CD3AK介导的MHC非限制性杀瘤作用途径的研究

本实验探讨了小鼠ＣＤ３ＡＫ介导的ＭＨＣ非限制性杀瘤作用途径。ＣＤ３ＡＫ可在体外杀伤小鼠肝癌细胞ＨＣａ－Ｆ和成纤维瘤细胞Ｌ９２９，但其培养上清无杀瘤活性，多聚甲醛固定能明显降低ＣＤ３ＡＫ对Ｈｃａ－Ｆ的杀瘤活性，但对Ｌ９２９的杀瘤活性影响不大，结果表明ＣＤ３ＡＫ的杀瘤机制主要是直接杀伤，膜ＴＮＦ参与ＴＮＦ敏感肿瘤细胞的杀伤。     

肠道上皮内T淋巴细胞亚群的检测及意义

肠腔上皮不断与摄入性抗原及肠道内菌群接触，作为体内重要的免疫防御系统的肠上皮内淋巴细胞（intestine intraepithelial lymphocytes，ilELs）含有大量T淋巴细胞，包括TCRαβ和TCRγδT细胞，CD4^＋和CD8^＋细胞。已有研究认为这些T淋巴细胞的来源除经胸腺选择的之外，尚有发生于肠道隐窝而未经胸腺内发育T细胞。     

肝细胞癌患者免疫功能的研究

目的探讨肝细胞癌免疫功能的临床意义。方法对54例HCC患者、64例慢性乙型肝炎患者和23位正常献血员采用双抗体夹心法,一抗为生物素标记的抗IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12P70抗体,根据样本的OD值及曲线的斜率计算出细胞因子的含量。采用免疫组织化学方法检测外周血CD3＋、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞的百分率。银染法检测T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白,流式细胞仪测定肝细胞癌患者外周血黏附单个核细胞CD83及HLA-DR表达。结果 HCC患者血清IFN-γ含量为（4.92±2.15）pg/mL,低于健康献血员（19.16±2.34）pg/mL和慢性乙型肝炎患者（11.42±6.86）pg/mL（P〈0.05）。HCC患者IL-2、IL-12P70含量降低,而TNF-α、TGF-β1、IL-4、IL-10含量增高。根据肝癌体积大小对患者分组比较血清IFN-γ水平,随着肿瘤体增大,血清IFN-γ水平下降,调节IFN-γ分泌的IL-12P70水平与IFN-γ的变化趋势一致,但HCC患者血液中都存在IFN-γ。根据甲胎蛋白的水平将未经治疗的HCC患者分成2组,结果提示甲胎蛋白含量高时血清IFN-γ水平下降,调节IFN-γ分泌的IL-12P70水平与IFN-γ的变化趋势一致。与慢性乙型肝炎患者和健康献血员相比,HCC患者CD4＋T淋巴细胞、CD4＋/CD8＋比值降低,反映T淋巴细胞增殖活性的AgNORs降低。黏附细胞悬液CD83和HLA-DR表达降低。结论 HCC患者的免疫功能低下,与肿瘤细胞的免疫逃逸有关。     

过氧化物酶体增殖物活化受体γ激动剂罗格列酮对慢支大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的研究过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的外源性强力配体激动剂罗格列酮(RGD)对慢支大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法采用熏烟加气管内滴注内毒素法建立慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,用酶联免疫吸附实验、实时定量PCR等方法分别测定其MMP-9基因及蛋白水平表达的改变。同时为了进一步探讨罗格列酮在肺部微环境下对基质金属蛋白酶9活性的影响,通过支气管肺泡灌洗法得到了正常及慢支大鼠的肺泡巨噬细胞,使之与罗格列酮共同培养,观察其对肺泡巨噬细胞MMP-9表达的影响。结果用熏烟加气管内滴内毒素法建立的大鼠COPD模型,其病理形态学改变与人类COPD的改变相似。罗格列酮可以抑制烟雾和内毒素刺激所致大鼠肺组织MMP-9 mRNA及蛋白表达的增加。结论罗格列酮对COPD的防治作用可能是由于抑制了MMP-9mRNA表达进而抑制了MMP-9蛋白表达所致。     

β－榄香烯抗肿瘤作用的实验研究 Ⅱ．β－榄香烯对Ca761－86乳腺癌的作用

本实验以小鼠乳腺癌Ｃａ７６１－８６细胞系为模型研究了β－榄香烯的抗肿瘤作用。β－榄香烯能直接引起肿瘤细胞变性坏死，作用强度大于莪术油及Ｔｗｅｅｎ８０。瘤内多点注射β－榄香烯对Ｃａ７６１－８６的生长有抑制作用。结果表明β－榄香烯是莪术油中所含的抗癌有效成分之一。     

榄香烯复合瘤苗主动免疫的抗肿瘤效应

目的:用重组的蓖麻毒素A链与抗CD5的单克隆抗体DS27交联为免疫毒素rTRA:DS27,与完整蓖麻毒素制备的ricin:DS27进行对比研究.方法:分析它们对靶细胞的特异性杀伤,对骨髓造血细胞增殖的影响,内化情况,以及NH_4cl对rRTA:DS27毒性的增强作用.结果:rRTA:DS27具有更好的导向特异性,对骨髓造血功能影响较小,NH_4cl能明显增强rRTA:DS27的毒性.结论:rTRA:DS27免疫毒素具有更多的优点.     

HTA-HSP70BCG对小鼠骨髓树突状细胞的冲击作用

目的 :用榄香烯复合瘤苗抗原 卡介苗热休克蛋白复合物 (HTA HSP70 BCG)冲击正常小鼠骨髓树突状细胞 ,检测其抗原递呈功能。方法 :用HTA HSP70 BCG刺激 ,并与GM CSM和IL 4联合培养的骨髓树突状细胞 ,用MTT法测增殖活性 ,用透射电镜检查形态学改变 ,用流式细胞仪检测FITC labeleddextran的摄取。结果 :与单用HTA或HSP70 BCG刺激的树突状细胞相比 ,HTA HSP70 BCG刺激的树突状细胞增殖指数明显增大 (2 10 7± 0 0 13) ,对脾不粘附细胞的激活作用明显增强 (增殖指数为 1 92 7±0 0 73) ,FITC labeleddextran摄取率明显增高 (达 5 8 6 1% ) ,形态上更趋于成熟。结论 :HTA HSP70 BCG 对树突状细胞具有较强的冲激作用 ,增强其抗原递呈功能。     

榄香烯增强瘤苗免疫原性的研究

目的 在基因水平上通过与热休克处理对比探讨榄香烯增强肿瘤细胞免疫原性的分子机制。方法 人肝癌细胞HepG2经50μg/ml榄香烯或42℃热休克处理后，与未经处理的对照组一起，分别提取总RNA、逆转录成cDNA、体外转录制备生物素标记的cRNA，应用含有12550条人类基因的表达谱芯片，与热休克对比分析经榄香烯处理的人肝癌细胞HepG2基因表达谱的改变。结果 榄香烯能使HepG2细胞的24条基因表达明显改变，在这24条基因中有14条基因在热休克处理时未发生表达变化。结论 榄香烯有可能在基因水平上改变肿瘤细胞的免疫原性，并可能诱生与热休克不同的免疫原性物质。     

榄香烯复合瘤苗对Hca-F肝癌小鼠的免疫治疗效应及对IL-10与IL-12分泌的影响

目的探讨榄香烯复合瘤苗（EC-TCV）对小鼠肝癌Hca-F的免疫治疗效应及治疗小鼠脾细胞IL-10与IL-12分泌的变化。方法带Hca-F小鼠分别用EC-TCV,CY,EC-TCV+CY治疗或不治疗（PBS对照）,观察比较肿瘤生长情况并用ELISA法测脾细胞与Hca-F细胞混合培养上清中的IL-10与IL-12。结果EC-TCV免疫治疗或CY化疗后,肿瘤潜伏期延长,瘤重减轻,用EC-TCV+CY进行化免治疗的小鼠在第15天活杀时均无瘤生长,与Hca-F细胞混合培养的EC-TCV治疗小鼠脾细胞培养上清中IL-10浓度明显降低（1.82±0.29pg/ml,P<0.05）,IL-12浓度明显升高(7.13±1.89pg/ml,P<0.05)。结论EC-TCV对Hca-F有免疫治疗效应,可与CY并用而加强,而EC-TCV主动免疫促进脾细胞IL-12分泌、抑制IL-10分泌可能是其抗瘤作用的机制之一。