C反应蛋白对多发性骨髓瘤细胞系U266增殖机制的研究

为了观察C反应蛋白（CRP）对人骨髓瘤细胞系U266细胞增殖活性的作用机制,将液氮冻存的U266细胞复苏后,悬浮培养,第3天收集细胞备用,分别以不同浓度CRP（0、5、10、20mg／L）培养24小时,采用血液分析仪检测细胞增殖情况,采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测凋亡相关蛋白survivin和HSP90ct的表达。结果发现：CRP处理的细胞组增殖率及survivin、HSP90α的表达量均高于对照组（P〈0．05）,20mg／LCRP组作用最显著;survivin、HSP90α之间表达具有显著相关性（r=0．737,P〈0．0001）。结论：CRP是通过调节凋亡抑制蛋白Survivin及HSP90α的表达发挥促进U266细胞增殖的作用。     

多重巢式RT-PCR技术在急性髓系白血病中的应用

Objective To analyse the fusion genes derived from chromosome structural aberrations in acute myeloid leukemia(AML) and the relationship between fusion genes and the MICM classification, clinical diagnosis, chemotherapy and prognosis. Methods The expression of fusion gene in bone marrow samples was detected with multiplex RT-PCR technique and chromosome karyotypes, immunological phenotypes and clinical data were analyzed in 60 acute myeloid leukemia newly diagnosed. Results 37 cases(61.67 %) of 60 patients carried 5 kinds of fusion genes consisting of MLL-AF9, TLS-ERG, CBFβ-MYH1, AML1-ETO and PML-RARα. The activation of oncogene HOX11 was detected in 13 AML cases, three of them with other chromosome aberration simultaneously.23 cases of 31 patients carrying AML1-ETO or PML-RARα, reached complete remission(CR) after chemotherapy and without relapse. Conclusion Gene typing is the most precise classification method that can direct clinical treatment and evaluate prognosis. Multiplex RT-PCR technique, which can quickly screen 29 kinds of fusion gene derived from chromosome structural aberrations at one time, maybe helpful to improve M1CM classification and guide the choice of treatment.     

荧光原位杂交技术在多发性骨髓瘤患者del(13q14)检测中的应用

 目的　了解多发性骨髓瘤（MM）患者中13号染色体缺失情况,分析13号染色体部分缺失在MM中的临床价值。方法　采用荧光原位杂交（FISH）技术检测38例MM患者骨髓标本中Rb-1基因和13q14位点的缺失;采用Fisher确切概率法分析13号染色体部分缺失与患者确诊时临床特征间关系。结果　在38例MM患者中,13号染色体部分缺失20 例,其中仅Rb-1基因缺失4例,仅13q14位点缺失2例,两位点同时缺失14例。Fisher确切概率法分析显示13号染色体长臂缺失（del 13q14）与患者血清乳酸脱氢酶升高及国际分期系统（ISS）有关。结论　Rb-1基因和13q14位点的缺失在MM中均较为常见,13号染色体部分缺失对MM的生物学行为有一定影响,del (13q14)在 MM中的意义有待进一步探讨;FISH是一种在分析 MM患者13号染色体异常方面较为快速、准确和敏感的方法。     

弓形虫表面抗原SAG3基因和IL-2基因佐剂混合诱导小鼠免疫应答研究

目的了解编码SAG3的重组质粒和IL-2基因佐剂在小鼠体内的免疫反应,为进一步的核酸疫苗及免疫学研究创造条件。方法将编码SAG3的质粒和鼠源性IL-2表达载体以100μg的剂量感染小鼠,3周中两次以相同的剂量加强免疫,分别以PBS和空质粒pcDNA3.1感染。采用ELISA法测定抗体水平、亚型、IFN-γI、L-4和IL-2的含量,RT-PCR方法检测注射部位目的基因的转录,所有鼠均由强毒力ZS2株弓形虫感染。结果SAG3表达质粒3次免疫后鼠体内特异IgG水平明显上升,IL-2表达质粒的联合使用导致IgG2a水平的升高和IFN-γ的产生,提高了其分泌IL-2的水平,但对IL-4的水平产生轻微的影响;RT-PCR显示首次使用导致IgG2a水平的升高和IFN-γ的产生,提高了其分泌IL-2的水平,但对IL-4的水平产生轻微的影响;RT-PCR显示首次免疫15天后,目的基因在肌肉组织中仍有表达;混合质粒注射和小鼠抗弓形虫感染的存活时间延长。结论由SAG3 DNA诱导的免疫应答因IL-2表达质粒的共同注射而增强,DNA疫苗和适当细胞因子的共注射对抵抗弓形虫感染的效果值得进一步研究。     

老年人急性髓细胞白血病多药耐药蛋白过度表达的实验与临床研究

 目的　初步分析老年急性髓细胞白血病（AML）患者P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）的表达及其在预后中的意义。方法　流式细胞仪活细胞直接或间接免疫荧光法检测12例初治老年AML（M2a 4例,其中1例由MDS转化而来;M4a 2例;M5a 5例;M6 1例）患者骨髓白血病细胞P-gp、MRP、LRP表达情况。分析这些多药耐药蛋白表达与预后的关系。结果　P-gp、MRP、LRP的表达率分别为58.33 %、8.33 %、50 %;P-gp(+)、MRP(+)0,P-gp(+)、LRP(+)33.33 %,MRP(+)、LRP(+)0,P-gp(+)、MRP(+)、LRP(+)8.33 %,P-gp(-)、MRP(-)、LRP(-)33.33 %,其中P-gp、LRP单独和二者共表达频率较高。P-gp(+)者的完全缓解（CR）率与2年总生存率（OS）均显著低于P-gp(-)者（P＝0.01）,LRP(+)者的CR率与2年OS亦均低于LRP(-)者。结论　老年AML患者 P-gp、LRP单独及二者共表达频率均较高。P-gp、LRP过度表达是老年AML患者的不良预后因素。     

急性白血病线粒体D-loop区微卫星D310和D16184不稳定性研究

 目的　探讨线粒体 D-loop 区微卫星（MSI）D310 和 D16184 在急性白血病（AL）中的不稳定性。方法　采用反转录聚合酶链-单链构象多态性分析（PCR-SSCP）法筛选100例初诊未治及治疗的 AL 患者 D-loop 区 HV-1和 HV-2。对迁移异常者进行测序,结果与剑桥标准序列（rCRS）和mtDB数据库进行比对,分析其突变情况。比较各组组中 D310 和 D16184 的突变率。结果　100例AL患者中,D310总突变49例（49.0 %）,未治疗组40例中突变13例（32.5 %）,治疗组60例中突变36例（60.0 %）,治疗组高于未治疗组（P＜0.05）;D16184总突变32例（32.0 %）,未治疗组突变8例（20.0 %）,治疗组为24例（40.0 %）,治疗组高于未治疗组（P＜0.05）。结论　D310和D16184在AL中存在较高的突变率和多种突变类型,具有较强的不稳定性;化疗可能增强微卫星的不稳定性。     

肤康洗剂的制备及应用

肤康洗剂是我院用于治疗皮肤瘙痒、疥疮、湿疹等疾病的一种外用制剂,疗效显著,现报道如下.     

荧光原位杂交技术在检测慢性淋巴细胞白血病ATM基因缺失中的应用

 目的　探讨慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者中ATM基因缺失情况及其与临床分期的相关性。方法　以骨髓涂片档案片为标本,运用荧光原位杂交（FISH）技术和SpectrumOrangeTM标记的位于11q22.3的序列特异性DNA探针ATM对28例初诊的CLL患者进行了ATM缺失的检测,临床分期按照Binet分期方法,采用Fisher确切概率法分析ATM基因缺失与患者初诊时临床特征间的关系。结果　FISH分析中,28例CLL患者中有4例（14.3 %）检出ATM基因缺失,9例Binet A期患者中1例（11.1 %） 存在del（ATM）异常;8例Binet B期患者中1例（12.5 %） 存在异常;11例Binet C期患者中2例（18.2 %） 存在异常。Fisher确切概率法分析显示ATM基因缺失与年龄、性别、临床分期无明显相关性（P＞0.05）。结论　以骨髓涂片档案片为样本进行FISH检测,方法简便,结果可靠,便于血液系统克隆性疾病的回顾性遗传学分析,ATM基因缺失是CLL患者常见的细胞遗传学改变,其对中国CLL患者的预后预测价值有待进一步深入研究。     

P43基因在白血病患者弓形虫感染诊断中的应用

目的建立快速、特异、敏感诊断白血病患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并分析其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对46例白血病及20名正常人同时进行检测。结果检测白血病40例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为8例及6例,其阳性率分别为17.4%和13.1%。作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为白血病患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。     

中药“天甘散”抗乙肝病毒治疗观察

我们选用天然中草药生天花粉、生甘草、生当归、生黄芩组方制成天甘散,用于慢性乙型肝炎血清复制指标的阴转治疗,共观察76例,并与干扰素治疗的54例进行比较分析,现报告如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 治疗组76例,其中男性52例,女性24例,平均年龄24.36岁,按照1990年全国病毒性肝炎学术会议修定标准,诊为CAH 9例,CPH 38