基于DC的肿瘤疫苗

过去十年来,树突状细胞在刺激特异性免疫应答中关键作用的认定,使其应用到癌症和HIV的治疗领域中来.已有许多成功的报道,但这些应答的最佳途径和持续时间仍然有待进一步确定.DCs的质量、将肿瘤抗原转入DCs中的方法和免疫反应检测等有关的一些问题使得不同实验室中的实验结果很难进行比较.要确定基于DCs的肿瘤疫苗的作用、将DCs接种到病人体内的最有效途径和用来转入DCs中的肿瘤抗原等都需要作大量的工作.     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴及单核细胞表面B7-H1表达研究

目的 探讨B7家族共刺激分子B7-H1在慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者外周血淋巴细胞及单核细胞表面的表达情况.方法 利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞群体表面B7-H1分子的表达.结果 在慢性乙肝患者,T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,与健康对照无差异;单核细胞表面B7-H1的表达率为(19.17±11.64)%,显著高于健康对照的(7.30±5.49)%(P＜0.01),且B7-H1的表达与患者血浆ALT水平成正相关(r=0.423,P＜0.01).结论 慢性乙肝患者外周血T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,单核细胞B7-H1表达上调,且与ALT水平正相关,提示B7-H1可能与乙肝病毒感染慢性化相关.     

慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的CD28表达研究

目的检测慢性乙型肝炎患者HBV特异性CTL的CD28表达情况。方法利用MHC-Ⅰ-肽五聚体（pentamer）技术结合流式多色分析技术,直接离体情况下（direct ex vivo）检测慢性乙型肝炎患者3个HLA-A2限制性的HBV表位特异性CTL表达CD28的情况。结果在22例HLA-A2^＋患者中,检测出HBcAg（18—27）特异性CTL有13例,频率为0．05％-0．16％;CD28^＋的HBcAg（18—27）特异性CTL的百分比为40％（23％-61％）。检测出HBeAg（335—343）有8例,频率为0.05％-0．24％;CD28%＋的HBeAg（335—343）特异性CTL的百分比为43％（36％-60％）。检测出HBp（575—583）特异性CTL有9例,频率为0．05％-0．19％;CD28^＋的HBpAg（575—583）特异性CTL的百分比为61％（45％-70％）。结论不同HBV抗原表位特异性CTL的CD28表达情况不同。     

基于疫苗的癌症免疫预防

免疫监视理论认为,免疫系统能够控制癌症的发生和发展.基于上述概念,癌症的免疫预防是指通过在健康入中增强抗癌症免疫应答,达到有效降低癌症发生风险的方法.对于由诸如乙型肝炎病毒(HBV)、人乳头状瘤病毒(HPV)等致癌病毒引起的癌症,预防性癌症疫苗获得了很大的成功,证明了疫苗接种策略在降低全球癌症负担中的潜力.但是对于非病...     

HBV颗粒的纯化及生物学活性鉴定

目的优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法。方法在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖,PCR荧光定量检测HBV超滤液;电镜观察70 000g纯化后的HBV超微形态;70000 g纯化后的HBV颗粒感染树鼩肝细胞,检验70 000 g纯化后的HBV感染活性。结果100 000 g离心造成大量HBV在离心过程中损失,收获率只有21%,70 000g离心不仅降低了离心中的病毒损失,而且可有效对HBV和血清进行分离,收获率达到78%以上,较100 000g还提高3.7倍多。电镜可观察到纯化后病毒液中有大量的病毒颗粒;纯化后的HBV颗粒感染活性良好,可有效感染原代树鼩肝细胞。结论70 000 g不连续蔗糖梯度离心可有效分离纯化HBV病毒,较100 000 g收获率明显提高,纯化后的HBV不但具有典型的HBV特征,还具有良好的生物学感染活性。     

肿瘤细胞诱导T细胞下调表达腺苷脱氨酶

目的 蛋白质组学分析鉴定与肿瘤细胞共培养T细胞的表达差异蛋白.方法 双向电泳分离有/无肿瘤细胞共培养的T细胞蛋白,PDQuest软件分析筛选肿瘤细胞诱导表达异常的蛋白点,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF MS)对酶解消化样品进行肽质量指纹图谱(PMF)分析,结合数据库搜索鉴定蛋白质.结果 PDQuest分析有/无肿瘤细胞共培养的T细胞蛋白双向电泳图谱,70余个蛋白点表达水平差异显著,其中与肿瘤细胞共培养的T细胞有一明显表达下调的蛋白点,质谱分析结合数据库检索表明该蛋白点为腺苷脱氨酶.结论 肿瘤细胞诱导T细胞下调表达腺苷脱氨酶.     

抗原致敏期缺损补体增强抗肿瘤免疫效应

目的 观察蛇毒因子(CVF)缺损补体对疫苗诱导的抗肿瘤免疫的影响.方法 用CVF分别在抗原的致敏期和免疫的效应期缺损补体,抗原OVA加完全弗氏佐剂(CFA)联合免疫C57BL/6小鼠,14 d后接种E.G7肿瘤细胞,评价补体缺损效果,观察肿瘤出现时间,记录小鼠肿瘤大小.结果 OVA CFA免疫的正常小鼠,在肿瘤接种14 d内能完全抑制肿瘤生长;抗原致敏期缺损补体,肿瘤接种21 d内能完全抑制肿瘤生长;免疫效应期缺损补体,肿瘤出现的时间与OVA CFA免疫的正常小鼠相似.结论 抗原致敏期补体缺损可能有利于抗肿瘤免疫.     

前列腺素E2抑制T细胞活化的机制

机体在严重烧伤、创伤、败血症等情况下,T细胞免疫功能受到抑制.前列腺素E2是抑制T细胞免疫活化的重要炎性介质之一,它通过对T细胞活化途径中的信号转导分子的抑制作用,使T细胞处于免疫失活或无能状态,这种免疫调节作用,在机体处于应急状态下,发挥免疫保护作用.     

鼠源轮状病毒vp7基因的表达载体构建及转基因植物的研究

目的：构建表达鼠源轮状病毒抗原基因vp7的植物表达载体及植物转化研究。方法：抗原基因vp7经PCR扩增后直接克隆到PUC－T载体，双酶切目的片断和植物表达载体，以T4连接酶将目的片断与载体相连接，电转化方式将重组质粒转入农杆菌。结果：以重组农杆菌为介导将靶基因转入到马铃薯外植体。成功地将目的基因定向克隆到表达载体，并转入到农杆菌中；以农杆菌为介导获得抗性转基因马铃薯植株。结论：通过PCR检测，初步确定轮状病毒外壳蛋白基因vp7已成功地整合到马铃薯植株中。     

MAGE-12蛋白在肺癌中的表达及其意义

目的：探讨肺癌组织中MAGE-12的蛋白表达、定位及其与临床病理分型之伺的关系。方法：采用免疫组化方法检测17例肺癌标本中MAGE-12蛋白表达及细胞内定位。结果：17例中11例蛋白水平表达，表达率为64．7％，其中15例肺鳞癌中10例表达MAGE-12蛋白，2例肺腺癌中1例表达。11例蛋白水平表达的样本及1例已知阳性表达MAGE-12的LB373-MEL细胞株均定位于细胞质，反应呈棕黄色。结论：MAGE-12蛋白在肺癌有较高的表达率，基于MAGE-12基因及其蛋白作为新的疫苗可能是一个有前途的治疗肺癌的免疫治疗方法。