5-氮杂胞苷对变应性鼻炎大鼠DNA甲基转移酶1基因调节作用的机制研究

目的 探究甲基化酶抑制药5-氮杂胞苷(5-aza)对DNA甲基转移酶1(DNMT1)的调控作用。方法 将大鼠分为正常组、模型组和实验组。正常组大鼠不做干预;模型组大鼠通过腹腔注射卵清蛋白(OVA)和Al(OH)₃及OVA局部致敏方法建立变应性鼻炎(AR)模型;实验组大鼠建模后用5 mg·kg^-1 5-aza进行干预处理。用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)表达水平;用实时荧光定量聚合酶链反应法检测大鼠DNMT1 mRNA表达情况;用蛋白质印迹法检测大鼠DNMT1蛋白表达情况。结果 正常组、模型组和实验组大鼠血清IgE表达水平分别为0.066±0.002、0.074±0.002和0.073±0.003;DNMT1 mRNA的表达水平分别为1.00±0.07、3.92±0.82和0.55±0.16;DNMT1蛋白表达水平分别为0.77±0.13、1.16±0.22和0.40±0.10。模型组的上述指标与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。...     

siRNA-Gli-1联合BCNU影响胶质瘤细胞U251增殖和凋亡

 目的:　体外实验中,Gli-1基因的RNA干扰片段(siRNA-Gli-1) 联合化疗药物卡莫司汀（BCNU）抑制Hedgehog(Hh)信号通路,观察其对人脑胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响,并探讨产生这种作用的机制。方法:　U251细胞按处理方式不同分为5组: BCNU组（BCNU）、SiRNA-Gli-1组（SiRNA-Gli-1）、联合组（siRNA-Gli-1 + BCNU）、空转组（转染试剂）和空白组（细胞培养液RPMI1640）。U251细胞转染siRNA-Gli-1, RT-PCR和Western blotting检测Gli-1表达状态以及siRNA-Gli-1联合BCNU对Hh通路下游因子Bcl-2、CyclinD1和Bax表达的影响;MTT法检测细胞生长抑制率、流式细胞仪检测细胞周期、Annexin V法检测细胞凋亡,观察siRNA-Gli-1联合BCNU对U251细胞增殖能力的改变。结果:　siRNA-Gli-1组和联合组中Gli-1表达较其他三组下降明显;与空白组和空转组相比, BCNU组、siRNA-Gli-1组和联合组细胞凋亡率增加, 细胞周期阻滞在G0 /G1 期, S期减少;Bcl-2、CyclinD1表达显著下降,Bax蛋白表达增加或无变化,联合组表现最明显,P均< 0. 05。结论: siRNA-Gli-1联合BCNU可明显抑制胶质瘤U251细胞的增殖,该作用与抑制Hh信号通路中Gli-1及下游因子Bcl- 2、CyclinD1和Bax表达有关,通过阻滞细胞周期、增强Bax和抑制Bcl-2表达的机制来实现。     

高血脂症患者超敏C-反应蛋白和总抗氧化活性测定及临床意义

目的探讨高血脂症患者血管损伤情况的评价指标。方法采用终点法在全自动生化分析仪上检测三酰甘油(TG)及总胆固醇(TC)含量,采用透射免疫比浊法和二点法分别测定50例各型高血脂症患者中超敏C-反应蛋白(HSCRP)含量和总抗氧化活性(TAS),并与正常对照组比较。结果单纯高TG血症组与正常对照组的HSCRP和TAS值无显著性差异(P均>0.05),单纯高TC血症和高TG、TC血症的HSCRP值显著高于正常对照组(P均<0.05),单纯高TC血症和高TG、TC血症的TAS显著低于正常对照组(P均<0.05)。结论单纯高TG血症组与正常对照组血管损伤程度无差别,高TC血症患者HSCRP的增高,TAS降低,常说明发生血管损伤,HSCRP和TAS对高血脂症患者血管损伤的发展趋势具有良好的辅助诊断作用。     

辛芷鼻敏胶囊对变应性鼻炎大鼠的药效学实验研究

目的:探讨辛芷鼻敏胶囊治疗变应性鼻炎的药效。方法:用卵蛋白加福氏佐剂乳剂主动致敏,制作大鼠变应性鼻炎模型,观察辛芷鼻敏胶囊灌胃给药对模型大鼠的影响;用大鼠炎症模型,小鼠疼痛模型,观察其镇痛抗炎作用。结果:辛芷鼻敏胶囊对大鼠过敏性鼻炎模型具有一定的抑制作用,减轻其鼻黏膜病理组织学的改变,提高其免疫功能;可抑制大鼠棉球肉芽肿和小鼠二甲苯性耳肿胀;抑制热刺激和化学刺激致小鼠的疼痛反应。结论:辛芷鼻敏胶囊缓解大鼠过敏性鼻炎鼻部症状,并具有一定的抗炎和镇痛作用。     

辛芷鼻敏胶囊对大鼠变应性鼻炎脾脏组织核转录因子-κB和白介素-5表达的影响及相关性

目的探讨辛芷鼻敏胶囊对实验性大鼠变应性鼻炎(A llergic rh in itis,AR)脾脏组织核转录因子-κB(Nuc lear factorkappa B,NFκ-B)和白介素-5(Interleuk in-5,IL-5)表达及相互关系的作用,明确药效机理。方法通过造模的大鼠灌服辛芷鼻敏胶囊及与同类药物对照,用免疫组化Evision方法半定量检测脾脏组织NFκ-B(亚单位P65)的活性细胞表达及双抗体夹心酶联免疫吸附技术(Enzym e labeled immunosorbent assay,ELISA)定量测定IL-5的表达。结果实验药物组的NF-κBP65的阳性细胞比例和IL-5含量明显低于模型组及阳性对照组(P<0.05);且NFκ-BP65的活性细胞比例与IL-5的表达呈正相关(r=0.935 5、P<0.05)。结论辛芷鼻敏胶囊可能通过降低核转录因子-κB活性,抑制大鼠AR发病过程中IL-5的表达,进而减少嗜酸粒细胞(Eosinoph il,EOS)的浸润而控制症状。     

BACT/ALE3RDT在结核病快速检测中的运用

结核菌的分离培养目前仍为结核病细菌学检验的重要方法。用BACT／ALERT3D（法国生物梅里埃培养仪）与传统L—J（罗杰氏培养基）进行培养时间和阳性率比较。临床上一些不规则用药，影响结核分枝杆菌（MTC）的生长活力，MTC产生变异，生长状况发生改变，出现所谓可见不可育的现象，药物的影响及机体免疫因子诱导作用，结果是部分不能在改良罗氏培养基和米氏液体培养基上生长或生长不良。     

survivin基因A9194G位点多态性在新疆维吾尔族、哈萨克族、汉族食管癌中的分布及其意义

目的探讨survivin基因A9194G位点在新疆维吾尔族（维族）,哈萨克族（哈族）及汉族食管癌人群中的分布及与正常人群的分布差异。方法采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态技术（PCR—RFLP）及测序方法检测survivin基因A9194G位点在维、哈、汉3个民族食管癌患者肿瘤组织和正常组织（每个民族各30例）的分布情况。结果3个民族食管癌肿瘤组织中A、G基因频率分布和基因频率分布差异无统计学意义。基因型（AA、AG、GG）在3个民族肿瘤组织和正常组织的分布无统计学差异;与正常人群比较,哈萨克族食管癌肿瘤患者A9194G位点存在A—G的突变,差异具有统计学意义。结论survivin基因A9194G位点多态性在哈萨克族食管癌患者和哈萨克族正常人群中存在差异,提示该位点的变异可能与哈萨克族食管癌中survivin的异常表达相关。     

支气管哮喘患者与健康对照转录因子T-bet、GATA-3表达的比较

目的比较哮喘患者及健康对照外周血CD4~+T细胞转录因子T-bet、GATA-3表达水平。方法选取新疆医科大学第六附属医院门诊及住院哮喘患者100例;同期健康志愿者100例;获取的外周血标本中的CD4+T淋巴细胞,是采用免疫磁珠法分离提取获得;而T-bet、GATA-3转录因子m RNA表达水平,其检测用SYBR Green I实时荧光定量法。结果 T-bet基因m RNA表达含量在哮喘组中为(6.90±2.25),对照组中为(6.74±2.16)。与对照组相比,哮喘组表达含量较高,但差异无统计学意义(P0.05)。GATA-3基因m RNA在哮喘中相对表达量为(4.22±2.03),健康对照组中相对表达量(3.15±2.22)。与对照组相比,哮喘组GATA-3m RNA明显较高,两组差异具有统计学意义(P0.05)。结论支气管哮喘组Th2细胞转录因子GATA-3m RNA高表达,转录因子T-bet/GATA-3 m RNA的平衡破坏,进一步影响支气管哮喘的发生发展。     

新疆维、汉人群变应性鼻炎患者与正常人表观遗传现象IFN-γ基因甲基化比较研究

目的探讨IFN-γ基因甲基化在新疆维、汉人群变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者与正常人群中的表达。方法通过对新疆伊犁地区变应性鼻炎的流行病学调查,随机整群抽样调查符合条件的AR患者和正常人并采集外周静脉血,提取基因组DNA;亚硫酸氢盐修饰试剂盒S7820修饰DNA;甲基化特异性PCR(methylation Specific PCR,MS-PCR)法对DNA甲基化进行定性分析。结果汉族AR患者IFN-γ基因甲基化阳性率(8.5%)与正常对照组(1.7%)相比差异无统计学意义(χ2=3.229,P>0.05),维吾尔族AR患者IFN-γ基因甲基化阳性率(18.6%)与对照组(16.9%)相比差异无统计学意义(χ2=0.058,P>0.05),维吾尔族AR患者(18.6%)与汉族AR患者(8.5%)的IFN-γ基因甲基化阳性率差异无统计学意义(χ2=2.617,P>0.05),维吾尔族正常对照组(16.9%)比汉族正常对照组(1.7%)IFN-γ基因甲基化阳性率高,差异有统计学意义(χ2=8.659,P<0.05)。结论汉族正常人群IFN-γ基因低甲基化状态可能在汉族变应性鼻炎的发病过程中发挥着更为重要的作用。     

Survivin shRNA干扰对食管癌细胞CDK4 mRNA表达的影响

目的： 以shRNA抑制食管癌ECA109细胞内Survivin的表达,探讨Survivin shRNA干扰对CDK4基因表达的影响。方法：ECA109细胞分为Survivin shRNA干扰组、质粒对照组和空白细胞组,采用RNA干扰技术沉默ECA109细胞株中Survivin基因的表达,RT-PCR检测各组细胞中Survivin和CDK4 mRNA的表达,Western blot方法检测各组细胞Survivin蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期的改变。结果：与质粒对照组及空白细胞组比较,Survivin shRNA干扰组细胞Survivin mRNA及蛋白表达下调,CDK4 mRNA表达明显降低,差异均具有统计学意义(P均<0.05);Survivin shRNA干扰组G2期延长,G2期细胞比例增加,细胞G2期增殖阻滞。结论：Survivin基因可能在转录水平对CDK4具有调控作用,其具体调控机制有待进一步研究。