小鼠的外周血、脾脏和骨髓细胞中均有表达 ,但在胸腺中基本无表达 ;②aGVHD中CD3 Ly4 9A 及CD8 Ly4 9A T细胞在移植早期增加 ,1w后迅速减低 ,至移植后 5w开始升高 ,并可超过移植前 ;CsA明显下调Ly4 9A变化幅度 ;③IL 4、IL 15均有上调脾CD3 Ly4 9A 细胞群的作用 (P =0 0 0 1)。结论 :Ly4 9A T细胞主要出现在外周淋巴器官 ;供者Ly4 9A T细胞在改变的MHC背景环境下 ,趋向于对宿主的免疫耐受 ,抑制性受体表达增加 ;骨髓的造血微环境可影响骨髓Ly4 9A T细胞比例的变化 ;一些细胞因子可以调节抑制性受体表达率     

急性白血病患者CD62L表达的临床意义

L-选择素（L-selectin，CD62L）属于选择素家族中的一个成员，是重要的黏附因子，在造血祖细胞向骨髓归巢和细胞再分布中起着重要作用。急性白血病（AL）往往表现出造血细胞增殖、分化和分布的异常，免疫系统受损。为进一步了解CD62L在AL患者中的表达及临床意义，我们应用流式细胞术（FCM）检测了71例成人AL患者CD62L的表达水平，分析CD62L与治疗效果和预后的关系。