单纯疱疹病毒性角膜炎实验室诊断技术

单纯疱疹病毒性角膜炎实验室诊断技术白求恩医科大学第一临床医院眼科杜鹃，徐杰锦州医学院附属第一医院眼科刘丹单纯疱疹病毒性角膜炎（ＨＳＫ）是目前世界上主要致盲疾病之一，诊断主要依据角膜病变形态及临床症状。但由于其反复发作的特点常致病变不典型，造成诊断上的...     

病例教学联合思维导图在病理生理学教学中的应用

目的　评价病例教学联合思维导图在病理生理学教学中的应用效果,为提高病理生理学教学质量提供依据。方法　选取首都医科大学燕京医学院2017级本科生124名学生作为研究对象,分为试验组60人和对照组64人。其中,对照组采用传统教学,试验组采用课上病例教学联合课后思维导图的教学方式。课程结束后通过云班课平时成绩和试卷成绩对教学效果进行评价。采用SPSS 17.0进行Wilcoxon秩和检验和Welch’s correction t检验。结果　试验组学习的积极性得到了有效的调动（P<0.001）、知识的理解力也优于对照组（P=0.020）。试验组的平均理论成绩优于对照组（P=0.036）,主要表现为客观题成绩高于对照组（P<0.001）及简答和论述题成绩高于对照组（P=0.006）,名词解释成绩差异无统计学意义（P=0.302）。结论　病例教学联合思维导图可显著提高病理生理学的教学质量。     

柚皮苷抑制低氧/复氧致大鼠心肌细胞系H9c2损伤

目的研究柚皮苷(NAR)对H9c2低氧/复氧(H/R)损伤心肌细胞内质网应激的影响。方法将H9c2心肌细胞随机分为对照组(C组)、低氧/复氧组(H/R组)低氧4 h后复氧24 h、柚皮苷10、20和40μg/mL组。于低氧前6 h给予柚皮苷培养再行低氧4 h后复氧24 h。实验后TUNEL检测心肌细胞凋亡;Western blot检测GRP78、ATF6、Bax及Bcl-2蛋白表达。结果与对照组相比,H/R组细胞凋亡增加,GRP78、ATF6、Bax蛋白表达和Bax/Bcl-2比率显著上调,而Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.05);与H/R组比较,柚皮苷3个剂量组均可使细胞凋亡减少,GRP78、ATF6、Bax、Bax/Bcl-2比率下调,Bcl-2上调(P0.05),尤其以柚皮苷20和40μg/mL组作用最显著。结论柚皮苷预处理可以降低细胞凋亡,其机制可能与抑制内质网应激有关。     

Pyrford钢丝环扎加张力带内固定治疗髌骨骨折的生物力学分析

目的　测试Pyrford钢丝环扎加张力带内固定治疗髌骨骨折的生物力学特性 ,为临床治疗提供理论依据。方法　采集新鲜牛尸体膝关节标本 6具 ,制成髌骨骨折模型 ,用Pyrford钢丝环扎加张力带固定 ,并与克氏针张力带、单纯钢丝环扎进行对照比较。结果　Pyrford钢丝环扎加张力带内固定完全符合髌骨的生物力学性能 ,与克氏针张力带相当 ,能满足膝关节的强度 ,符合人体正常生理功能要求。结论　Pyrford钢丝环扎加张力带固定治疗髌骨骨折 ,具有优越的生物力学性能 ,且能达到解剖复位 ,操作简便 ,固定牢固 ,适应早期功能锻炼的目的     

BDNF对体外培养的大鼠脊髓前角神经元内突触素Ⅰ与突触囊泡素表达的影响

探讨BDNF对体外培养的大鼠脊髓前角神经元内突触素I与突触囊泡素(SYN)表达的影响。取孕14d大鼠子宫内胎鼠的脊髓腹侧部分神经元,体外有血清培养。在培养7d后,随机分成对照组、BDNF组和抗BDNF组。BDNF组培养液中加入BDNF(20ng/ml),抗BDNF组培养液中加入BDNF抗体(20μg/ml),对照组加入等量Hanks液。3d后在倒置显微镜下计数三组神经元存活数,并用NF200、MAP2、NSE的免疫组化反应对神经细胞进行鉴定。行突触素I与SYN免疫组化反应,对部分细胞行突触素ImRNA原位杂交反应,运用图像分析系统对突触素I与SYN免疫组织反应阳性产物以及突触素I原位杂交反应阳性产物作光密度分析。结果发现有血清培养时各组脊髓前角神经元的存活数无显著差异(P>0.05);BDNF组突触素I与SYN免疫反应阳性产物的平均光密度值高于其它两组,抗BDNF组最低(P<0.01)。BDNF组突触素ImRNA阳性产物的平均光密度值明显高于其它两组,抗BDNF组突触素ImRNA阳性产物的平均光密度值最低(P<0.01)。本研究结果提示BDNF对有血清培养时脊髓前角神经元的存活没有明显影响,但BDNF可明显上调培养的脊髓前角神经元内突触素I与SYN的表达。     

AMPK通过增强心肌脂肪酸氧化抑制大鼠心肌肥厚

目的： 探讨单磷酸腺苷（AMP）激活的蛋白激酶（AMPK）对心肌肥厚的影响及可能涉及的作用机制。方法： 通过对大鼠行腹主动脉缩窄术（TAC）引起压力负荷增加，造成心肌肥厚的模型。术后24 h起经皮下注射AMPK的特异性激活剂AICAR(0.5 mg·kg-1·d-1)直至术后7周。处死动物前，对大鼠进行超声心动学指标的检测和血清游离脂肪酸浓度测定；处死动物，取心脏称重后计算心脏重/体重比值，测量心肌细胞的平均直径、心肌中的游离脂肪酸含量、过氧化体增殖物激活型受体α（PPARα）和肉碱棕榈酰转移酶（CPT-I）的mRNA表达。结果： （1）心肌肥厚+AICAR组大鼠的心脏重/体重比值、心肌细胞平均直径、血清及心肌中游离脂肪酸的浓度明显低于心肌肥厚对照组；（2）心肌肥厚+AICAR组大鼠心肌PPARα及CPT-I的mRNA表达明显高于心肌肥厚对照组；(3) 心肌肥厚+AICAR组大鼠心脏超声心动学指标：左室后壁舒张末期厚度、左室舒张、收缩末期内径 (PWT, LVDD, LVSD) 低于心肌肥厚对照组，左室短轴缩短率 (FS%) 则高于心肌肥厚对照组。结论： 活化的AMPK可能通过增强心肌脂肪酸氧化从而抑制压力负荷增加引起的心肌肥厚。     

双表达外源性4-1BBL/IL-15的K562细胞活化外周血淋巴细胞的研究

为肿瘤过继免疫治疗开发体外激活T细胞、NK细胞的高效途径,研究双表达外源性4-1BBL和IL-15的K562细胞刺激外周血淋巴细胞活化的能力。采用分子克隆技术,分别将4-1BBL和IL-15基因插入双表达载体pVITRO-2,命名为pV4-1BBL-IL-15。经测序鉴定后,利用脂质体介导的转染及潮霉素筛选,获得稳定双表达4-1BBL、IL-15分子的K562细胞(K562/4-1BBL/IL-15)。经流式细胞仪(FACS)分选后,K562/4-1BBL/IL15细胞和K562细胞分别用丝裂霉素C处理,与外周血淋巴细胞孵育24 h,FACS检测淋巴细胞表面活化性受体CD69的表达。对NK细胞不仅同时检测活化性受体NKG2D的表达,还用乳酸脱氢酶释放法观察NK细胞受不同刺激细胞作用后,细胞毒活性的变化。结果显示受K562/4-1BBL/IL15细胞刺激后,T细胞CD69的表达无明显变化。γδT细胞CD69表达增长5倍。NK细胞CD69表达增长6倍,而NKG2D的表达增加1.5倍;NK细胞受K562/4-1BBL/IL15细胞作用72 h后,细胞毒活性明显提高。提示双表达4-1BBL/IL-15的K562细胞能够高效激活γδT细胞及NK细胞,有望用于肿瘤的过继免疫治疗。     

呼吸机持续气道正压通气联合枸橼酸咖啡因治疗早产儿呼吸暂停给药时间与临床疗效的关系

目的:观察呼吸机持续气道正压通气支持下的不同枸橼酸咖啡因给药时间对早产儿呼吸暂停(AOP)疗效的影响。方法:选取91例出生胎龄<32周的原发性呼吸暂停患儿,按照枸橼酸咖啡因给药时间的不同将患儿分为早期组(51例,出生24 h内在呼吸机持续气道正压通气下完成枸橼酸咖啡因给药)和常规组(40例,72 h内在呼吸机持续气道正压通气下给予枸橼酸咖啡因治疗)。比较两组患儿的呼吸机应用时间、给药时间、吸氧天数以及呼吸暂停改善情况,记录呼吸指标变化和不良反应发生情况。结果:早期组呼吸机使用时间、给药时间、吸氧天数、3 d后呼吸暂停次数及住院时间均明显低于常规组,差异有统计学意义(t=5.561,t=2.901,t=2.821,t=3.180,t=2.987;P<0.05)。经枸橼酸咖啡因治疗3 d后,两组患儿β-内啡肽水平及二氧化碳分压较治疗前均有显著降低,且早期组较常规组下降更为明显(t=0.408,t=3.294;P<0.05);氧分压及血氧饱和度均较治疗前有显著回升,早期组较常规组升高更显著(t=6.4758,t=2.121,t=2.409;P<0.05)。早期组的治疗有效率为86.2%(44/51),常规组为72.5%(29/40),两组比较差异具有统计学意义(Z=-2.149,P<0.05)。早期组不良反应事件发生率为13.7%(7/51),常规组为15.0%(6/40),两组比较差异无统计学意义。结论:呼吸机持续气道正压通气可以改善患儿呼吸功能,有助于患儿更好的渡过呼吸暂停危险期,早期给予枸橼酸咖啡因可促进患儿更快的恢复,显著缩短治疗时间,但不会增加不良事件的发生。     

补肾活血解毒法治疗再生障碍性贫血的临床研究

以补肾活血解毒法治疗再生障碍性贫血34例,与再障生血片对照组20例和单纯补肾组14例进行疗效对比研究。结果补肾活血解毒法治疗再障总有效率明显优于别两组（P均＜0．05）,且在症状、体征的改善及骨髓象和外周血象改善方面也优于另两组。提示补肾活血解毒法治疗再生障碍性贫血,治法新疑,方法可取。     

小柴胡片抗乙型肝炎病毒的初步实验研究

东汉名医张仲景所创的“小柴胡汤”方剂 ,自古以来就用以治疗肝病。现代医学研究证明小柴胡制剂具有免疫调节、抗炎、抗纤维化及保护肝细胞等作用。临床实践还观察到血清 HBe Ag转换现象 ,提示小柴胡还有抗 HBV的作用 ,学者们认为小柴胡可能是通过诱生干扰素、增加抗体产生、作用于枯否氏细胞等 ,达到抑制 HBV复制的目的。研究已证实小柴胡中的柴胡、甘草、黄芩在体外有抗病毒作用 ,但有关其抗HBV的研究 ,目前报道罕见。为探讨小柴胡的直接抗 HBV作用 ,我们以转染有 HBV全基因组的肝癌细胞系 2 .2 .15细胞为实验模型 (美国西奈山医…