"穿刺抽取髓核"诱导腰椎间盘退变的时间相关性评估

目的对穿刺纤维环抽取髓核诱导的腰椎间盘退变模型，进行时间相关的放射学和组织学评估，明确椎间盘退变程度的时间相关性。方法1岁山羊12只，以粗针穿刺纤维环抽取髓核（L1，2-15，6）建立腰椎间盘退变模型。术后第2、4、8、16周分别行放射学观察、髓核蛋白多糖（GAG）定量、组织学及微观结构评估。结果影像学示术后16周椎间隙高度显著降低（P〈0．01），但各椎间盘间差异无统计学意义（P〉0．05）。GAG定量示所有节段髓核内GAG含量随时间持续下降（P〈0．01），但与椎间盘序列间无相关性。大体标本及组织学观察显示，椎间盘退变组织学表现与抽取髓核后时间显著相关：术后2周组织学未见明显异常；4周始出现退变表现；16周时髓核已近完全纤维化。电镜观察示术后2—16周，髓核细胞从基本正常至大量凋亡，髓核基质逐渐纤维化。结论针刺抽取髓核法是较理想的腰椎间盘退变模型诱导方法。本研究观察16周，椎间盘退变未见缓解及自行修复，诱发的退变严重度与术后时间因素显著相关，而与椎间盘节段序列间无相关性。该模型在术后2周尚未出现明显组织学改变，或许是进行干预的良好时机。     

琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测肠道菌群基因扩增产物的方法学比较研究

琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis, AGE))和聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法.琼脂糖凝胶电泳的有效分离范围是0.1～2kb,聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5～500 bp)效果最好,分辨力极高,测序的聚丙烯酰胺凝胶可分离相差lbp的DNA片段.     

Survivin shRNA干扰对食管癌细胞CDK4 mRNA表达的影响

目的： 以shRNA抑制食管癌ECA109细胞内Survivin的表达,探讨Survivin shRNA干扰对CDK4基因表达的影响。方法：ECA109细胞分为Survivin shRNA干扰组、质粒对照组和空白细胞组,采用RNA干扰技术沉默ECA109细胞株中Survivin基因的表达,RT-PCR检测各组细胞中Survivin和CDK4 mRNA的表达,Western blot方法检测各组细胞Survivin蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期的改变。结果：与质粒对照组及空白细胞组比较,Survivin shRNA干扰组细胞Survivin mRNA及蛋白表达下调,CDK4 mRNA表达明显降低,差异均具有统计学意义(P均<0.05);Survivin shRNA干扰组G2期延长,G2期细胞比例增加,细胞G2期增殖阻滞。结论：Survivin基因可能在转录水平对CDK4具有调控作用,其具体调控机制有待进一步研究。     

食管癌早期预警指标的研究进展

肿瘤的早期发现、早期诊断、早期治疗,被认为是肿瘤防治的关键方法,目前由于现代分子生物学及细胞遗传学的高度发展,人们对恶性肿瘤的认识已从组织细胞水平到分子水平,认识到肿瘤的发生、发展是多种基因、多种细胞因子相互作用的结果。肿瘤标志物（tumourmarkers,TM）是癌细胞发生过程中,产生的一种或几种正常所没有的含量很低的“特异性物质”,或者是宿主细胞对癌细胞入侵反应所产生的正常细胞成份,但在量和质上与正常或良性疾病时相比差异有显著性。     

TIMP-1在哈萨克族食管癌组织中的表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）在哈萨克族食管癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用RT—PCR检测48例哈萨克族食管癌切除标本与远端正常组织中TIMP-1mRNA表达水平,并分析其与临床病理特征的关系;采用Western blot对20例标本中TIMP-1蛋白表达进行检测。结果癌组织中TIMP-1mRNA表达远高于其远端正常组织（P〈0．05）;在临床早期病例中TIMP-1基因在癌组织及远癌正常组织中的差异亦具有统计学意义（P〈0．05）,蛋白表达与基因转录表达水平基本一致。TIMP-1mRNA表达在癌组织浸润深度、分化程度及有无淋巴结转移间差异无统计学意义。结论TIMP-1可能参与了哈萨克族食管癌发生的早期过程。     

新疆地区汉族遗传非综合征型耳聋人群GJB3基因突变分析

目的:探讨新疆汉族地区缝隙连接蛋白编码基因31(GJB3)突变在中国遗传非综合征型耳聋人群中的特征.方法:应用聚合酶链反应产物商接测序方法对新疆地区对非综合征型遗传性聋患者50名、对照组55名进行GJB3基因编码区突变检测及鉴定编码区突变检测及鉴定.结果:在50名患者中发现GJB3基因的2种单核苷酸改变,其中有1种碱基变化导致了氨基酸的改变,其中一个突变(357C→T)与夏家辉等报道相同;另一个突变形式(766G→A)为本研究首次发现.55名正常对照组中未发现同样突变.结论:国人非综合征型遗传性聋者GJB3基因突变筛查研究发现了一个GJB3基因新的突变形式(766G→A),为进一步开展耳聋相关基因的筛查研究打下了基础.