移植物抗宿主反应在免疫介导再生障碍贫血发病中的作用

本实验通过大体和组织学观察,脾指数、腘窝淋巴结称重试验以及~(125)I-UdR掺入试验,探讨移植物抗宿主反应(GvHR)在免疫介导小鼠再障模型发病中的作用。从腘窝淋巴结称重试验和~(125)I-UdR掺入试验结果表明,DBA/2小鼠淋巴细胞输给BALB/c小鼠可以引起GvHR,而且呈细胞量依赖关系,但再障小鼠的皮肤、肠、肝、脾组织学检查均未发现GvHR,脾指数毫无例外地明显降低,而且再障小鼠并不因输入细胞量增加而表现发病率增加,存活期缩短现象,提示GvHR在免疫介导小鼠再障中不起重要作用。     

三七总皂苷对小鼠多能造血干细胞的作用

三七总皂苷是中药三七的主要有效成份.临床早已应用为补血药.但对其机理的研究则甚少.我们研究了三七总皂甙对正常小鼠骨髓多能造血干细胞CFU-S的作用.     

造血生长因子HGFs联合应用对人脐血造血细胞在SCID小鼠体内扩增作用的研究

体外已证实各种重组人造血生长因子（HGFS）联合协同扩增造血干细胞。粒细胞集落刺激因子（RHG—SCF）或粒一单细胞集落刺激因子（rhGM—CSF）已用于肿瘤病人化疗后粒细胞减少及造血干细胞移植后的中性粒细胞恢复。但HGFS对造血干／祖细胞在体内的扩增作用研究不多。我们在己建立SCID／J＼鼠／人脐血细胞及骨髓（BM）造血干细胞在SCID小鼠体内扩增效应。材料与方法1·样本来源1．ISCID小鼠：共30．q，雌性18只、雄性12只，8—12周龄。购自中山医科大学肿瘤研究所动物实验中心。标准动物实验室喂养。1·2UCB来自中山医科大学…     

大鼠胚胎卵黄囊内和腹腔内人脐血造血干细胞移植的比较

目的:探讨人脐血造血干细胞宫内移植的更好途径。方法:将人脐血单个核细胞注入大鼠胚胎的卵黄囊及胎鼠腹腔内,并设阴性及空白对照组,观察手术并发症及妊娠结局,待出生后1个月及2个月,分别用流式细胞仪和免疫组化检测移植情况。结果:胎鼠腹腔途径组的手术并发症发生率、胎鼠丢失率显著高于卵黄囊途径组(P<0.001,P<0.05)。出生后实验组仔鼠外周血中检测到逐渐增加的人CD3细胞,卵黄囊组的增殖量高于腹腔途径组(P<0.05)。卵黄囊组的种植率为89.7％,腹腔组的种植率为64.0％,二者比较有显著性差异(P<0.05)。出生后2个月在仔鼠的肝、脾及胸腺组织中均检测到人CD3、CD20及CD34~+阳性细胞,卵黄囊组的表达量明显高于腹腔组(P<0.001)。结论:大鼠胚胎的卵黄囊途径是人脐血造血干细胞进行宫内移植的一条较好途径。     

胸腺肽类药物对体外诱导ES细胞分化为T细胞的作用

 【目的】研究目前临床常用的增强细胞免疫功能的胸腺肽，胸腺5肽和胸腺素α-1在小鼠胚胎干细胞向T淋巴细胞分化过程中的作用。【方法】借助小鼠胚胎干细胞（ESC）体外自然分化形成的类胚体（EB）中含有三胚层细胞的独特细胞环境，加入多种细胞因子和胸腺多肽，体外诱导小鼠ESC向T淋巴细胞分化。利用流式细胞仪检测在三种不同胸腺多肽的诱导下．不同时间点的小鼠ESC来源的细胞表面CD3分子的表达水平。并在相应时间点通过RT—PCR检测与T淋巴细胞发育密切相关的Notch信号分子的转录水平。【结果】在加入胸腺肽和胸腺素α1诱导的实验组，均有细胞表达CD3分子，CD3^＋细胞的百分比随诱导时间的增加而增多；而加入胸腺五肽的实验组无CD3^＋细胞出现。加入胸腺素α1和胸腺肽的实验组．有Notchl及其配体delta-like-1和delta—like-4的转录；而加入胸腺五肽的实验组的细胞无Notch1及其配体转录。【结论】胸腺素α1或胸腺肽可能通过影响Notchl信号途径支持ES细胞向T细胞分化，而胸腺五肽无此作用。     

体外定向诱导人骨髓间质干细胞分化为成骨细胞的研究

目的:建立体外定向诱导成人骨髓间质干细胞(MSC)分化为成骨细胞的模型。方法:采用Ficoll-Paque淋巴细胞分离液分离成人MSC,体外扩增,流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达,应用地塞米松、β-甘油磷酸钠、vitaminC定向诱导MSC分化为成骨细胞,检测碱性磷酸酶(AP)活性、钙沉积、骨桥蛋白的表达鉴定成骨细胞,比较P3和P10代MSC成骨分化的能力。结果:MSC在体外扩增原代可获得(5-6)×10⁵个细胞,10代可获得2×10¹⁰个细胞。流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD59、CD105、CD166表达阳性,CD11a、CD14、CD33、CD34、CD45、CD38、CD80、CD86、CD117表达为阴性。加入成骨诱导剂,细胞形态发生变化,AP活性增强,骨桥蛋白表达阳性,钙沉积逐渐出现。P3和P10代的MSC均有良好的分化为成骨细胞的能力。结论:成人骨髓间质干细胞在体外可分化为成骨细胞。     

NF-к B/Rel转录因子与白血病

NF-кB/Rel蛋白家族是一类参与炎症、免疫、应激、细胞生长及癌症发生等诸多生物学过程中基因调节的重要转录因子。已经发现许多癌症的发生与之相关。本文综述了NF-к B/Rel蛋白在白血病发生及治疗方面的研究进展。NF-кB是正常髓系骨髓细胞转化的调节因子。人类T细胞性白血病病毒Ⅰ型编码的Tax蛋白能通过激活NF-кB而参与人类成人T细胞白血病的发生。一些染色体易位可能影响NF-кB/IкB之间的平衡,从而参与白血病及淋巴瘤的发生。一系列与NF-кB/Rel转录因子相关的白血病化疗药物正在探索之中。     

HLA-DRA基因逆转录病毒载体重组质粒的构建和包装

用逆转录病毒载体将ＨＬＡ－ＤＲＡ基因转当供体组织,使供受体之间ＨＬＡ－ＤＲ抗原表型趋于一致形成嵌合体,可能诱导免疫耐受,从而减缓受者免疫活性细胞对移植物的识别和攻击,延长移植物存活时间。     

骨髓移植后粒系祖细胞异常的研究

骨髓移植受者在输注骨髓前,均需接受大剂量免疫抑制剂和射线,结果导致自身骨髓干细胞受到严重破坏。经同种或自身骨髓输注后,通常在1～2个月内,外周血细胞数及骨髓细胞数均可恢复正常水平,但这些受者较长时间内,对细胞毒药物特别敏感。为弄清骨髓移植后受者的干细胞是否能完式恢复,我们研究了29例骨髓移植受者的粒系祖细胞(CFU-GM)的改变。29例骨髓移植受者均来自UCLA骨髓移植中心,包括白血病、再生障碍性贫     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓基质细胞的粘附行为

目的和方法:用MTT方法检测了急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿骨髓基质细胞(BMSC)对正常骨髓造血细胞和淋巴瘤Raji细胞的粘附行为,用流式细胞仪检测了BMSC表面的粘附分子ICAM-1和VCAM-1的表达。结果:急性期组ALLBMSC对骨髓造血细胞的粘附能力明显下降。长期缓解组ALLBMSC对肿瘤细胞的粘附能力明显增高。急性期组ALLBMSC表面ICAM-1表达明显降低。结论:ALL患儿BMSC对骨髓造血细胞和肿瘤细胞的粘附行为的异常,BMSC粘附行为的变化与细胞表面粘附分子的表达异常有关。