自身免疫性疾病研究中的几个问题

自身免疫性疾病是由于正常免疫耐受功能受损导致免疫细胞及其成分对自身组织结构和功能的破坏，并出现一定临床表现的一类疾病。尽管具有一些共性，如常呈性慢发作，多发于女性，血甭中存在特异或非特异性自身抗体、激素或免疫抑制剂治疗有量其发病机制仍是众说纷纭，临床治疗效果不甚理想。近年来由于边缘学科及本身免疫学科的迅速发展，对自身免疫性疾病的研究也越来越深入，研究热点层出不穷。本文就其中的几个研究热点如Ｔ细胞亚     

重组结核分枝杆菌多表位肽的免疫原性研究

目的探讨纯化的重组结核分枝杆菌多表位肽激发细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)免疫应答的能力,为新型结核疫苗的设计打下基础。方法通过细胞增殖和细胞毒性实验,研究纯化的重组表达多表位肽刺激外周血单个核细胞(PBMC)产生的增殖反应和细胞毒活性,初步鉴定重组多表位肽的免疫原性。结果以刺激系数(SI)>3为界,多表位肽(10μmol)能刺激全部10例HLA-A*0201阳性(A2+)结核菌素阳性(PPD+)健康个体的PBMC发生增殖,SI为46.2±5.6;增殖反应明显高于单肽(平均SI为10.2±2.3)以及PPD(平均SI为15.6±3.6)引起的细胞增殖反应(P<0.01)。在多表位肽诱导的CTL细胞毒活性分析中以负载抗原肽(10μmol)的T2细胞作为靶细胞,多表位肽诱导的CTL作为效应细胞,多表位肽能诱导全部的10例A2+PPD+健康个体中CTL杀伤活性,平均活性分别为(86.2±9.6%),显著高于单肽[平均为(25.4±3.6)%]和PPD[平均为(22.6±2.8)%](P<0.01)。结论重组优化多表位肽在细胞水平具有较好的免疫原性,能有效刺激PBMC产生细胞增殖反应和细胞毒活性。     

人源M2三联体靶抗原BPO-E2融合蛋白的克隆表达与鉴定

目的用基因工程的方法克隆表达抗线粒体抗体二亚型（AMA-M2）的3个靶抗原侧链二氧酸脱氢酶复合体E2（BCOADC-E2）、丙酮酸脱氢酶复合体E2（PDC-E2）、2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2（OGDC-E2）及其连接形成的三联体BPO-E2融合蛋白，以用于人原发性胆汁性肝硬化（PBC）的早期发现和临床诊断。方法针对BCOADC-E2、PDC-E2、OGDC-E2的cDNA序列设计引物，从正常人的淋巴细胞中提取RNA，通过反转录PCR方法扩增得到相应的基因片段，经测定序列验证后插入表达载体pET28a（＋），构建重组表达载体pET28a（＋）-BCOADC-E2、pET28a（＋）-PDC-E2、pET28a（＋）-OGDC-E2、pET28a（＋）-BPO-E2，转化大肠杆菌BL21（DE3）后诱导表达蛋白质。表达蛋白经SDS-PAGE、Western-blot等鉴定。结果经核苷酸序列测定和酶切鉴定结果表明，成功地构建了4种重组质粒。IPTG诱导表达后，获得4种融合蛋白。经免疫学鉴定，重组抗原片段具有AMA-M2的免疫原性。结论重组表达的融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化（PBC）的实验室诊断。     

结核杆菌抗原Rv0173的HLA-A*0201限制性CTL表位的预测及鉴定

目的 鉴定结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)抗原Rv0173中的HLA-A*0201限制性CTL表位.方法 应用数据库SYFPETTHI预测结核杆菌Rv0173中可能存在的HLA-A*0201限制性CTL表位,经流式细胞术分析各抗原肽与HLA-A*0201的亲合力,经时间分辨荧光法检测外周血单个核细胞(PBMCs)对各抗原肽产生的增殖反应,经细胞毒性实验研究各抗原肽诱导的特异性T细胞的细胞毒杀伤活性,逐步鉴定Rv0173的HLA-A*0201限制性CTL表位.结果 位于Rv0173氨基酸序列肽3(21-30aa)和抗原肽7(161-170aa)与HLA-A*0201分子具有较高的亲合力,并都能刺激HLA-A*0201阳性个体PBMCs增殖,并诱导产生特异性杀伤活性.结论 肽3(RLSQSADQYL)(21-30aa)和肽7(LLRGGGLVNL)(161-170aa)是抗原Rv0173上HLA-A*0201限制性CTL的优势表位,可作为结核疫苗设计的候选表位.     

Internet网上虚拟医院介绍

Ｉｎｔｅｒｎｅｔ是世界上影响最大、用户最多的国际互联网 ,目前正以惊人的速度渗透到现代生活的各个方面 ,网络功能越来越强大 ,如 :网上购物、网上看病、网上学术交流和网上资料查询等。以网络为中心 ,是 2 1世纪人们生活的新方式 ,网上虚拟医院也就是在新的形势下的必然产物。国外在网上开设医院已运行多年 ,但国内尚属起步阶段。1　虚拟医院的概念利用Ｉｎｔｅｒｎｅｔ网络提供远程数据通信、资源共享技术、计算机多媒体技术以及虚拟现实技术 ,在互联网上设置专门的医学结点。访问者通过访问该站点 ,和服务器交互操作 ,就如同进入一个…     

自身免疫性肝病自身抗体检测的临床意义

自身免疫性肝病(autoimmuneliverdisease,ALD)是指一组病因尚不明确,但普遍认为与自身免疫有关的肝脏疾病。通常包括自身免疫性肝炎(autoimmunehepatitis,AIH)、原发性胆汁性肝硬化(primarybiliarycirrhosis,PBC)及原发性硬化性胆管炎(primarysclerosingcholangi-tis,PSC)。AIH     

类风湿关节炎患者免疫功能分析及意义

类风湿关节炎患者免疫功能分析及意义邓安梅仲人前孔宪涛采用流式细胞术和酶联检测仪技术，对类风湿关节炎（ＲＡ）患者外周血免疫指标进行分析，探讨类风湿关节炎发病的免疫机制。１资料和方法３０例ＲＡ患者均按美国风湿病学会１９８７年制定的ＲＡ诊断标准确诊，平均年...     

白细胞介素-10基因多态性与自身免疫性肝病相关性研究

目的研究白细胞介素10(IL-10)基因启动子区域-592、-819和-1082位单核昔酸多态性与自身免疫性肝病发病之间的关系。方法分别采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析法(PCRRFLP)和聚合酶链反应一序列特异性引物扩增法(PCRSSP)检测54例自身免疫性肝炎(AIH)，77例原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者及160例健康献血员外周血单个核细胞基因组DNA IL-10基因启动子区域3个多态位点-592，-819、-1082的基因多态性，并进行相关性分析。结果54例AIH和77例PBC患者与160例健康对照组的IL-10启动子-1082、-819和592基因型分布的统计学分析表明，差异无显著性。结论IL-10启动子基因多态性与自身免疫性肝病发病之间无显著关联性。     

mPEG-BTC修饰RhD（＋）红细胞在解决疑难输血问题上的探讨

目的：采用mPEG-BTC（1．0mmol／L．1h）遮蔽红细胞表面的血型抗原．解决临床配血困难病例的输血问题。方法：收集了15例临床配血困难及含高效价抗体的血清，用mPEG-BTC修饰供体红细胞，再将mPEG-BTC修饰后的红细胞与疑难配血患者的血清混合，用聚凝胺和抗人球蛋白方法检测。结果：疑难配血病例的血清与未经mPEG-BTC修饰的RBC混合，聚凝胺法和抗人球蛋白法均有不同程度的凝集；而与mPEG-BTC修饰后RBC混合，采用聚凝姣法和抗人球蛋白法显微镜下多视野均未见凝集：结论：在体外实验中，经mPEG-BTC修饰红细胞后，不再与临床配血困难病例血清中的抗体发生反应，为解决临床配血的困难奠定了基础。