纵隔肿物浆细胞增多

1 病历摘要 患者,女,46岁.1994年1月查体发现纵隔肿物,在某省级医院行切除术后,病理结果示霍奇金淋巴瘤(HL)结节硬化型.术后以COAP方案化疗4个疗程,好转出院.患者自1994年手术后至2002年多次复发,以COPP、COMP、VP、APEC方案序贯治疗达完全缓解,间断以COTP、COTVm-26、COPP等方案强化治疗.     

寻常性银屑病患者外周血Th22细胞及血清中IL-22的水平

目的检测寻常性银屑病患者外周血Th22细胞及其效应因子IL-22在血清中的水平,探讨Th22细胞与银屑病的关系。方法分别采用流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)检测23例寻常性银屑病患者(进行期12例,稳定期11例)和11例对照者外周血Th22细胞及血清中IL-22的水平。结果 Th22细胞的水平比较,病例组(1.90±1.73)%高于对照组(1.47±0.96)%,进展期组(2.30±1.63)%高于稳定期组(1.75±1.29)%,但差异均无统计学意义(P均>0.05);而且病例组Th22细胞水平与PASI评分无相关性(P>0.05)。IL-22水平比较,病例组(8.46±6.23)高于对照组(5.28±2.66),进展期组(8.75±4.58)高于稳定期组(6.35±2.46),差异均有统计学意义(P均<0.05);且病例组IL-22的水平与PASI评分呈正相关(P<0.05)。结论 IL-22可能参与银屑病的发病,但外周血Th22细胞水平与银屑病发生和发展无直接相关性。     

外源性SHIP基因表达抑制生长因子介导的 K562细胞增殖及Akt磷酸化

 【目的】 探讨SHIP基因对IL-3诱导K562细胞系增殖的抑制作用,阐明SHIP对K562细胞作用的机制&#65377;【方法】 将慢病毒质粒pReceiver-Lv31-FIV和pReceiver-Lv31-SHIP转染K562细胞;转染细胞与IL-3共培养,Western blot法检测K562细胞Akt磷酸化;观察转染野生型SHIP基因对K562细胞增殖的影响;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺失末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡&#65377;【结果】 重组慢病毒载体pReceiver-Lv31-FIV和pReceiver-Lv31-SHIP转染K562细胞,GFP阳性率为74.6%&#65377;野生型SHIP基因阻断了IL-3对K562细胞的增殖作用,对照组(K562/FIV)细胞增殖抑制率(3.26%)明显低于转染SHIP基因组细胞增殖抑制率(26.42%,P < 0.05);集落形成实验显示SHIP能显著抑制K562细胞集落形成能力[IL-3作用组K562/SHIP细胞形成集落为60.3 ± 6.6,明显低于IL-3诱导的K562/FIV组(91.7 ± 4.2)](P < 0.01)&#65377;细胞形态观察发现凋亡增加,Western blot检测发现转染SHIP基因组前凋亡酶pro-caspase-3降解增加,TUNEL法证实SHIP蛋白促进细胞凋亡&#65377;IL-3作用不同时间段(3 h, 6 h, 12 h),转染野生型SHIP组细胞增殖明显减弱,且Akt磷酸化水平均低于对照组(P < 0.05)&#65377;【结论】 SHIP基因负调控生长因子(IL-3)介导的K562细胞增殖及其蛋白激酶活化&#65377;     

JAK家族基因与细胞因子信号传导抑制因子家族基因在白血病细胞中的表达及意义

目的 探讨SOCSs基因和JAKs基因在急性髓系白血病(AML)患者中的表达情况.方法 RT-PCR方法检测AML患者和正常对照骨髓SOCS 1～7、JAK 1～3和TYK 2 mRNA的表达.结果 ①AML患者SOCS 1、4、5、7的表达明显低于缓解组和正常对照组(P<0.01),SOCS 3、6表达水平较缓解组和正常对照组高(P<0.01),SOCS 2在各组无明显差异;AML患者JAK2、JAK3、TYK2 mRNA平均表达水平较缓解组和正常对照组明显增高(P<0.05).初治AML患者JAK1 mRNA表达水平较正常对照组略增高,但差异无统计学意义(P>0.05),复发AML患者JAK1 mRNA表达水平较正常对照组明显增高(P<0.05).结论 AML患者的SOCS 1、4、5、7基因表达缺失或降低,JAK家族基因表达明显增高,提示二者可能共同参与髓系白血病的发生.     

发热、白细胞增高、肝大、巨脾

病历摘要 患者男,13岁,主因"发烧、腹痛10余天"于2007年8月入住河北医科大学第二医院. 既往史:患者于2004年5月因腹部膨隆半年入院检查,肝脾大,WBC 148.9×109/L,PLT 1135×109/L.外周血涂片原始粒细胞、幼稚粒细胞稍多,嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞多见.     

酪氨酸磷酸酶抑制剂正矾酸钠对Raji淋巴瘤细胞增殖与凋亡的影响及机制探讨

为了探讨蛋白酪氨磷酸酶（PTPase)通路在淋巴瘤细胞增殖与凋亡中的作用及机制，应用细胞培养结合MTT检测，光镜及电镜形态学观察，DNA凝胶电泳，流式细胞术和RT-PCR研究了特异的酪氨酸磷酸酶抑制剂正矾酸钠（Na3VO4)对Burkitt淋巴瘤细胞系Raji的影响。结果：MTT检测及CFU-Raji培养显示Na3VO4对Raji细胞呈浓度依赖性抑制作用；倒置显微镜下原位观察发现随Na3VO4浓度增加，细胞体积明显缩小，核固缩，核染色质核膜下聚集，呈典型凋亡小体状；细胞胞体出芽，核染色质凝聚，核碎裂，电镜观察出现典型凋亡细胞；膜联蛋白染色显示Na3VO4诱导Raji细胞凋亡，线粒体跨膜电位下降，且在一定范围内呈浓度依赖性；DNA凝胶电泳出现DNA梯形条带；流式细胞术及RT-PCR示Na3VO4下调Bcl-2蛋白及mRNA的表达；细胞周期分析显示经Na3VO4处理的细胞出现G2-M期阻滞，细胞周期蛋白B1（cyclinB1)及mRNA的表达下调，结论：PTPase通路信号传导参与了Raji细胞增殖与凋亡过程的调节，加入其特异抑制剂Na3VO4可通过下调细胞周期蛋白B1的表达引起G2-M期阻滞抑制增殖，下调Bcl-2的表达及降低线粒体跨膜电位诱导Raji细胞凋亡。     

细胞分化抗原胞浆CD79a在急性白血病细胞上的表达

目的探讨细胞分化抗原胞浆CD79a(CyCD79a)在各型急性白血病细胞上的表达情况及其意义。方法选取2003年1月至2004年4月河北医科大学第二医院急性白血病患者214例及外院选检病例标本7例,采用CD45/SSC双参数散点图设门方法和三色流式细胞术,对急性白血病患者221例各型急性白血病的细胞免疫表型CyCD79a等B系分化抗原进行检测,比较各型急性白血病患者的表达率。结果急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者CyCD79a表达率为100%(57/57),高于CD10、CD19、CD20和胞浆CD22(CyCD22)等其他B系分化抗原表达率;急性髓细胞白血病(AML)患者CyCD79a表达率为0.7%(1/134),低于或等于上述其他B系分化抗原表达率;急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者CyCD79a表达率则为13.3%(2/15)。结论Cy-CD79a对B-ALL具有较高的敏感性和较好的特异性。因此,CyCD79a可以作为诊断B-ALL的一线和首选免疫标志,并可用于B-ALL与T-ALL和AML的鉴别诊断。     

白血病细胞内SHIP基因表达及其对AKT磷酸化的影响

SHIP（SH2 domain containing inositol 5’-phosphatase）基因位于人类染色体2q36-37．1，广泛表达于造血细胞。SHIP基因敲除小鼠可表现出骨髓细胞的高度增生。SHIP可特异地清除磷脂酰肌醇3激酶（P13K）代谢产物P1P3，从而抑制其下游信号分子AKT的磷酸化。这些研究表明，SHIP可能作为潜在的肿瘤抑制基因对造血细胞的发生、发展及功能起着关键的负调控作用。我们应用实时定量PCR的方法检测T、B及髓系白血病细胞中SHIP基因的表达，初步证实SHIP基因表达和AKT磷酸化水平呈现负相关关系，同时证实bcr—abl融合基因产物对SHIP基因表达有抑制作用。     

线粒体神经酰胺酶上调K562细胞Bcl-2蛋白表达水平

最近，克隆了一种新的选择性定位于线粒体的神经酰胺酶，提示线粒体存在着神经酰胺代谢途径，可能对线粒体的功能，特别对凋亡产生影响。本研究将线粒体神经酰胺酶基因转染到K562细胞，以此了解线粒体神经酰胺酶的细胞生物学效应。以脂质体介导将含有线粒体神经酰胺酶cDNA的pcDNA3．1／His—CDase质粒转染到K562细胞，G418筛选阳性克隆，建立稳定表达线粒体神经酰胺酶的K562TC细胞株。用MTT法、annexin V／PI法、FCM及Westernblot分别检测K562与K562TC细胞在细胞毒药物抗性、血清剥夺耐受性及Bcl-2蛋白表达水平方面的差异。结果表明：虽然K562TC与K562细胞对阿霉素、足叶乙甙及亚砷酸的敏感性没有差异，但是K562TC细胞Bcl-2蛋白水平明显升高，抗血清剥夺能力明显增强。以硫代反义寡核苷酸特异性封闭K562TC细胞线粒体神经酰胺酶，下调Bcl-2蛋白表达水平；二甲基鞘氨醇(鞘氨醇激酶抑制剂，降低细胞内1-磷酸鞘氨醇水平)同样下调K562TC细胞Bcl-2蛋白表达水平，而1-磷酸鞘氨醇明显上调K562细胞Bcl-2表达水平。结论：线粒体神经酰胺酶将线粒体神经酰胺代谢为鞘氨醇，进而在鞘氨醇激酶作用下生成1-磷酸鞘氨醇，此代谢途径上调K562细胞Bcl-2蛋白表达水平。     

关于成年人急性髓细胞白血病按预后分组化疗的建议

 急性髓细胞白血病（AML）是一组异质性很强的恶性造血克隆性疾病,化疗是其主要治疗手段,初治时通常使用标准方案,而在复发和（或）难治时使用强化或变更药物等手段,实际上这种策略忽略了AML的异质性,尤其是遗传学的异质性。因此建议无论是初治还是复发的患者都应进行评价并根据不同的预后因素分组,再根据分组情况对治疗进行相应的调整。