GDNF在帕金森病小鼠的表达及丙戊酸盐对其影响的研究

目的 观察帕金森病小鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)含量的变化及丙戊酸盐(valproate,VPA)对GDNF表达的影响.方法 采用C57BL小鼠MPTP法建立帕金森病模型,通过原位杂交方法观察GDNF表达,对检测部位恒定视野内GDNF阳性细胞进行灰度扫描.结果 与盐水对照组相比,模型组、模型给药组和单独给药组小鼠纹状体、海马、皮质GDNF表达均增强(P<0.05).结论 帕金森病小鼠神经元内GDNF含量增多,可能有利于受损神经元的修复;丙戊酸盐可能通过促进GDNF的表达而保护神经元.     

蝎毒耐热蛋白对外源性Aβ1-40神经突触毒性的抑制作用

目的探讨蝎毒耐热蛋白(SVHRP)对Aβ1-40神经突触毒性的影响。方法应用Aβ1-40进行大鼠海马内定位注射后,腹腔给予SVHRP进行干预。10d后,采用水迷宫实验和免疫组织化学方法分别检测大鼠的学习记忆能力和海马内突触密度的变化。结果SVHRP干预组大鼠的水迷宫逃避潜伏期缩短、目标象限游泳时间和距离增加;SVHRP干预组大鼠的P38免疫反应产物明显强于Aβ组,接近对照组水平。结论腹腔注射SVHRP可抑制外源性Aβ1-40引起的大鼠海马内突触密度的下降,可阻止Aβ1-40对大鼠学习记忆能力的损害。     

蝎毒抗帕金森病小鼠多巴胺能神经元凋亡

研究蝎毒对帕金森病 (PD)小鼠脑内多巴胺能神经元的抗凋亡作用及其机制。用C5 7BL/ 6 品系小鼠 ,每日于颈部皮下注入 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP ,2 0mg/kg)复制帕金森病模型 ,随机分为模型组及蝎毒 (SV)提取液高 (2 0 0mg/kg)、低剂量 (2 0mg/kg)治疗组 ;另设对照组 (NS)和空白给SV高、低剂量组。各组均为 8只。采用爬杆、游泳行为学检测小鼠的运动功能障碍 ;应用DNA断裂点标记法 (TUNEL)检测黑质致密部 (SNc)多巴胺 (DA)能神经元的凋亡 ;利用免疫细胞化学法检测Bcl 2 /Bax基因的表达。结果表明 :SV能改善PD小鼠运动功能障碍 ;模型组SNc部可见大量TUNEL阳性细胞 (P <0 0 1) ,治疗组TUNEL阳性细胞数均明显减少 (P <0 0 1) ;模型组SNcBcl 2免疫反应活性 (IR)阳性神经元数明显减少 (P <0 0 1) ,Bax IR阳性神经元数明显增多 (P <0 0 1) ,治疗药组未见Bcl 2 IR阳性神经元数明显减少或Bax IR阳性神经元数明显增多。提示 :SV可能通过上调Bcl 2、下调Bax基因表达抑制DA能神经元凋亡。     

MPTP对小鼠空间学习记忆和脑内强啡肽免疫反应的影响

为了观察1 -甲基- 4 -苯基- 1, 2, 3, 6 四氢吡啶(MPTP)对C57BL/6小鼠空间学习记忆能力和脑内强啡肽(DYN)表达强度的影响,本研究给予小鼠皮下注射MPTP20mg/kg,连续8d,制备Parkinson病(PD)模型。与对照组相比,MPTP处理小鼠爬竿(P<0. 01)和游泳(P<0. 01)分数明显降低。Morris水迷宫实验结果显示:MPTP处理小鼠寻找平台潜伏期明显延长(P<0.01),在目标及对侧象限游泳时间所占百分比分别明显降低(P<0. 01)和增加(P<0. 01)。免疫细胞化学结果表明中脑黑质致密部的酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性神经元数目明显减少(P<0. 01)。同时在前额叶皮层(P<0. 01 )、背侧海马的CA1区(P<0. 05)和齿状回苔状纤维通路(P<0. 05)、背侧尾核(P<0. 01)的DYN免疫反应活性明显增强。本实验结果表明:用MPTP处理诱发的PD小鼠模型伴有空间学习和记忆能力的下降;并提示前额叶皮层、背侧海马的CA1区、齿状回苔状纤维通路和背侧尾核内DYN表达的增多可能与MPTP小鼠空间学习和记忆能力下降有关。     

海人酸诱导癫痫大鼠齿状回神经肽Y能苔状纤维侧枝发芽

目的：探讨海马苔状纤维侧枝发芽与癫痫发作敏感性形成的关系。材料与方法：在海人酸诱发大鼠出现癫痫发作后,采用免疫组织化学染色法观察大鼠海马齿状回内神经肽Ｙ能纤维的异常发芽。结果：首次证实在癫痫发作后７天时,在海马齿状回内分子层就已出现神经肽Ｙ能纤维的异常增生。结论：这可能是对癫痫发作后齿状回门区神经肽Ｙ能神经元缺失的一种代偿性变化。     

蝎毒耐热蛋白对大鼠海马内前脑啡肽原表达的影响

癫痫是常见的神经系统变性疾病,其在临床上顽固难治的原因是癫痫敏感性的形成.国内外文献报道[1～4]阿片肽可能是癫痫敏感性形成的机制之一.脑啡肽(enkephalin,ENK)是脑内含量最高的阿片肽,广泛存在于所有的脑区.蝎毒是传统的抗癫痫药物,蝎毒耐热蛋白是通过特殊工艺从蝎毒中提取的抗癫痫组分,本工作旨在探讨蝎毒耐热蛋白对抗癫痫敏感性形成的作用及其可能的阿片肽机制.     

环加氧酶-2对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的影响

目的　观察COX 2对帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的影响。方法　选用C5 7BL种系环加氧酶 2 (Cyclooxygenase 2 ,COX 2 )缺陷小鼠 ,腹腔注射 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)制备帕金森病小鼠模型 ,用免疫组织化学方法。结果　行为学及免疫组织化学观察显示 ,野生型帕金森病小鼠的死亡率明显高于COX 2缺陷杂合子帕金森病小鼠 (P <0 0 1) ;野生型帕金森病小鼠黑质致密部酪氨酸羟化酶 (Ty rosineHydroxylase ,TH)免疫反应阳性神经元数目较杂合子帕金森病小鼠明显减少 (P <0 0 1)。结论　COX 2很可能与帕金森病时黑质多巴胺能神经元的损伤有关     

饮酒后血液中酒精含量模型的建立与初步验证

针对酒后驾车普遍存在并致交通肇事居高不下的现实,掌握饮酒后不同时刻血液中酒精的浓度非常必要.本文根据药物动力学知识,运用微积分理论,建立微分方程并推导出长时间、瞬时间和分段瞬时饮酒的数学模型,检验结果表明模型正确,理论数据与实际相吻合.从数学理论上解决了不同体重、不同时间饮用不同量的酒后在不同时刻血液中的酒精含量.     

红藻氨酸处理C57BL／6J小鼠癫痫发作后再次阈下注射形成敏感性的特性

目的：探讨红藻氨酸处理的C57BL／6J小鼠癫痫发作后癫痫发作敏感性能否形成及其机制。 方法：实验于2004-03／06在大连医科大学生理学教研室进行。选用C57BL6J小鼠36只，实验分为盐水对照组（n=8）和红藻氨酸处理组（n=24）。红藻氨酸处理组根据不同时间点又分为红藻氨酸处理后0．5h，2h,24h组。每组8只。盐水对照组为C57BL/6J小鼠颈部皮下注射0．2mL盐水，红藻氨酸处理组为C57BL/6J小鼠颈部皮下注射0．2mL惊厥剂量红藻氨酸（25mg／kg）诱导癫痫发作，分别在红藻氨酸处理后0．5，2,24h，用免疫组化技术检测海马内c-Jun免疫阳性神经元，作为神经元兴奋的形态功能指标来观察癫痫发作相关脑区的兴奋传递通路，同时检测海马门区γ-氨基丁酸免疫反应活性阳性神经元数目。红藻氨酸处理后7d。存活的C57BL／6J小鼠被给予皮下注射12．5mg／kg阈下剂量的红藻氨酸，以检测癫痫发作敏感性。 结果：实验纳入36只C57BL／6J小鼠，中途有4只脱落，最终有32只进入结果分析。①惊厥剂量红藻氨酸诱发C57BL／6J小鼠（n=24）在30min内出现癫痫持续状态，并伴有全身强直阵挛性惊厥。其中4只在30min内死亡。②d后阈下种量未引起癫痫发作，即癫痫发作敏感性未形成。③脑内免疫组化显示，海马各部位γ-氨基丁酸免疫反应阳性神经元在检测各时间点内均未见任何脱失现象；与盐水对照组比较，红藻氨酸组诱发急性癫痫发作，红藻氨酸处理后，在海马齿状回颗粒细胞c-Jun免疫反应最早增强（P〈0．05），CA3部位不增强，以CA1部位c-Jun免疫反应在24h显著性升高（P〈0．001）。④与盐水对照组相比，惊厥剂量的红藻氨酸处理后0．5h，2h，24h，海马门区γ-氨基丁酸免疫阳性神经元的数目及染色程度未见明显改变（P〉0．05）。 结论：C57BL／6J小鼠具有对红藻氨酸引起癫痫急性发作的敏感，可能与CA1接受内嗅皮层海马穿通通路的直接投射有关，同时C57BL/6J小鼠海马对红藻氨酸引起的γ-氨基丁酸能神经元损伤不敏感，海马门区γ-氨基丁酸免疫反应阳性神经元的结构功能完整性可能在防止癫痫敏感性形成方面起着关键的作用。     

人参皂苷Re对MPTP致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的研究人参皂苷Re对 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (1 methy 4 phenyl 1,2 ,3,6 te trahydropyridine ,MPTP)诱致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。方法通过给C5 7BL小鼠皮下注射MPTP制备帕金森病 (parkinson’sdisease ,PD)模型 ,灌胃给予人参皂苷Re预处理后 ,运用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)、免疫组织化学染色以及图像分析等技术分别对纹状体前脑啡肽原 (preproenkephalin ,PPE)mRNA、前强啡肽原 (preprodynorphin ,PPD)mRNA的表达水平和黑质酪氨酸羟化酶 (TH)、γ 氨基丁酸 (GABA)免疫反应阳性神经元数目等多项指标进行考察。结果Re能使黑质致密部 (SNc)的TH阳性神经元和黑质网状部 (SNr)的GABA阳性神经元数目显著增多 ;Re高剂量预防组 (2 6mg·kg-1)PPD扩增产物较模型组显著增加 (P <0 0 5 ) ;Re预防组的PPE扩增产物与模型组比没有显著差异。结论人参皂苷Re对MPTP诱致帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元具有明显的保护作用 ,其作用可能与改变GABA能神经元以及PPDmRNA表达水平 ,从而调节PD中直接回路和间接回路的兴奋 抑制平衡有关