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目的:检测生殖细胞核因子(germ cell nuclear factor,GCNF)及Oct-4在宫颈癌HeLa细胞诱导分化前后的表达。方法:用全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)诱导HeLa细胞分化,HE染色观察诱导前后细胞的形态变化;通过免疫组化和半定量的RT-PCR方法,检测GCNF及Oct-4在HeLa细胞诱导分化前后的表达。应用SPSS 13.0软件进行统计学处理。结果:随着诱导时间的延长HeLa细胞体积变小,圆形细胞逐渐增多,细胞核开始固缩;GCNF在诱导前后的HeLa细胞中均有表达,随着诱导时间延长其表达逐渐增强但3d后表达强度开始下降,F=14.67,P〈0.001。3d组和1d组、2d组和5d组比较差异无统计学意义;但与对照组比较,差异有统计学意义,P〈0.05;Oct-4在诱导前后的细胞中均不表达。结论:GCNF参与了肿瘤细胞的体外分化;在体外培养的宫颈癌细胞株中,GCNF基因可能关闭了Oct-4的激素反应元件。 相似文献
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目的:将成功构建的人pcDNA3.1-GCNF真核表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,观察GCNF基因对HeLa细胞生物学功能的影响。方法:将重组质粒pcDNA3.1-GCNF转染HeLa细胞,通过MTT比色法、基质胶黏附实验和Transwell侵袭试验对转染后HeLa细胞增殖、黏附和侵袭力进行分析。结果:成功获得瞬时转染的pcDNA3.1-GCNF HeLa细胞,转染目的基因组(0.239±0.014)与转染空质粒组(0.198±0.020)及未转染组(0.204±0.012)相比,细胞增殖最快(P<0.05)。转染目的基因后细胞粘附、侵袭力未见明显改变。结论:GCNF基因促进了体外培养的宫颈癌HeLa细胞增殖,但对HeLa细胞粘附、侵袭力没有明显的影响。 相似文献
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目的:探讨生殖细胞核因子(GCNF)在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生发展的作用。方法:运用免疫组织化学Envision法和RT-PCR技术检测GCNF蛋白和mRNA在正常宫颈组织、上皮内瘤变组织及宫颈鳞癌组织中的表达。结果:GCNF蛋白在正常宫颈组织、上皮内瘤变组织(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ)和宫颈鳞癌组织中的表达率分别为90.0%(18/20)、78.3%(18/23)、45.0%(9/20)、33.3%(9/27)和3.4%(4/29),差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示GC-NF mRNA的表达与GCNF蛋白相一致,即宫颈鳞癌组织与正常宫颈组织相比GCNF mRNA的表达显著降低(P<0.05)。结论:初步认为GCNF蛋白和mRNA表达的下调或缺失可能是宫颈癌发生的一个早期信号,以期为宫颈癌的靶向治疗提供研究方向。 相似文献
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目的:研究生殖细胞核因子在骨髓间充质干细胞增殖与分化中的表达.方法:取4~6周BALB/c小鼠,采用全骨髓贴壁筛选法体外培养小鼠BMSCs.取第3代小鼠BMSCs,定向诱导BMSCs向成骨细胞分化,通过检测碱性磷酸酶鉴定诱导后的细胞.采用RT-PCR及间接免疫荧光染色,从mRNA和蛋白水平检测GCNF在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达.结果:RT-PCR与间接免疫荧光染色结果同时显示,第3代的小鼠BMSCs和向成骨方向诱导10d后的BMSCs均有GCNF表达.结论:GCNF在BMSCs增殖分化中有表达. 相似文献
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附睾精子成熟功能研究进展 总被引:10,自引:2,他引:8
精子在附睾运行中不断成熟 ,表现为膜结构的有序变化以及运动和受精能力获得等。其中 ,附睾分泌蛋白 HE5 /CD5 2、HE1等与精子膜成熟密切相关。鞭毛中巯基的变化、肉毒碱、Ca2 + 和c AMP等与附睾精子运动能力获得密切相关。与精子受精能力获得相关的附睾因素有 :1 P34H、精子黏合素、酸性附睾糖蛋白 ( DE/AEG)等附睾分泌蛋白与精子的结合 ;以及 2附睾对 PH- 2 0、受精素 ( fertilin)等精子蛋白的加工。 相似文献