河北汉族人群四个X染色体短串联重复序列基因座遗传多态性研究

目的调查DXS6800、DXS6797、GATA172D05、DXS9864个基因座在河北汉族人群中的遗传多态性。方法无关个体样本基因组DNA的提取采用酚-氯仿法,家系和腐败降解检材基因组DNA的提取采用Chelex-100法。用PCR和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及DNA序列分析河北汉族150名无关男性及150名无关女性个体DXS6800、DXS6797、GATA172D05、DXS9864个基因座的遗传多态性。结果4个基因座共检测到25个等位基因,男性个体共检出138种单倍型,男性单倍型多样性为0.9986。结论DXS6800、DXS6797、GATA172D05、DXS9864个基因座的多态性数据为X染色体短串联重复序列数据库的建立提供了河北汉族人群的群体遗传学资料。     

河北汉族人群五个基因座遗传多态性研究

目的调查DXS6801，DXS6809，DXS7423，DXS7424，DXS9902五个基因座在河北汉族人群中的遗传多态性。方法用PCR和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及DNA序列分析河北汉族114名无关男性及118名无关女性个体DXS6801，DXS6809，DXS7423，DXS7424，DXS9902五个基因座的遗传多态性。结果5个基因座共发现了31个等位基因，男性个体共检出了101种单倍型，男性单倍型多样性为0．9975。论结5个基因座在河北汉族人群中有较高的多态信息含量，有潜在的法医学应用价值。并为X染色体短串联重复序列数据库的建立提供了河北汉族人群的遗传学数据。     

CCK-8抗内毒素所致低血管反应性及其机理初探

内毒素休克（ｅｎｄｏｔｏｘｉｃｓｈｏｃｋ,ＥＳ）是临床常见的危重病症之一,其病死率极高,一直受到国内外医学界的高度重视。内毒素的主要致毒成分脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）及其诱生的各种细胞因子诱导诱生型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃ...     

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导小鼠分泌IL-12的影响及其机制研究

目的：观察八肽胆囊收缩素（CCK-8）对脂多糖诱导小鼠分泌IL-12的影响，探讨核因子-κB（NF-κB）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）的信号转导作用。方法：雌性BALB/c小鼠经LPS诱导后分别给予CCK及CCK-A、B受体拮抗剂。ELISA法检测小鼠血清及肺、脾组织中IL-12p40、p70的表达；Western blotting法检测肺脏、脾脏IκB、p38 MAPK的表达；EMSA法检测肺、脾组织中NF-κB/DNA的结合活性。结果：CCK-8进一步提高了LPS诱导的小鼠血清及肺、脾组织中IL-12p40、p70的表达；抑制IκB磷酸化和NF-κB/DNA结合活性；促进p38 MAPK磷酸化。而CCK-A受体拮抗剂（CR-1409）及CCK-B受体拮抗剂（CR-2945）部分逆转了CCK-8的效应。结论：CCK-8可促进LPS诱导小鼠分泌IL-12，p38 MAPK可能参与了其信号转导机制，而NF-κB途径可能并未参与CCK-8促IL-12分泌这一过程。     

CCK-8对LPS诱导小鼠骨髓来源树突状细胞分泌IL-12的影响

目的探讨八肽胆囊收缩素(cholecystokinin-octopep-tide,CCK-8)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠骨髓来源的树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cell,BM-DC)分泌IL-12的影响。方法应用免疫荧光技术观察BM-DC表面CCK受体表达情况,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测CCK-8对LPS诱导BM-DC分泌IL-12的影响,Western blot技术检测CCK-8对LPS诱导BM-DC细胞p38MAPK磷酸化的影响。结果BM-DC表面存在CCK-1R和CCK-2R;CCK-8促进LPS对BM-DC表达IL-12的诱导作用呈剂量依赖性(10-10、10-8、10-6mol·L-1);并能增加其p38磷酸化水平;CCK的1、2受体拮抗剂CR1409或CR2945均可减弱CCK-8的此种效应。结论CCK-8剂量依赖性促进了LPS诱导BM-DC分泌的IL-12,该作用由CCK-1R和CCK-2R介导,可能是通过促进p38MAPK的磷酸化作用而实现的。     

CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响

目的探讨CCK-8抗炎作用中DAG-PKC信号通路对cAMP-PKA信号通路的影响。方法分离纯化大鼠PIMs,分别用LPS、CCK、LPS+CCK、PMA、SC-3088、LPS+PMA、LPS+SC-3088、CCK+PMA、CCK+SC-3088、LPS+CCK+PMA、LPS+CCK+SC-3088孵育一定时间,采用125I-cAMP放射免疫分析法测定细胞内cAMP含量,用放射激酶法测定PKA活性。结果单独应用PMA和SC-3088孵育大鼠PIMs,细胞内cAMP含量和PKA活性与正常对照组相比无明显变化(P>0.05)。PMA可升高LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性(P<0.01),SC-3088则可使LPS作用下的细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01)。分别应用PMA、SC-3088与CCK共同孵育,则CCK+PMA组细胞内cAMP含量和PKA活性高于单独应用CCK组(P<0.01),CCK+SC-3088组则降低(P<0.01)。与LPS+CCK组相比,PMA+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性升高(P<0.01),而SC-3088+LPS+CCK组细胞内cAMP含量和PKA活性降低(P<0.01)。结论在LPS诱导的大鼠PIMs,CCK-8可通过激活cAMP-PKA信号通路发挥抗炎作用;DAG-PKC信号通路的活化对cAMP-PKA信号通路有正性调节作用。     

过氧亚硝基阴离子对离体兔肺动脉反应性变化的影响

目的 :在内毒素休克发病过程中 ,肺动脉张力调控机制发生明显紊乱 ,表现为肺动脉压早期增高而晚期降低 ,对休克的预后有明显影响。我们的实验证实 ,内毒素血症早期 ( 6ｈ)大鼠肺动脉肌层有过氧亚硝基阴离子 (ＯＮＯＯ- )生成。ＯＮＯＯ- 为一氧化氮和超氧阴离子的快速非酶促反应产物 ,具有明显的氧化作用。ＯＮＯＯ- 可能是内毒素休克时导致肺动脉反应性异常的重要因素。方法 :实验应用离体血管环张力测定技术 ,观察ＯＮＯＯ- 孵育后的离体兔肺动脉环 (ＰＡＲｓ)对内皮依赖受体依赖性舒张剂乙酰胆碱 (ＡＣｈ)和二磷酸腺苷 (ＡＤＰ)、内皮依…     

二烯丙基三硫对脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S细胞因子生成的影响

目的 探讨二烯丙基三硫（DATS）对脂多糖（LPS）诱导小鼠肺泡巨噬细胞株MH-S细胞因子生成的影响。方法 体外培养MH-S细胞，用DATS和（或）LPS进行干预。酶联免疫吸附法测定细胞上清液中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）浓度。反转录PCR检测细胞中TNF-α、IL-1β mRNA表迭。结果 LPS（1mg／L）孵育细胞1、2、3、6h，TNF-α、IL-1β的蛋白生成及其mRNA表达均较对照组明显增加（P〈0．01），呈时间依赖性。用DATS（0．1、0．5、2．5、5．0ms／L）预处理细胞30min后再给予LPS刺激3h，可使TNF-α、IL-1β含量及其mRNA表达明显降低，并呈剂量依赖性，其中TNF-α含量仍高于对照组（P〈0．05），但IL-1β含量在2．5、5mg／LDATS作用下可降至对照组水平。单独DATS对TNF-α及IL-1β的生成及其mRNA表达无明显影响（P〉0．05）。结论 DATS通过抑制LPS诱导的小鼠MH-S细胞TNF-α、IL-1β mR-NA表达而减少其蛋白生成，具有直接的抗炎效应，这是DATS预防ALI发生、减轻肺组织损伤的重要机制。     

河北汉族群体mtDNA HV1、HV2重叠片段及编码区8430-8673nt序列多态性

目的了解河北汉族群体线粒体DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)HV1、HV2区重叠片段及编码区8430-8673nt的序列多态性。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性结合测序方法对100名河北汉族个体进行单倍型分布调查。结果在河北汉族100名健康无关个体中，共分出91种单倍型。遗传变异度为0．9985．耦合概率为0．0115。测序结果与Anderson序列比较，共检测出65个变异位点，44个与MITOMAP收录的基因突变相同，9个与所收录的不同，12个未见收录。结论线粒体DNA在河北汉族群体中有较好的多态性分布，是法医学个人识别和母系亲属认定良好的遗传标记，为mtDNA在河北法医学鉴定提供了基础数据。     

nNOS基因在慢性吗啡作用的SK-N-SH细胞的表达及调控

cAMP和转录因子CREB磷酸化水平升高是慢性吗啡依赖及耐受形成的基础.对于CREB与其调控的下游基因在其中的表达变化研究较少.首次研究了在慢性吗啡诱导的SK-N-SH细胞CREB的DNA结合活性及nNOS基因表达变化.该细胞株以1.5∶1的比例表达μ及δ受体,故实验结果更可靠.