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目的应用分子生物学技术构建Rac1基因真核表达质粒及小分子RNA(siRNA)干扰片段,通过调控其表达,研究Rac1蛋白对结肠癌细胞生物学功能的影响。
方法从结肠癌细胞中扩增Rac1基因,构建pCDNA3.1(+)-Rac1和pEGFP-Rac1真核表达质粒实现过表达Rac1基因;通过小分子RNA干扰抑制Rac1基因表达。利用侵袭实验、划痕实验研究Rac1基因对结肠癌细胞侵袭和迁移能力的改变;通过Pull-Down实验,研究调控Rac1表达对癌细胞中GTPase活性的影响。
结果成功构建Rac1基因真核表达质粒。通过调控Rac1蛋白的表达证实其与结肠癌细胞中Rac1 GTPase的活化程度,以及肿瘤细胞的迁移和侵袭能力呈正性关联。
结论通过抑制Rac1的表达,可以有效阻止Rac1 GTPase的激活,从而抑制肿瘤细胞的迁移及侵袭,为抑制结肠癌进展提供新的干预靶点,也为进一步免疫生物过继治疗提供了必要的实验基础。 相似文献
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目的探讨院前急救对重症颅脑损伤患者预后的影响。方法62例重症颅脑损伤患者经过院前急救(院前急救组),56例患者直接进行院内急救(对照组)。观察两组并发症发生情况,出院时按格拉斯哥结果评分法评价患者近期预后情况。结果院前急救组气道堵塞发生率明显低于对照组(P〈0.01);院前急救组吸人性肺炎和颅内高压等并发症发生率分别为3.3%和11.3%,与对照组的14.3%和26.8%比较差异均有统计学意义(均P〈0.05);两组颅内感染发生率差异无统计学意义(P〉0.05)。院前急救组恢复良好22例(39.3%)、死亡8例(12.9%),与对照组的36例(58.1%)、16例(28.6%)比较差异均有统计学意义(均P〈0.05),两组中、重度残疾以及植物状态发生率比较差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论及时、有效的院前急救是降低重型颅脑损伤患者病死率、减少并发症的有效措施。 相似文献
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创伤性休克液体复苏的研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
创伤性休克,是一种因严重创伤而引起的休克类型,临床多见为低血容量性休克,其基本概念是创伤引起全身组织血液灌流量不能满足机体需要,是一种对生命健康威胁很大,死亡率致残率很高的全身性伤害。在严重创伤中,由于有失血、失液、体液重新分布、神经介质反应、细胞因子释放等诸多因素的作用,使休克发生居高不下。严重胸外伤伴血气胸的休克发生率为70%,伴有肝脾破裂的严重腹部伤休克率为80%,严重骨盆骨折为35%,严重多发伤为50%~70%。针对创伤性休克早期的应激反应、缺血缺氧和炎症反应失控病理特点。目前对于创伤性休克的诊治,有许多新的结论和方法,但治疗重点仍是恰当的迅速的补液扩容改善微循环, 相似文献
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【目的】研究大豆异黄酮对绝经后妇女骨质疏松的疗效。【方法】选择自然绝经后妇女60例为研究对象,随机双盲分为治疗组及对照组各30例,治疗组每人每日共摄人大豆异黄酮90mg,评价全身骨痛情况及更年期症状,检测两组用药前、后的全身平均骨密度以及血清总碱性磷酸酶、血钙、血磷等骨代谢指标。【结果】治疗组对绝经后妇女的全身骨疼痛及更年期症状有明显的改善作用,并且骨密度升高,与对照组相比,差异有显著性(P〈0.05)。治疗组受试对象的血清钙、血清磷均有上升趋势,血清碱性磷酸酶有下降趋势,但无显著性差异。【结论】大豆异黄酮有雌激素样作用,每日90mg大豆异黄酮可防治绝经后妇女的骨质疏松症。 相似文献
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目的 探讨石头鱼毒鳍刺伤的临床特点。方法 结合文献分析本科自2004—2007年收治的17例石头鱼毒鳍刺伤的临床表现、治疗及预后。结果 在给予热水浸泡的8例石头鱼毒鳍刺伤中,4例(50%)疼痛得到明显缓解。11例给予局部麻醉的病例均获得迅速的疼痛缓解。1例出现伤口周围皮肤坏死:无1例发生严重全身并发症和死亡;平均留观时间2.7(1~7)d;平均痊愈时间8.7(5~35)d。结论 石头鱼毒鳍刺伤一般预后良好。局部麻醉能可靠、迅速的缓解疼痛和方便处理伤口。 相似文献
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背景:骨性关节炎是一种复杂的多病因退变性关节疾病。早期进行骨性关节炎的防治尤其重要。但获取足量的适合研究的早期骨性关节炎的人类骨标本十分困难。目的:观察关节不稳方法建立骨关节炎模型大鼠的关节软骨组织学变化。方法:10周龄雄性SD大鼠随机分为2组:实验组切除右膝内侧半月板及内侧副韧带,对照组仅切开关节囊。于术后1,2,4,6,8周取右膝关节标本,行病理组织学检查分析大鼠骨关节炎病程的变化情况。结果与结论:①术后2,4,6,8周,实验组关节软骨退变程度呈现轻度糜烂、溃疡磨损、严重磨损、骨赘形成等病理变化。②术后1,2,4,6,8周,实验组关节软骨评分均明显高于对照组(P〈0.05)。结果显示该实验采用内侧副韧带切断+内侧半月板切除方法成功建立了大鼠膝关节骨关节炎模型,且造模后4周内的病理、形态学改变类似于人类早期膝关节骨关节炎表现,是研究早期骨关节炎的理想模型。 相似文献
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目的:本研究采用靶向CD147的单克隆抗体对纳米基因载体颗粒进行靶向修饰后,进行针对肺癌细胞的蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)小干扰RNA基因治疗,观察其对肺癌细胞增殖和迁移能力的抑制效果。方法:制作可靶向CD147蛋白的磁性纳米基因载体。激光扫描共聚焦显微镜观察肺癌细胞CD147表达量。分别设立CP组、CN组和LP组复合物,按每6孔板孔质粒总量250 ng进行细胞转染。另设CD147靶向载体对照CA组和未转染细胞的对照(control)组。激光扫描共聚焦显微镜观察纳米造影剂的细胞内吞效果。实时荧光定量PCR检测PKCε的mRNA表达。Western blot法检测PKCε、Ki67、MMP3、Wnt1和GAPDH的蛋白表达。平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力。Transwell法检测细胞的迁移能力。结果:免疫荧光法染色观察证实,人肺癌A549细胞的胞膜高表达CD147蛋白。CP组细胞中siRNA高效进入A549细胞,质粒内吞效率大于CN组和LP组。CP组、CN组、LP组和CA组的A549细胞中PKCε的mRNA相对表达量分别为control组的(9.76±0.18)%、(98.51±0.32)%、(99.17±0.16)%和(99.68±0.11)%,CP组与control组间的差异有统计学显著性(P0.05),CN组、LP组与control组间的差异无统计学显著性。CP组PKCε、Ki-67、MMP3及Wnt1蛋白的表达量明显降低,CN组和LP组与对照组之间的蛋白表达量的差异无统计学显著性。CP组的克隆形成数量明显少于control组,差异具有统计学显著性(P0.05)。CN组、LP组和CA组的有效克隆数量与control组相比差异没有统计学显著性。CP组的过膜细胞数量明显少于control组,差异具有统计学显著性(P0.05)。CN组、LP组和CA组的数量与control组相比差异没有统计学显著性。结论:靶向CD147修饰的纳米基因载体,可以对肺癌细胞进行高效的PKCε-siRNA基因治疗,实现对肺癌细胞增殖和迁移能力的高效抑制。 相似文献