HPLC波长转换法同时测定蒙药文冠木中5种成分的含量

目的 建立同时测定蒙药文冠木药材中儿茶素、表儿茶素、槲皮苷、槲皮素和杨梅素5种成分含量的方法,为文冠木药材及制剂的质量控制提供参考和依据。方法 采用HPLC波长转换法,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1;检测波长分别为0~8 min,280 nm（儿茶素,表儿茶素）、8~10 min,257 nm（槲皮苷）、10~12 min,375 nm（杨梅素）和12~18 min,256 nm（槲皮素）;柱温30℃;进样量为10 μL。结果 儿茶素、表儿茶素、槲皮苷、杨梅素及槲皮素分别在6.64~33.20 μg·mL^-1（r²=0.999 6）、49.04~245.20 μg·mL^-1（r²=0.999 7）、1.28~6.40 μg·mL^-1（r²=0.999 8）、14.4~72.0 μg·mL^-1（r²=0.999 2）、0.84~4.20 μg·mL^-1（r²=0.999 6）线性关系良好;仪器精密性、稳定性、重复性的RSD均<2.0%;平均加样回收率分别为98.15%（RSD=1.4%,n=6）,102.34%（RSD=1.4%,n=6）,91.90%（RSD=1.3%,n=6）,101.16%（RSD=1.9%,n=6）,94.97%（RSD=1.6%,n=6）。结论 该方法操作简单便捷,仪器精确度高,仪器精密度、稳定性、重复性好,可用于同时测定文冠木的质量控制。     

先天性食管闭锁／食管气管瘘合并食管狭窄的治疗分析

目的探讨先天性食管狭窄并食管气管瘘／食管闭锁的临床特征、分型及治疗方法,以减少误诊误治。方法通过2例先天性食管狭窄并食管气管瘘／食管闭锁患儿的病例报告,分析影像学资料及临床分型、随访结果。结果1例患儿在食管闭锁手术中得到了确诊并切除了隔膜,术后接受了食管扩张术;1例患儿术后造影发现了食管狭窄,仅行保守治疗。2例患儿随访效果良好。结论食管闭锁手术中有必要对远端食管进行探查,排除合并食管狭窄畸形。     

胆道闭锁患儿5种嗜肝DNA病毒感染状况检测报告

目的 检测几种常见嗜肝DNA病毒在胆道闭锁患儿肝脏组织中的感染率,探讨其与胆道闭锁发生的关系.方法 用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测随机选取的85例胆道闭锁和10例对照组患儿肝脏组织中的5种嗜肝DNA病毒,包括人巨细胞病毒(HCMV)、腺病毒(ADV)、EB病毒(EBV)、单纯疱疹病毒(HSV)和乙肝病毒(HBV),同时进行石蜡切片的病理染色和巨细胞病毒晚期蛋白PP65免疫组化方法检测.结果 在85例胆道闭锁患儿肝脏组织中,嗜肝DNA病毒阳性56例(65.9%),其中HCMV阳性51例(60.0%),ADV阳性5例(5.9%),EBV阳性3例(3.5%),HSV和HBV阳性0例(0%),对照组10例中均未检测到以上病毒的存在.免疫组织化学结果显示:HCMV多集中于肝脏组织中的肝细胞、血管内皮细胞、炎症浸润细胞当中,胆管上皮细胞呈强阳性反应.结论 胆道闭锁与嗜肝DNA病毒感染之间存在相关性,其中以人巨细胞病毒感染关系最为密切.     

MicroRNA在肿瘤分子诊断中的应用

MicroRNA（miRNA）在大多真核生物中表达,通过抑制翻译或诱导靶mRNA降解。miRNA是一种新的转录后基因表达调控模式,在复杂疾病形成过程中发挥着重要作用,调节了多种生物学过程,包括生长发育、信号转导、免疫调节、细胞凋亡、增殖及肿瘤发生等。越来越多的证据表明异常表达的miRNA是人类疾病的标志,包括肿瘤。差异表达的miRNA可能作为疾病早期诊断、分子分型及预后判断的指标,同时也可能成为多种肿瘤耐药新的治疗靶标。因此,miRNA在肿瘤中可能作为诊断、预测和治疗的生物标志。     

尿液内皮素-1在先天性肾积水患儿中的检测及意义

目的:探讨尿液内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在肾盂输尿管连接部梗阻(ureteropelvic junction obstruction,UPJO)肾积水患儿诊断中的作用及其意义。方法:选取50例单侧UPJO患儿,均经B超、静脉尿路造影(IVU)或磁共振水成像(MRU)等检查证实,并排除其他泌尿系统疾病,列为研究组;选取40例腹股沟斜疝或鞘膜积液患儿,列为对照组。研究组与对照组患儿均在术前留取膀胱尿液标本,并用酶联免疫吸附(ELISA)法测定尿液ET-1,同时测定尿肌酐(Cr)。结果:研究组尿ET-1/Cr显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。以ET-1845pg/mmolCr为诊断界值,敏感性为78%,特异性为90%,总准确率为82.5%。结论:尿液ET-1作为一个有效的生物学标志物,具有敏感、特异、方便、非侵入性等优点,在先天性肾积水患儿的尿生物学诊断中具有较好的应用前景。     

幽门螺杆菌儿童分离株中性粒细胞激活蛋白克隆及表达序列

目的：从幽门螺杆菌临床儿童分离株GZCH1基因组扩增中性粒细胞激活蛋白（NAP）基因,克隆入T载体,并亚克隆入表达载体pGEX-4T-1,进行测序及基因比对分析,为幽门螺杆菌疫苗研制奠定基础.方法：根据GenBank中幽门螺杆菌NAP序列,设计一对特异性引物扩增幽门螺杆菌临床儿童分离株NAP全长基因,与T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒进行酶切、测序鉴定,经EcoR Ⅰ、Not Ⅰ双酶切后与做相应酶切的pGEX-4T-1连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定,IPTG诱导重组蛋白表达,并对基因进行测序及比对分析.结果：以幽门螺杆菌儿童分离株GZCH1为模板,成功扩增了NAP基因,基因大小为435 bp,重组pGEX-4T-1-NAP双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示NAP在正确读框中,序列比对分析显示其与幽门螺杆菌J99株氨基酸一致性达99.2％,IPTG诱导后,pGEX4T-1-NAP/BL21在相应分子量（42.8 kD）可见融合蛋白的表达.幽门螺杆菌儿童分离株GZCH1 NAP序列已登录GenBank（登录号：GU301881）.结论：从幽门螺杆菌临床儿童分离株GZCH1中成功克隆了NAP基因,并获得重组蛋白的表达,为NAP幽门螺杆菌疫苗研制奠定了良好的基础.     

广州市12个区(县级市)妇幼保健服务综合绩效评价体系的构建

目的探索构建广州市12个区(县级市)妇幼保健服务综合绩效评价指标体系,旨在为广州12个区(县级市)妇幼保健工作绩效管理提供思路和依据。 方法选取《2011年广州市妇幼保健年报表》,主要包括《广州市产科质量情况年报表》、《广州市孕产妇保健和健康情况年报表》、《广州市7岁以下儿童保健和健康情况年报表》为研究对象。采用因子分析法对筛选指标进行综合分析,对各区(县级市)妇幼保健服务完成情况进行综合评价。 结果根据绩效评价指标体系框架,从工作量、工作质量、工作过程、工作成效4个维度对广州市12个区(县级市)妇幼保健服务绩效进行评价的综合得分结果显示,排位前3位的为PY,BY和HZ区,排位靠后的为ZC,LW和HP区。 结论本研究构建的模型客观地反映了广州市12个区(县级市)妇幼保健服务的4个维度,既体现了工作量所带来的工作难度,也显现了过程的重要性,同时统一了产出和结果,充分体现了妇幼卫生工作的主要维度。建议今后根据每年工作重心,对妇幼绩效考核指标的选取进行适当调整。     

先天性巨结肠的遗传发病机制及前瞻性队列研究进展

正先天性巨结肠(hirschsprung's disease,HSCR)是一种常见的胃肠动力障碍性疾病,由肠神经节细胞缺乏所致。其发病率约为1/4 000～1/5 000,男女发病率比约为41∶1~([1])。按神经节细胞缺乏所累及肠管的长度不同,国际上常将HSCR分为三型:短段型(short-segment HSCR,SHSCR)、长段型(long-segment HSCR,LHSCR)和全结肠型(total colon aganglionosis,TCA)~([2])。此外,还有罕见累及全部肠管类     

先天性膈疝肺动脉高压的实验研究

目的研究先天性膈疝（Congenital diaphragmatic hernia,CDH）肺发育不良中肺动脉高压（Dulmonary hypertension,PH）的量化指标,探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在CDH胎肺中的表达及在CDH肺动脉高压发生中的可能作用,探讨地塞米松（Dexamethasone,Dex）对VEGF和CDH肺发育的影响。方法采用Nitrofen诱导CDH模型胎鼠并分组：Dex组予以产前Dex治疗,CDH组未给予Dex,另取正常胎鼠为对照组。采用组织学测量、肺蛋白含量检测等方法,测定出平均肺泡面积、平均肺泡间隔厚度、每高倍视野肺血管数、动脉中膜厚度占外径比（MT％）、管壁面积占血管总面积比（WA％）、管腔面积占血管总面积比（LA％）、左肺与体重比、左肺蛋白含量与体重比等;实时荧光定量PCR（QPCR）和免疫蛋白印迹（Western blotting）方法检测各组胎肺中VEGF的表达及相对含量。结果与对照组相比,CDH组胎肺显著发育不良,包括肺微小动脉结构明显异常,表现为每高倍视野肺血管数减少、MT％增大、WA％增大,LA％减小（均P〈0．05）;另外VEGFmRNA及蛋白水平均明显升高（P〈0．05）。与CDH组相比,Dex组胎肺发育明显改善,表现为每高倍视野肺血管数增加、动脉中膜厚度占外径比减小、管腔面积占血管总面积比增大（均P〈0．05）;但VEGF mRNA及蛋白水平未发现明显变化（P〉0．05）。结论VEGF在CDH胎肺中的表达增高可能是CDH肺发育不良形成机制之一;产前地塞米松治疗可明显改善肺微小动脉结构异常及肺发育不良,但未发现对VEGF的表达有影响,提示Dex可能并非通过调节VEGF的表达而发挥改善肺动脉高压及肺发育不良的作用。     

先天性巨结肠症术后急相蛋白变化的初步探讨

有作者注意到,当体内存在组织损伤、炎症时,急相蛋白在血中浓度发生改变,且与炎症,组织坏死的程度及时间呈明显平行关系。另有作者报道,急相蛋白可作为术后并发症的早期诊断,病程观察、预后判断的指标。为此,本文作者对12例先天性巨结肠根治术前后3种急相蛋白:C-反应蛋白(CRP)、α-抗胰蛋白酶(α-AT)、前白蛋白(PA)的变化进行了动态测定。结果表明:术后无并发症患儿CRP术后上升,24h